Ruxolitinib (INCB018424)生物活性產(chǎn)品描述Ruxolitinib (INCB018424)是*個(gè)應(yīng)用于臨床的、有效的、選擇性的JAK1/2抑制劑，IC50為3.3 nM/2.8 nM。作用于JAK1， JAK2與 作用于JAK3相比，選擇性強(qiáng)130倍多。靶點(diǎn)JAK2JAK1IC502.8 nM [1]3.3 nM [1]體外研究在Ba/F3細(xì)胞和HEL細(xì)胞中，INCB018424有效地和有選擇性地抑制JAK2V617F介導(dǎo)的信號(hào)傳導(dǎo)和細(xì)胞增殖。INCB018424以劑量依賴性的方式顯著地增加Ba/F3細(xì)胞的細(xì)胞凋亡。在Ba/F3細(xì)胞中，INCB018424(64 nM)致使線粒體去極化細(xì)胞增加一倍。INCB018424抑制來自正常捐助者和真性紅細(xì)胞增多癥患者的紅細(xì)胞前體細(xì)胞的增殖，IC50分別是407 nM 和223 nM。 INCB018424有效抑制紅細(xì)胞集落形成，IC50是67 nM。[1]體內(nèi)研究INCB018424（180 mg/kg，口服，每日兩次）導(dǎo)致JAK2V617F驅(qū)動(dòng)的小鼠模型的生存率在處理22天后大于90％。在JAK2V617F驅(qū)動(dòng)的小鼠模型中，INCB018424（180 mg/kg，口服，每日兩次）顯著降低脾臟腫大和炎癥因子的循環(huán)水平，并優(yōu)先消滅腫瘤細(xì)胞，造成顯著延長(zhǎng)的生存期，無骨髓抑制或免疫抑制作用。[1] 在骨髓纖維化的雙盲試驗(yàn)中，Ruxolitinib組的主要終點(diǎn)達(dá)到41.9％，安慰劑組則為0.7％。 Ruxolitinib導(dǎo)致脾體積持續(xù)減少和總癥狀得分提高50％或更多。[2] 在Ruxolitinib（15 mg，每天兩次）組內(nèi)，共28％骨髓纖維化患者至48周時(shí)脾臟體積減少至少35％，而接受zui好的治療組的比例為0%。Ruxolitinib致使脾臟長(zhǎng)度減少了56％，而接受zui好的治療組卻增加了4％。Ruxolitinib組患者的生活質(zhì)量得到提高和骨髓纖維化相關(guān)癥狀減少。[3]特征 推薦的實(shí)驗(yàn)操作(此推薦來自于公開的文獻(xiàn)所以Selleck并不保證其有效性)

激酶實(shí)驗(yàn): [1]

結(jié)合試驗(yàn)重組蛋白是使用Sf21細(xì)胞和桿狀病毒載體表達(dá)的，并通過親和層析純化。JAK激酶測(cè)定使用肽底物（-EQEDEPEGDYFEWLE）的均相時(shí)間分辨熒光測(cè)定法。酶反應(yīng)是用Ruxolitinib或?qū)φ眨琂AK酶，500 nM肽，三磷酸腺苷（ATP; 1mM），和2％的二甲基亞砜（DMSO）反應(yīng)1小時(shí)。 50％抑制濃度（IC50）時(shí)需要抑制50％熒光信號(hào)的INCB018424濃度。

細(xì)胞試驗(yàn): [1]

細(xì)胞系Ba/F3和HEL細(xì)胞濃度3 M處理時(shí)間48小時(shí)方法2 103細(xì)胞接種于的96孔板的一個(gè)孔中，用溶于DMSO的INCB018424（0.2％DMSO終濃度）在37℃和5% CO2條件下溫育48小時(shí)。存活率是通過使用細(xì)胞滴度格洛熒光素酶試劑或活細(xì)胞計(jì)數(shù)器測(cè)定ATP水平。數(shù)值轉(zhuǎn)換為相比對(duì)照的抑制百分率， IC50曲線使用Prism的GraphPad數(shù)據(jù)的非線性回歸分析擬合。

動(dòng)物實(shí)驗(yàn): [1]

動(dòng)物模型JAK2V617F驅(qū)動(dòng)的小鼠模型配制5％二甲基乙酰胺，0.5％methocellulose劑量180 mg/kg給藥處理口服

不同實(shí)驗(yàn)動(dòng)物依據(jù)體表面積的等效劑量轉(zhuǎn)換表（數(shù)據(jù)來源于FDA指南）

 狒狒狗猴兔豚鼠大鼠倉(cāng)鼠小鼠重量 (kg)121031.80.40.150.080.02體表面積 (m2)0.60.50.240.150.050.0250.020.007Km 系數(shù)202012128653動(dòng)物A (mg/kg) = 動(dòng)物B (mg/kg)  動(dòng)物B的Km系數(shù)動(dòng)物A的Km系數(shù)

例如，依據(jù)體表面積折算法，將白藜蘆醇用于小鼠的劑量22.4 mg/kg 換算成大鼠的劑量，需要將22.4 mg/kg 乘以小鼠的Km系數(shù)（3），再除以大鼠的Km系數(shù)（6），得到白藜蘆醇用于大鼠的等效劑量為11.2 mg/kg。

大鼠劑量 (mg/kg) = 小鼠劑量 (22.4 mg/kg)  小鼠的Km系數(shù)(3) = 11.2 mg/kg大鼠的Km系數(shù)(6)

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參考文獻(xiàn)

[1] Quintas-Cardama A, et al. Blood, 2010, 115(15), 3109-3117.

[2] Verstovsek S, et al. N Engl J Med, 2012, 366(9), 799-807.

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Clinical Trial Information( data from http://clinicaltrials.gov)NCT NumberRecruitmentConditionsSponsor
/CollaboratorsStart DatePhasesNCT02267278Not yet recruitingMyeloproliferative DiseasesM.D. Anderson Cancer Center|MEI Pharma, Inc.December 2014Phase 2NCT02257138Not yet recruitingLeukemia|Myeloproliferative DiseasesM.D. Anderson Cancer Center|Incyte CorporationDecember 2014Phase 1|Phase 2NCT02251821RecruitingPrimary Myelofibrosis|Secondary MyelofibrosisFred Hutchinson Cancer Research Center|National Cancer In ...moreNovember 2014Phase 2NCT02253277Not yet recruitingChronic Myeloid LeukemiaNovartis Pharmaceuticals|NovartisOctober 2014Phase 1|Phase 2NCT02091752RecruitingPrimary MyelofibrosisNovartis Pharmaceuticals|NovartisSeptember 2014Phase 2

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化學(xué)數(shù)據(jù)

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分子量306.37化學(xué)式

C17H18N6

CAS號(hào)941678-49-5穩(wěn)定性3年 -20℃粉狀6月-80℃溶于DMSO別名 溶解性 (25 C) *體外DMSO61 mg/mL (199 mM)水 1 mg/mL ( 1 mM)乙醇 1 mg/mL ( 1 mM)*  1 mg/ml 指產(chǎn)品微溶或不溶
* 溶解度檢測(cè)是由Selleck技術(shù)部門檢測(cè)的，可能會(huì)和文獻(xiàn)中提供的溶解度有所差異，這是由于生產(chǎn)工藝和批次不同產(chǎn)生的正常現(xiàn)象。Chemical Name(3R)-3-(4-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)-1H-pyrazol-1-yl)-3-cyclopentylpropanenitrile