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總抗氧化能力試劑盒說明書-91化工儀器網(wǎng)

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放大字體  縮小字體    發(fā)布日期:2019-09-02  來源:儀器信息網(wǎng)  作者:Mr liao  瀏覽次數(shù):89
核心提示:021-65232515 服務(wù)熱線:400-66... 楊小姐(聯(lián)系我時,請說明是在91化工儀器網(wǎng)上看到的,謝謝) 各種實驗代做:WB代做,免疫組化,PCR代做,細(xì)胞檢測,食品安全檢測試劑,獸藥殘留檢測試劑,動物疫病類檢測,銷售高品質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品,對照品,ELISA試劑盒,細(xì)胞,血清,等等 上海研謹(jǐn)生物科技有限公司提供RT-PCR技術(shù)服務(wù)、細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)服務(wù)、原位雜交技術(shù)服務(wù)、免疫沉淀技術(shù)服務(wù)、Western Blotting技術(shù)服務(wù)、PCR實驗服務(wù),并為廣大科研用戶提供各種高品質(zhì)的高端化學(xué)試劑、生物學(xué)試劑、免疫
021-65232515 服務(wù)熱線:400-66...

楊小姐(聯(lián)系我時,請說明是在91化工儀器網(wǎng)上看到的,謝謝)


各種實驗代做:WB代做,免疫組化,PCR代做,細(xì)胞檢測,食品安全檢測試劑,獸藥殘留檢測試劑,動物疫病類檢測,銷售高品質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品,對照品,ELISA試劑盒,細(xì)胞,血清,等等


上海研謹(jǐn)生物科技有限公司提供RT-PCR技術(shù)服務(wù)、細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)服務(wù)、原位雜交技術(shù)服務(wù)、免疫沉淀技術(shù)服務(wù)、Western Blotting技術(shù)服務(wù)、PCR實驗服務(wù),并為廣大科研用戶提供各種高品質(zhì)的高端化學(xué)試劑、生物學(xué)試劑、免疫學(xué)檢測,ELISA試劑盒、生化試劑盒、分析標(biāo)準(zhǔn)品、對照品、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、食品安全檢測試劑、動物疫病類檢測產(chǎn)品、獸藥殘留檢測試劑、細(xì)胞培養(yǎng)服務(wù)等,應(yīng)用覆蓋藥物分析領(lǐng)域、食品安全領(lǐng)域、聚合物研究領(lǐng)域、環(huán)境監(jiān)測領(lǐng)域,客戶廣泛分布于食品、制藥、第三方檢測、環(huán)境測試機(jī)構(gòu)、化工、科研院校、生物工程等行業(yè)。

 

主營:

1生化試劑、標(biāo)準(zhǔn)品對照品、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、

2.ELISA試劑盒、分離液、分離液試劑盒

3.細(xì)胞:原裝進(jìn)口細(xì)胞、國產(chǎn)腫瘤細(xì)胞、國產(chǎn)正常細(xì)胞、腫瘤耐藥細(xì)胞

4.食品安全檢測試劑、動物疫病類檢測產(chǎn)品、獸藥殘留檢測試劑

5.耗材:常用實驗耗材、移液器


貨號:YC1205  規(guī)格:100管/96樣

 

總抗氧化能力(Total antioxidant capacity,T-AOC)試劑盒說明書

微量法

 

注意:正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。

研究意義:

測定對象中各種抗氧化物質(zhì)和抗氧化酶等構(gòu)成總抗氧化水平。在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)和藥學(xué)研究中常常檢測血漿、血清、唾液、尿液等各種體液,細(xì)胞或組織等裂解液、植物或中草藥抽提液及各種抗氧化物(antioxidant)溶液的總抗氧化能力。

測定原理:

在酸性環(huán)境下,還原 Fe3+-三吡啶三吖嗪(Fe3+-TPTZ)產(chǎn)生藍(lán)色的 Fe2+-TPTZ 的能力反映了總抗氧化能力。

自備實驗用品:

恒溫水浴鍋、低溫離心機(jī)、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。

試劑組成和配制:

提取液:液體 100mL 1 瓶,使用前預(yù)冷。

試劑一:液體 15mL 1 瓶,避光保存。

試劑二:液體 1.5mL 1 瓶,4℃避光保存。

試劑三:液體 1.5mL 1 瓶,避光保存。

混合液(現(xiàn)配現(xiàn)用):將試劑一、試劑二、試劑三按10:1:1的比例混合,使用前37℃預(yù)溫。

樣品的制備:

