基因槍法又稱為微彈技術(shù)或者粒子轟擊細胞法。
定義
1987年,使用該技術(shù)在鎢粒表面附著MV(煙草花葉病毒)RNA,對洋蔥表皮細胞進行轟擊。通過檢測發(fā)現(xiàn),能夠復(fù)制病毒RNA,并且使用該技術(shù)往洋蔥表皮細胞中導(dǎo)入CAT基因由Vlein首先報道。如今,在番木瓜、甜橙、葡萄、、棉花、大豆、菜豆、小麥、黑麥草、甘蔗、煙草、水稻上應(yīng)用該技術(shù)獲得成功。
原理
基因槍技術(shù)又叫做微粒轟擊技術(shù)或者生物彈道技術(shù),是通過高壓氣體加速或者huo藥爆炸直接往完整的組織或者細胞中送入包裹了DNA的球狀金粉或者鎢粉顆粒的一種技術(shù)。其為基因轉(zhuǎn)移技術(shù)中的一種方法。
對微粒加速裝置進行使用,從而使得裹著外源基因的微米級的金或鎢(它們比重大, 而且化學(xué)性質(zhì)都很穩(wěn)定)顆粒獲得足夠的動量,往靶細胞或組織打入,是該技術(shù)的基本原理。
作用
通過壓縮氣體(氦或氮等) 動力使一種冷的氣體沖擊波產(chǎn)生,進入到轟擊室(所以使細胞因為“熱”氣體沖擊波導(dǎo)致?lián)p傷的情況得以避免),向著細胞打入粘有DNA 的細微金粉,將細胞壁、細胞膜、細胞質(zhì)等穿過到達細胞核,使基因轉(zhuǎn)移完成,此即是基因槍的作用。
大多數(shù)細胞會由于沒有合適的力道而遭受失敗,僅會有很少的細胞達到要求,然而基因轉(zhuǎn)移操作這很少的細胞就可以完成。有較大的密度,容易穿孔;有較小的口活性,對細胞有較小的危害是利用氦氣、金粉的主要原因。
2005-09-16 2097次
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基因?qū)雰x特點基因槍分類、操作和應(yīng)用
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