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SBC-5小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系_細(xì)胞株-杭州仟諾生物科技有限公司

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放大字體  縮小字體    發(fā)布日期:2019-09-03  來源:儀器信息網(wǎng)  作者:Mr liao  瀏覽次數(shù):230
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SBC-5小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞培養(yǎng)的基本原理與技術(shù) 現(xiàn)代生物技術(shù)一般認(rèn)為包括基因工程技術(shù)、細(xì)胞工程技術(shù)、酶工程技術(shù)和發(fā)酵工程技術(shù),而這些技術(shù)的發(fā)展幾乎都與細(xì)胞培養(yǎng)有密切關(guān)系,特別是在醫(yī)藥領(lǐng)域的發(fā)展,細(xì)胞培養(yǎng)更具有特殊的作用和價(jià)值。
SBC-5小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系

細(xì)胞用途:僅供科研使用。               

培養(yǎng)步驟

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1) 準(zhǔn)備基礎(chǔ)培養(yǎng)基( GIBCO,,添加NaHCO3 1.5g/L,丙酮酸鈉 0.11g/L);優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。

二. 細(xì)胞處理:

1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2)傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。

SBC-5小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系

 注意事項(xiàng):

1.收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。

2.先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置數(shù)小時(shí)(4h左右),穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),切忌在溫箱內(nèi)靜置過夜。

3.靜置后鏡檢,拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)。建議傳代后也拍照記錄細(xì)胞生長(zhǎng)情況。

4. 懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞瓶?jī)?nèi)液體都轉(zhuǎn)移至無菌離心管內(nèi),1000 轉(zhuǎn)/分鐘離心5min,培養(yǎng)基上清可備用,管底細(xì)胞沉淀用培養(yǎng)基重懸。鏡檢時(shí)若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)培養(yǎng);若密度未超過80%,細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),待達(dá)到80%時(shí)再正常傳代。備注:聚團(tuán)生長(zhǎng)慢,有密度依賴,必須使用T25培養(yǎng)瓶豎立培養(yǎng),3天一次半量換液一次,1-2周傳代一次。

貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,收集細(xì)胞瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基,留8ml繼續(xù)培養(yǎng)至80%左右再傳代,瓶蓋可稍微擰松。備注:細(xì)胞貼壁慢,傳代后細(xì)胞放2天不動(dòng)。

5.細(xì)胞瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基含血清和雙抗,可收集后4℃保存?zhèn)溆?,可補(bǔ)加2%血清。剛開始傳代時(shí)建議一半用細(xì)胞瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基,一半用客戶自備的培養(yǎng)基,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件,以免因不適應(yīng)而造成生長(zhǎng)狀態(tài)不佳。

6.因?yàn)榕囵B(yǎng)過程外因太多,所以我們的售后保障期為一周,超過一周的細(xì)胞我們會(huì)酌情處理,但不提供免費(fèi)更換服務(wù)。 
ZYC3001   人胚腎細(xì)胞   293T/17   形態(tài):貼壁,懸浮均有;上皮細(xì)胞樣   培養(yǎng)條件:MEM/F12 +10% FBS 
ZYC3002   人膀胱移行細(xì)胞乳頭瘤細(xì)胞   RT4   形態(tài):貼壁,懸浮均有;上皮細(xì)胞樣   培養(yǎng)條件:MEM/F12 +10% FBS 
ZYC3003   倉(cāng)鼠腎成纖維細(xì)胞   BHK-21 [C-13]   形態(tài):貼壁,懸浮均有;上皮細(xì)胞樣   培養(yǎng)條件:MEM/F12 +10% FBS 
ZYC3004   倉(cāng)鼠肺細(xì)胞   CHL   形態(tài):貼壁,懸浮均有;上皮細(xì)胞樣   培養(yǎng)條件:MEM/F12 +10% FBS 
ZYC3005   倉(cāng)鼠肺細(xì)胞   V79   形態(tài):貼壁,懸浮均有;上皮細(xì)胞樣   培養(yǎng)條件:MEM/F12 +10% FBS 


以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),91化工儀器網(wǎng)對(duì)此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示:為規(guī)避購(gòu)買風(fēng)險(xiǎn),建議您在購(gòu)買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。
電 話:17758005454 手 機(jī):17758005454

聯(lián)系我時(shí),告知來自 91化工儀器網(wǎng)

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