(1) 血清、血漿、唾液或尿液等液體樣品

血漿(制備時可以使用肝素或檸檬酸鈉抗凝,不宜使用EDTA抗凝)4℃,5000rpm 離心10min,取上清待測。血清、唾液或尿液樣品直接用于測定,也可以-80℃凍存(不宜超30d)后再測定。

(2) 組織樣品

按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液)進(jìn)行冰浴勻漿,然后10000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

(3) 細(xì)胞樣品

按照細(xì)胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎(功率200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);10000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

操作步驟:

1、分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長至593nm,蒸餾水調(diào)零。

 

 

 

 

 

2、操作表

 

空白管

測定管

混合液( L)

180

180

樣品( L)

 

6

雙蒸水( L)

24

18

充分混勻,反應(yīng)10min,于微量石英比色皿/96孔板,測定593nm吸光值,△A= A測定-A空白

注意:空白管只需測定一次。

總抗氧化能力計算公式:

a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)曲線:y=0.6308x+0.1291,R2=0.9989

(1)按樣本質(zhì)量計算

總抗氧化能力(U/g)=(△A-0.1291) 0.6308 V 反總 (V 樣 V 樣總 W)

=53.9 (△A-0.1291) W

(2)按樣本蛋白濃度計算

總抗氧化能力(U/mg prot)=(△A-0.1291) 0.6308 V 反總 (V 樣 Cpr)

=53.9 (△A-0.1291) Cpr

(3)按細(xì)胞計算

總抗氧化能力(U/104cell)=(△A-0.1291) 0.6308 V反總 V樣 V樣總 細(xì)胞數(shù)量(萬個)= 53.9 (△A-0.1291) 細(xì)胞數(shù)量(萬個)

(4)按液體體積計算

總抗氧化能力(U/mL)=(△A-0.1291) 0.6308 V 反總 V 樣= 53.9 (△A-0.1291)

V 樣總:加入提取液體積,1 mL; V 反總:反應(yīng)總體積,204 L;V 樣:反應(yīng)中樣品體積,

6 L;W:樣品質(zhì)量,g;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL

b.用 96 孔板測定的計算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)曲線:y=0.3154x+0.1291;R2=0.9989

(1)按樣本質(zhì)量計算

總抗氧化能力(U/g)=(△A-0.1291) 0.3154 V 反總 (V 樣 V 樣總 W)

=107.8 (△A-0.1291) W

(2)按樣本蛋白濃度計算

總抗氧化能力(U/mg prot)=(△A-0.1291) 0.3154 V 反總 (V 樣 Cpr)

=107.8 (△A-0.1291) Cpr

(3) 按細(xì)胞計算

總抗氧化能力(U/104cell)=(△A-0.1291) 0.3154 V反總 V樣 V樣總 細(xì)胞數(shù)量(萬個)= 107.8 (△A-0.1291) 細(xì)胞數(shù)量(萬個)

(4)按液體體積計算

總抗氧化能力(U/mL)=(△A-0.1291) 0.3154 V 反總 V 樣= 107.8 (△A-0.1291)

V 樣總:加入提取液體積,1 mL; V 反總:反應(yīng)總體積,204 L;V 樣:反應(yīng)中樣品體積,

6 L;W:樣品質(zhì)量,g;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL

 

 

注意事項:

1. 試劑二對人體有刺激性,請采取適當(dāng)?shù)姆雷o(hù)措施。為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴乳膠手套操作。

2. 盡量避免使用在酸性條件下呈藍(lán)色或接近藍(lán)色的試劑,否則對本試劑盒的檢測結(jié)果產(chǎn)生干擾。

3. 樣品中不宜添加 Tween、Triton 和 NP-40 等去垢劑和 DTT、巰基乙醇等影響氧化還原反應(yīng)的還原劑。

4. 如果樣品測定出來的吸光值在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍以外,需把樣品適當(dāng)稀釋或濃縮后再進(jìn)行測定。

5. 試劑盒 2-8℃保存。

 

微量葡萄糖含量試劑盒說明書(測組織、細(xì)菌或細(xì)胞)

ca++ mg++- atp 酶活性測定說明書

 

 
關(guān)鍵詞: 測定 抗氧化 樣品 能力 試劑
 
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