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資源名稱:脆弱擬桿菌保存

種屬: Bacteroides fragilis
分離基物     闌尾膿腫
提供形式     凍干管，斜面培養(yǎng)物
安全等級(jí)     1
模式菌株     yes
應(yīng)用領(lǐng)域     模式菌株。質(zhì)量控制、藥敏試驗(yàn)菌株
培養(yǎng)方法    
培養(yǎng)基     TSA＋5%脫纖維羊血
傳代方法     ①凍干管：75%酒精擦拭管壁，后用砂輪在凍干管壁劃兩圈，掰斷，用200 L無菌水或培養(yǎng)基充分溶解，平板涂布，活化培養(yǎng)。 ②斜面：試管口用75%酒精擦拭后，火焰灼燒，后用無菌接種鏟切塊，挑取接入平板或斜面，培養(yǎng)。
生長(zhǎng)條件     37℃，厭氧
存儲(chǔ)條件     2-8℃冷藏，凍干管10年以上，斜面1-3個(gè)月。
脆弱擬桿菌保存檢測(cè)方法： 
1．將病人標(biāo)本和/或液狀對(duì)照品放至室溫（15-30℃），輕輕混勻。測(cè)試前從包裝袋中取出檢測(cè)卡平放。
2．將1根Binax樣本拭子浸入要測(cè)試的標(biāo)本中，完全浸沒拭子頭。如果拭子有滴水，將拭子靠在收集容器的邊上，排去多余的液體。
3．檢測(cè)卡內(nèi)部的右手邊有兩個(gè)孔，將拭子插入底部的孔中（拭子孔），穩(wěn)步向前推，使整個(gè)拭子頭在上部的孔中可見，不要取出拭子。
4．垂直持放A試劑瓶，高出檢測(cè)卡上方1/2到1英寸，慢慢向底部的孔中加入3滴A試劑。
5．立即從檢測(cè)卡的右緣揭去粘附襯，封閉檢測(cè)卡，過15分鐘在窗口判讀結(jié)果。15分鐘后讀取的結(jié)果可能不準(zhǔn)確。然而，有些陽性病人不到15分鐘就出現(xiàn)可見樣品線。
注意事項(xiàng)：
1.  取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。
2.  凍存液的問題：凍存液的配置已是常識(shí)，在這里不作詳述，但二甲基亞砜（DMSO）對(duì)細(xì)胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對(duì)細(xì)胞的毒副作 較大，因此，必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會(huì)造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜（DMSO）zui好選擇進(jìn)口產(chǎn)品。
3.  離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對(duì)細(xì)胞的損傷。
4.  離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè)，去除 DMSO，去除死細(xì)胞，這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對(duì)一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會(huì)受壓過大， 死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜（DMSO），DMSO對(duì)細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液 體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無有異常。
5.  細(xì)胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時(shí)1ml細(xì)胞液要加10ml－15m培養(yǎng)液，而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。
6.  復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題：試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇1管細(xì)胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細(xì)胞濃度過低，不利于細(xì)胞的貼壁。
7.  加培養(yǎng)基的量放入問題：這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問題是DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會(huì)比較大，就會(huì)影響 細(xì)胞生長(zhǎng)，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于0.5%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響，還有一個(gè)說法是1％。所以如果你的凍存液的濃度是 10％DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。

偶氮胭脂紅B分子式：681.62分子量：C28H17N3Na2O9S3英文名稱：AzorougeredBCAS號(hào)：25360-72-9
人參皂苷Rh1分子式：638.87208分子量：C36H62O9英文名稱：GinsenosideRh1CAS號(hào)：63223-86-9
3-溴三氟硼酸鉀英文名稱：3-Bromophenylthreekbf4CAS號(hào)：374564-34-8分子式：262.9分子量：C6H4BBrF3K
種菌唑英文名稱：SpeciesofbacteriaCAS號(hào)：125225-28-7分子式：333.861分子量：C18H24ClN3O
(S,S)-2-氮雜雙環(huán)[3,3,0]辛烷-3-羧芐酯鹽鹽分子式：281.78分子量：C15H20ClNO2英文名稱：(S,S)-2-azabicyclo[3,3,0]octane-3-carboxylicacidbenzylesterhydrochlorideCAS號(hào)：93779-29-4
三氟四氫呋喃絡(luò)合物英文名稱：ThreeborontrifluoridetetrahydrofurancomplexCAS號(hào)：462-34-0分子式：139.91分子量：C4H8BF3O
白花前胡素D分子式：426.4624分子量：C24H26O7英文名稱：WhiteflowersDCAS號(hào)：
5-尿嘧英文名稱：5-aminouracilCAS號(hào)：932-52-5分子式：127.1分子量：C4H5N3O2
聯(lián)英文名稱：BiphenylCAS號(hào)：92-52-4分子式：154.21分子量：C12H10A673(人橫紋肌瘤細(xì)胞)5 106cells/瓶 2
CRFK(貓腎細(xì)胞)5 106cells/瓶 2
小鼠內(nèi)臟脂肪細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
A549/DDP, 人肺腺耐藥細(xì)胞株
食管鱗英文名稱：KYSE150
5%糖發(fā)酵管/5% Lactose Ferment Broth糖遲發(fā)酵菌種的鑒別250克國產(chǎn)/進(jìn)口
人軟骨細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
PLET瓊脂基礎(chǔ)/多粘菌素B溶菌酶乙二胺四乙酸乙酸亞瓊脂基礎(chǔ)/PLET Agar base炭疽桿菌的分離鑒別250克國產(chǎn)/進(jìn)口
人回盲腸細(xì)胞英文名稱：HCT-8
改良SKIRROW氏瓊脂基礎(chǔ)/空腸彎曲菌瓊脂基礎(chǔ)/Skirrow Agar base Modified用于空腸彎曲菌的分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口
IN-m5f(大鼠胰島 細(xì)胞瘤細(xì)胞)5 106cells/瓶 2gersion
小鼠骨髓瘤細(xì)胞英文名稱：FO
1-boc-3-吡咯烷英文名稱：1-boc-3-cyanopyrrolidinesCAS號(hào)：132945-76-7分子式：196.25分子量：C10H16N2O2
3-氟-5-硝甲英文名稱：3--5-nitrotolueneCAS號(hào)：499-08-1分子式：155.13分子量：C7H6FNO2
4--2,6-二氯吡英文名稱：4-two-2,6-CAS號(hào)：2587/2/2分子式：163分子量：C5H4Cl2N2
4-丙酰聯(lián)英文名稱：4-CCAS號(hào)：37940-57-1分子式：210.27分子量：C15H14O