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ECV-304人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞|ECV-304細(xì)胞

 將貼壁細(xì)胞消化后離心收集，懸浮細(xì)胞直接離心收集，以完全培養(yǎng)基或胎牛血清重懸細(xì)胞至終濃度約106/ml。加入10%的DMSO。以每管1～2ml分裝至凍存管中。用絕熱材料包裹置-70攝氏度冰箱冷凍過夜。次日保存到液氮中。

2.我們?yōu)榱怂鼈兡芾^續(xù)增殖,就用胰蛋白酶再把它們分開,然后再配制成細(xì)胞懸浮液,分開裝到好幾個(gè)瓶子里繼續(xù)培養(yǎng)--------傳代培養(yǎng).

細(xì)胞株 細(xì)胞系

1.它們都是傳代培養(yǎng)里面的概念.都是10代以后的

2.細(xì)胞株是傳代培養(yǎng)里10~50（不同物種不同組織細(xì)胞有差別吧）代,細(xì)胞系是50代以后的;

3.對(duì)于細(xì)胞繁殖而言,傳到10代就很不容易了,所以細(xì)胞株是極少數(shù)的細(xì)胞

4.50代以后,細(xì)胞繁殖會(huì)出現(xiàn)另一個(gè)危機(jī),基本上沒有什么細(xì)胞能再傳下去了.但是,有細(xì)胞發(fā)生了基因突變,像一個(gè)癌細(xì)胞一樣無限地分裂下去,這就是細(xì)胞系.

ECV-304人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞|ECV-304細(xì)胞細(xì)胞描述
1967年五月E. Klein and G. Klein從一位16歲黑人男性Burkitt s淋巴瘤患者建立了Daudi細(xì)胞株。表面免疫球蛋白陽性(sIg+)。 2-微球蛋白陰性，EBNA陽性，并有衣殼抗原VCA。細(xì)胞株攜帶EB病毒。 Daudi是典型的B淋巴母細(xì)胞，廣泛應(yīng)用于白血病發(fā)生機(jī)理的研究。

組織來源
外周血；B淋巴母細(xì)胞；Burkitt s淋巴瘤
 
形態(tài)
淋巴母細(xì)胞
 
培養(yǎng)基和添加劑
RPMI-1640(GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, glucose 2.5g/L, Sodium Pyruvate 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度。
 
供應(yīng)限制 A。僅供研究之用。 

運(yùn)輸保存：采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時(shí)，若干冰已經(jīng)完全融化，請(qǐng)立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)；若尚留有干冰，請(qǐng)立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用，請(qǐng)按指定條件貯存細(xì)胞，切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。

ECV-304人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 一般培養(yǎng)方法:

1、組織塊培養(yǎng)法

A）按照前述方法取材，將組織剪成或切成1mm3大小的小塊，并加入少許培養(yǎng)基使組織濕潤。

B）將小塊均勻涂布于瓶壁，每小塊間距0.2 cm～12.5px，一般在25mL培養(yǎng)瓶（底面積為437.5px2）可接種20～30小塊為宜，小塊放置后，輕輕翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶，使瓶底朝上，然后于瓶內(nèi)加入適量培養(yǎng)基蓋好瓶塞，將瓶傾斜放置在37℃溫箱內(nèi)。

C）培養(yǎng)2～4小時(shí)，待小塊貼附后，將培養(yǎng)瓶緩慢翻轉(zhuǎn)平放，靜置培養(yǎng)，動(dòng)作要輕，嚴(yán)禁搖動(dòng)和來回振蕩，以防ECV-304人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞  由于沖動(dòng)而使小塊漂起而造成培養(yǎng)失敗，若組織塊 不易貼壁可預(yù)先在瓶壁涂一薄層血清、胎汁或鼠尾膠原等。開始培養(yǎng)時(shí)培養(yǎng)基不宜多，以保持組織塊濕潤即可，培養(yǎng)24小時(shí)后再補(bǔ)液，培養(yǎng)初期移動(dòng)和觀察時(shí)要輕 拿輕放，開始幾天盡量不去搬動(dòng)，以利貼壁和生長，培養(yǎng)3～5天時(shí)可換液，一方面補(bǔ)充營養(yǎng)，一方面去除代謝產(chǎn)物和漂浮小塊所產(chǎn)生的毒性作用。

2、消化培養(yǎng)法

該方法是采用前述的消化分散法，將妨礙細(xì)胞生長的細(xì)胞間質(zhì)（包括基質(zhì)、纖維等）去除，使細(xì)胞分散形成細(xì)胞懸液，然后分瓶培養(yǎng)。

3、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

對(duì)于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

其它細(xì)胞株列表：

YB3000 HPMEC 人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial 
YB3010 HPMEC-a 人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞-成人 5 x 10^5 cells/vial 
YB3100 HPAEC 人肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial 
YB3110 HPASMC 人肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial 
YB3120 HPAF 人肺動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial 
YB3200 HPAEpiC 人肺泡上皮細(xì)胞 1 x 10^6 cells/vial 
YB3210 HBEpiC 人支氣管上皮細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial 
YB3220 HTEpiC 人氣管上皮細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial 
YB3230 HSAEpiC 人小氣道上皮細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial 
YB3300 HPF 人肺成纖維細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial 
YB3300-1 HPF 1 x 10^6 cells/vial 
YB3310 HPF-a 人肺成纖維細(xì)胞-成人 5 x 10^5 cells/vial 
YB3400 HBSMC 人支氣管平滑肌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial 
YB3410 HTSMC 人氣管平滑肌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial 
YB3420 HBF 人支氣管成纖維細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial 
       
Skeletal Muscle Cell System   骨骼肌細(xì)胞系統(tǒng)   
YB3500 HSkMC 人骨骼肌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial 
YB3510 HSkMSC 人骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial 
YB3520 HSkMM 人骨骼肌成肌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial 
       
Endocrine Cell System   內(nèi)分泌細(xì)胞系統(tǒng)   
YB3600 HAdMEC 人腎上腺微血管內(nèi)皮細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial 
YB3610 HAdCC 人腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial

 ★由于細(xì)胞庫現(xiàn)有細(xì)胞類目多，為了不出現(xiàn)混亂錯(cuò)誤，需要了解相關(guān)細(xì)胞價(jià)格及詳細(xì)資料直接call，對(duì)您造成的不便還請(qǐng)見諒！
 ★注：如運(yùn)輸過程中導(dǎo)致細(xì)胞污染或者死亡，我們將無條件補(bǔ)發(fā)
       收貨后十個(gè)工作日內(nèi)有其他問題提供照片可半價(jià)重發(fā)
最后，通過低溫保藏儲(chǔ)備一些細(xì)胞，以防支原體大面積來襲。如果支原體有抬頭的跡象，或常規(guī)檢測呈陽性結(jié)果，那么最可靠的補(bǔ)救措施是扔掉所有培養(yǎng)物，清潔培養(yǎng)箱和超凈臺(tái)，一切從頭開始。當(dāng)然，你得確保儲(chǔ)備的細(xì)胞是不含支原體的。