楊小姐(聯(lián)系我時,請說明是在91化工儀器網(wǎng)上看到的,謝謝)
各種實驗代做:WB代做,免疫組化,PCR代做,細(xì)胞檢測,食品安全檢測試劑,獸藥殘留檢測試劑,動物疫病類檢測,銷售高品質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品,對照品,ELISA試劑盒,細(xì)胞,血清,等等
上海研謹(jǐn)生物科技有限公司提供RT-PCR技術(shù)服務(wù)、細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)服務(wù)、原位雜交技術(shù)服務(wù)、免疫沉淀技術(shù)服務(wù)、Western Blotting技術(shù)服務(wù)、PCR實驗服務(wù),并為廣大科研用戶提供各種高品質(zhì)的高端化學(xué)試劑、生物學(xué)試劑、免疫學(xué)檢測,ELISA試劑盒、生化試劑盒、分析標(biāo)準(zhǔn)品、對照品、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、食品安全檢測試劑、動物疫病類檢測產(chǎn)品、獸藥殘留檢測試劑、細(xì)胞培養(yǎng)服務(wù)等,應(yīng)用覆蓋藥物分析領(lǐng)域、食品安全領(lǐng)域、聚合物研究領(lǐng)域、環(huán)境監(jiān)測領(lǐng)域,客戶廣泛分布于食品、制藥、第三方檢測、環(huán)境測試機(jī)構(gòu)、化工、科研院校、生物工程等行業(yè)。
主營:
1生化試劑、標(biāo)準(zhǔn)品對照品、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、
2.ELISA試劑盒、分離液、分離液試劑盒
3.細(xì)胞:原裝進(jìn)口細(xì)胞、國產(chǎn)腫瘤細(xì)胞、國產(chǎn)正常細(xì)胞、腫瘤耐藥細(xì)胞
4.食品安全檢測試劑、動物疫病類檢測產(chǎn)品、獸藥殘留檢測試劑
5.耗材:常用實驗耗材、移液器
貨號:YC1205 規(guī)格:100管/96樣
總抗氧化能力(Total antioxidant capacity,T-AOC)試劑盒說明書
微量法
注意:正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
研究意義:
測定對象中各種抗氧化物質(zhì)和抗氧化酶等構(gòu)成總抗氧化水平。在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)和藥學(xué)研究中常常檢測血漿、血清、唾液、尿液等各種體液,細(xì)胞或組織等裂解液、植物或中草藥抽提液及各種抗氧化物(antioxidant)溶液的總抗氧化能力。
測定原理:
在酸性環(huán)境下,還原 Fe3+-三吡啶三吖嗪(Fe3+-TPTZ)產(chǎn)生藍(lán)色的 Fe2+-TPTZ 的能力反映了總抗氧化能力。
自備實驗用品:
恒溫水浴鍋、低溫離心機(jī)、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。
試劑組成和配制:
提取液:液體 100mL 1 瓶,使用前預(yù)冷。
試劑一:液體 15mL 1 瓶,避光保存。
試劑二:液體 1.5mL 1 瓶,4℃避光保存。
試劑三:液體 1.5mL 1 瓶,避光保存。
混合液(現(xiàn)配現(xiàn)用):將試劑一、試劑二、試劑三按10:1:1的比例混合,使用前37℃預(yù)溫。
樣品的制備:
(1) 血清、血漿、唾液或尿液等液體樣品
血漿(制備時可以使用肝素或檸檬酸鈉抗凝,不宜使用EDTA抗凝)4℃,5000rpm 離心10min,取上清待測。血清、唾液或尿液樣品直接用于測定,也可以-80℃凍存(不宜超30d)后再測定。
(2) 組織樣品
按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液)進(jìn)行冰浴勻漿,然后10000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
(3) 細(xì)胞樣品
按照細(xì)胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎(功率200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);10000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
操作步驟:
1、分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長至593nm,蒸餾水調(diào)零。
2、操作表
空白管
測定管
混合液( L)
180
180
樣品( L)
6
雙蒸水( L)
24
18
充分混勻,反應(yīng)10min,于微量石英比色皿/96孔板,測定593nm吸光值,△A= A測定-A空白
注意:空白管只需測定一次。
總抗氧化能力計算公式:
a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線:y=0.6308x+0.1291,R2=0.9989
(1)按樣本質(zhì)量計算
總抗氧化能力(U/g)=(△A-0.1291) 0.6308 V 反總 (V 樣 V 樣總 W)
=53.9 (△A-0.1291) W
(2)按樣本蛋白濃度計算
總抗氧化能力(U/mg prot)=(△A-0.1291) 0.6308 V 反總 (V 樣 Cpr)
=53.9 (△A-0.1291) Cpr
(3)按細(xì)胞計算
總抗氧化能力(U/104cell)=(△A-0.1291) 0.6308 V反總 V樣 V樣總 細(xì)胞數(shù)量(萬個)= 53.9 (△A-0.1291) 細(xì)胞數(shù)量(萬個)
(4)按液體體積計算
總抗氧化能力(U/mL)=(△A-0.1291) 0.6308 V 反總 V 樣= 53.9 (△A-0.1291)
V 樣總:加入提取液體積,1 mL; V 反總:反應(yīng)總體積,204 L;V 樣:反應(yīng)中樣品體積,
6 L;W:樣品質(zhì)量,g;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL
b.用 96 孔板測定的計算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線:y=0.3154x+0.1291;R2=0.9989
(1)按樣本質(zhì)量計算
總抗氧化能力(U/g)=(△A-0.1291) 0.3154 V 反總 (V 樣 V 樣總 W)
=107.8 (△A-0.1291) W
(2)按樣本蛋白濃度計算
總抗氧化能力(U/mg prot)=(△A-0.1291) 0.3154 V 反總 (V 樣 Cpr)
=107.8 (△A-0.1291) Cpr
(3) 按細(xì)胞計算
總抗氧化能力(U/104cell)=(△A-0.1291) 0.3154 V反總 V樣 V樣總 細(xì)胞數(shù)量(萬個)= 107.8 (△A-0.1291) 細(xì)胞數(shù)量(萬個)
(4)按液體體積計算
總抗氧化能力(U/mL)=(△A-0.1291) 0.3154 V 反總 V 樣= 107.8 (△A-0.1291)
V 樣總:加入提取液體積,1 mL; V 反總:反應(yīng)總體積,204 L;V 樣:反應(yīng)中樣品體積,
6 L;W:樣品質(zhì)量,g;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL
注意事項:
1. 試劑二對人體有刺激性,請采取適當(dāng)?shù)姆雷o(hù)措施。為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴乳膠手套操作。
2. 盡量避免使用在酸性條件下呈藍(lán)色或接近藍(lán)色的試劑,否則對本試劑盒的檢測結(jié)果產(chǎn)生干擾。
3. 樣品中不宜添加 Tween、Triton 和 NP-40 等去垢劑和 DTT、巰基乙醇等影響氧化還原反應(yīng)的還原劑。
4. 如果樣品測定出來的吸光值在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍以外,需把樣品適當(dāng)稀釋或濃縮后再進(jìn)行測定。
5. 試劑盒 2-8℃保存。
微量葡萄糖含量試劑盒說明書(測組織、細(xì)菌或細(xì)胞)
ca++ mg++- atp 酶活性測定說明書