上海圻明生物紅細(xì)胞裂解液現(xiàn)貨供應(yīng)??芍苯优c血液或脾細(xì)胞懸液混合,也可用于重懸離心收集的血細(xì)胞,其能夠選擇性裂解樣品中的紅細(xì)胞,而不破壞白細(xì)胞。通過低速離心的方法去除紅細(xì)胞裂解碎片和血小板,收集白細(xì)胞,回收率可達(dá)90%以上。被富集的白細(xì)胞的生物學(xué)活性不受影響,可用于各種后續(xù)的細(xì)胞實驗。當(dāng)從得到的白細(xì)胞中提取DNA、RNA、和蛋白質(zhì)時,可免除紅細(xì)胞成分如血紅素等的不利影響。適于裂解人全血、小鼠全血或脾細(xì)胞懸液中的紅細(xì)胞。
規(guī)格:100 ml
與全血混合直接裂解紅細(xì)胞:
1.采取0.35 ml人或小鼠全血,加入1.5 ml離心管
2.加1 ml紅細(xì)胞裂解液,顛倒混合,室溫放置10 min。
3. 1500g離心5分鐘,棄上清。細(xì)胞沉淀應(yīng)為白色。如果裂解不完全,可用1 ml裂解液重懸細(xì)胞沉淀,室溫靜置10 min。1500g離心5分鐘,棄上清。
4. 用1.5 ml PBS緩沖液或生理鹽水重懸細(xì)胞,1500g離心5分鐘,棄上清。重復(fù)洗滌2次。
重懸細(xì)胞沉淀后裂解紅細(xì)胞:
1.采取1 ml人全血或小鼠全血,枸櫞酸鈉或EDTA或肝素抗凝。或用1個小鼠脾臟制備的細(xì)胞懸液,1500g離心10分鐘收集所有細(xì)胞。棄上清。
2.加3 ml 裂解液重懸細(xì)胞(約100~200萬個細(xì)胞)。顛倒混合,室溫放置10 min。
3.1500g離心5分鐘,棄上清。細(xì)胞沉淀應(yīng)為白色。如果裂解不完全,應(yīng)重復(fù)步驟2-3
4.用1.5 ml PBS或生理鹽水重懸細(xì)胞,1500g離心5分鐘,棄上清。重復(fù)洗滌2次。
說明:
1.每3 ml裂解液可充分裂解約1 ml的全血中的紅細(xì)胞,可按此比例擴大或縮小規(guī)模。加入過少的裂解液可能導(dǎo)致紅細(xì)胞裂解不完全。
2.該裂解液裂解人和小鼠紅細(xì)胞效果佳,裂解其他動物紅細(xì)胞時效率略低但仍可裂解。
3.盡量使用4 C儲存小于1周的血液。
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