1、 三羥甲基氨基甲烷(Tris(hydroxymethyl)aminomethane,一般簡稱為Tris)
一種有機化合物,其分子式為(HOCH2)3CNH2。Tris被廣泛應用于生物化學和分子生物學實驗中的緩沖液的制備。例如,在生物化學實驗中常用的TAE和TBE緩沖液(用于核酸的溶解)都需要用到Tris。由于它含有氨基,因此可以與醛發(fā)生縮合反應。
兩種溶液作用機制不同
Triton X-100是一種非離子表面活性劑,有破膜作用
Tris-HCl具有緩沖pH值作用,是一種堿性裂解液
2、 Triton X-100 (曲拉通 X-100)(磷酸緩沖液)
化學名稱為聚乙二醇辛基苯基醚,是一種優(yōu)異的表面活化劑,潤濕及洗滌劑。在免疫組織化學(厚切片) 和免疫細胞化學中,Triton X-100 被用來做細胞破膜劑/細胞通透劑,即在細胞膜上打孔。這樣抗體就能進入內(nèi)與相關(guān)的抗原結(jié)合了。
Triton X100一般在阻斷緩沖液中或稀釋緩沖液中使用,基本不用做洗液。使用濃度0.2%。較厚的石蠟切片更應該應用Triton X100,這樣可以獲得更好的染色背景。
Tris-HCl提供一個一定pH值緩沖環(huán)境,它的作用根據(jù)其不同的PH有很多作用,可以被用作梯度洗脫液,封閉液,總而言之就是為了控制溶液的PH。
3、 水飽和酚與Tris飽和酚的作用與區(qū)別
(1)水飽和酚(Phenol Water)又叫水平衡酚。水飽和酚的PH小于7,一般是PH為5.0左右,通常與異硫氫酸胍一起使用,用于細胞RNA的提取,在酸性環(huán)境中,DNA在酚相,RNA在水相。兩者就分開了。
(2)Tris飽和酚(Tris-phenol)一般PH大于7.8,用于DNA的提取:
其中,酚是強的蛋白變性劑,可以使細胞或組織中的蛋白質(zhì)變性析出。
而Tris的主要作用是防治止酚類氧化,若酚類氧化,則會形成醌(兩個苯環(huán)),醌含有強自由基,會破壞核酸結(jié)構(gòu)。 同時,由于PH值大于7,在堿性環(huán)境中DNA處于水相,RNA處于有機相。從而分離上清,即可得到DNA
4、 EDTA中文名稱為乙二胺四乙酸,是的金屬螯合劑,
我們常用的抗凝劑主要有兩類,
一類是Ca鈣離子螯合劑,如檸檬酸鈉,檸檬酸鉀,草酸鈉等,
另一類是生物活性抗凝劑,如肝素等,
當血液中的鈣離子被螯合劑結(jié)合后,血液因沒有鈣離子而無法凝結(jié),如果EDTA能夠抗凝的話,應該是遵循螯合鈣離子,而使血液無法凝固
5、 Milli-Qwater
超純水
特別適用AA、IC等的微量離子分析
6、 乙酸銨的作用:沉淀蛋白質(zhì)
7、二烷基硫酸鈉;K12;AS;SDS;Sodium lauryl sulfate
十二烷基硫酸鈉又稱K12、AS簡稱SDS,結(jié)構(gòu)式CH3(CH2)11OSO3Na,分子量288.39。白色至微黃色粉末,微有特殊氣體,表觀密度0.25g/mL,熔點180~185℃(分解),易溶于水,HLB值為40.無毒。
用作丙烯酸酯乳液聚合的陰離子表面活性劑。貯存于陰涼、通風、干燥的庫房內(nèi),防火、防水、防潮。
關(guān)注本網(wǎng)官方微信 隨時閱讀專業(yè)資訊