一、目的要求

了解某一抗生素的抗菌范圍；學(xué)習(xí)抗菌譜試驗的基本方法。

二、基本原理

許多微生物在其生命活動過程中能產(chǎn)生某種特殊的代謝產(chǎn)物，具有選擇性地抑制或殺死其他微生物的作用，例如抗生素。不同抗生素的抗菌譜是不同的，某些抗生素只對少數(shù)細菌有抗菌作用，例如青霉素一般只對革蘭氏陽性菌有抗菌作用，多粘菌素只對革蘭氏陰性菌有作用，這類抗生素稱為窄譜抗生素；而另一些抗生素則對多種細菌有作用，例如四環(huán)素、土霉素對許多革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌都有作用，這類抗生素稱為廣譜抗生素。

如果將產(chǎn)生某種抗生素的菌劃直線接種在豆芽汁葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板上，經(jīng)培養(yǎng)后，就會長出一條菌帶，并產(chǎn)生某種抗生素向菌帶周圍擴散。再與這條菌帶相垂直劃直線接種某些不同的試驗菌，就會產(chǎn)生不同長度的抑菌帶，如圖Ⅸ-3。根據(jù)抑菌帶的長短，即可判斷該抗生素對不同微生物的影響。本實驗說明產(chǎn)黃青霉產(chǎn)生的青霉素對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌的抑制效果。

三、器材

產(chǎn)黃青霉（Peenicillium chrysogenum）、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌，枯草芽孢桿菌；

豆芽汁葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基，無菌平皿，接種環(huán)等。

四、操作步驟

1．將豆芽汁葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基溶化后，冷至45℃左右倒平板，凝固待用。

2．用接種環(huán)挑取產(chǎn)黃青霉的孢子在平板上按圖Ⅸ-3，1所示劃一直線。

3．接種后，倒置于28℃溫室中培養(yǎng)2 3天。

4．待上述平板形成菌苔后，再用接種環(huán)從產(chǎn)黃青霉菌的菌帶邊緣但不要接觸菌苔分別垂直向外劃直線（圖Ⅸ-3，2）接種大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌。

5．倒置于37℃溫室培養(yǎng)24小時。

6．觀察結(jié)果。

五、實驗報告

1．結(jié)果

繪圖表示并說明產(chǎn)黃青霉所產(chǎn)生的青霉素對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌的抑菌效能。