1)訓(xùn)練目的
了解細(xì)胞密度換算意義;掌握細(xì)胞密度換算方法。
2)實驗原理
細(xì)胞密度換算實際上是根據(jù)溶液稀釋公式,即溶液稀釋前后溶質(zhì)含量保持不變。
3 )買驗材料
計算紙、筆、計算器、移液器、吸頭、小試管。
4)操作步驟
(1)意義
在細(xì)胞培養(yǎng)實驗設(shè)計中,常根據(jù)設(shè)計需求制備一定量、一定濃度的細(xì)胞懸液,就涉及問題。稀釋錯誤將導(dǎo)致實驗出現(xiàn)偏差。
(2)方法
實際上仍根據(jù)溶液稀釋公式,即溶液稀釋前后溶質(zhì)含量保持不變。
c1 v1=c2 v2
式中c1、v1 溶液稀釋前的濃度和體積;
c2、v2 溶液稀釋后的濃度和體積。
例如:欲配制10 mL,106個/mL的細(xì)胞懸液,現(xiàn)有107個/mL的細(xì)胞懸液若干毫升,應(yīng)如何稀釋?
已知:c1=107/mL,c2=106/mL,v2=10 mL,求v1。根據(jù)上式得:
v1=c2 v2/c1=106x10/107=1 mL
即取107/mL的細(xì)胞懸液1 mL,不加9 mL培養(yǎng)液,即成10 mL、106/mL的細(xì)胞懸液。
(3)計算并配制
將原液作20倍稀釋后,通過細(xì)胞計數(shù),已知4個大方格的細(xì)胞數(shù)為140個,試計算原液中的細(xì)胞密度(細(xì)胞數(shù)/mL);欲配制每mL含20個細(xì)胞的細(xì)胞懸液共6.5 mL,應(yīng)將原液如何稀釋?
提示:原液中細(xì)胞密度(細(xì)胞數(shù)/mL)=(4大格細(xì)胞數(shù)之和/4) 104x20(原液稀釋倍數(shù))
(來源:舜冉(上海)生物科技有限公司)關(guān)注本網(wǎng)官方微信 隨時閱讀專業(yè)資訊