比色法是以生成有色化合物的顯色反應為基礎的,一般包括兩個步驟:首先是選擇適當?shù)娘@色試劑與待測組分反應,形成有色化合物,然后再比較或測量有色化合物的顏色深度。 比色分析對顯色反應的基本要求是:1.反應應具有較高的選擇性,即選用的顯色劑zui好只與待測組分反應,而不與其他干擾組分反應或其他組分的干擾很?。?.反應生成的有色化合物有恒定的組分和較高的穩(wěn)定性;3.反應生成的有色化合物有足夠的靈敏度,摩爾吸光系數(shù)一般應在104以上;4.反應生成的有色化合物與顯色劑之間的顏色差別較大,它們的zui大吸收濃度之差一般應在60納米以上。選用的顯色劑可以是一種試劑,也可以是兩種不同的試劑。如果待測組分與兩種不同的試劑反應生成一種有色化合物,則稱為三元絡合物顯色反應。這類顯色反應常常具有更高的靈敏度和選擇性,在比色法和紫外-可見分光光度法中應用非常普遍。選擇適當?shù)娘@色反應,研究zui合適的反應條件和消除干擾的方法是比色分析的關鍵問題。溶液的酸度、顯色劑的用量、溫度、溶劑等對顯色反應都是有所影響的。
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