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人結(jié)腸癌細(xì)胞；NCI-H508圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 人結(jié)腸癌細(xì)胞；NCI-H508圖片
形態(tài)特性  上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法 
傳代情況 
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）
STR  Amelogenin：X；CSF1PO：11，12；D13S317：8，12；D16S539：12；D18S51：18；D19S433：14；D21S11：29，32.2；D2S1338：18，19，27；D3S1358：14，17；D5S818：12；D7S820：8，12；D8S1179：12；FGA：24，25；TH01：9，9.3；TPOX：8，11；vWA：15，16；
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以內(nèi)，活力 95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

3091-1.5液相 RNase 清除劑1.5mL
?；撬崦撗跄懰?g
AG490(JAK 抑制劑 )5mg
NAO 25mg
玻璃勻漿器 ,10mL1套
22-0550-1Quin-2AM1mg
130433-50磁珠動(dòng)物 DNAout50 次
親和層析柱50 mL
剝離硅烷50mL
RNA 長(zhǎng)效保存液1.5mL
自誘導(dǎo)液體培養(yǎng)基 (arab 啟動(dòng)子 )200mL
120914-200小鼠淋巴細(xì)胞分離液 1.092200mL
60807-50柱式無(wú)內(nèi)毒素質(zhì)粒 DNAout50 次
人甲基化 / 非甲基化 DNA 標(biāo)準(zhