近日有位老客戶,實(shí)驗(yàn)中OD值出現(xiàn)讀值不正常的原因有哪些,現(xiàn)為您一一解答。
首先我們先來(lái)了解下何為 OD 值:OD是optical density(光密度)的縮寫(xiě),表示被檢測(cè)物吸收掉的光密度,是檢測(cè)方法里的專有名詞,檢測(cè)單位用OD值表示,1OD=1og(1/trans),其中trans為檢測(cè)物的透光值,光通過(guò)被檢測(cè)物,前后的能量差異即是被檢測(cè)物吸收掉的能量,特定波長(zhǎng)下,同一種被檢測(cè)物的濃度與被吸收的能量成定量關(guān)系。
在elisa試劑盒實(shí)際實(shí)驗(yàn)步驟中的影響因素較多,熟練的掌握操作技巧必定會(huì)事半功倍。下面來(lái)列舉下影響 OD 值不正常的因素:
1、試劑盒未回溫(對(duì)應(yīng)解決方法:試劑盒回溫到25℃)
2、溫度控制不好(對(duì)應(yīng)解決方法:控制正確溫度)
3、孵育時(shí)間不準(zhǔn)確(對(duì)應(yīng)解決方法:控制孵育時(shí)間)
4、洗滌時(shí)沖擊力太大、浸泡時(shí)間過(guò)長(zhǎng)、洗滌次數(shù)增加(對(duì)應(yīng)解決方法:洗滌4-5次,每孔250ul,然后拍干)
5、陽(yáng)光直射,對(duì)著風(fēng)直接吹(對(duì)應(yīng)解決方法:避風(fēng)避陽(yáng))
6、酶標(biāo)儀的波長(zhǎng)錯(cuò)誤elisa試劑盒(對(duì)應(yīng)解決方法:酶標(biāo)儀的波長(zhǎng)450nm)
7、抗體的稀釋錯(cuò)誤(對(duì)應(yīng)解決方法:正確的稀釋抗體)
8、水質(zhì)問(wèn)題(對(duì)應(yīng)解決方法:用娃哈哈礦泉水代替)
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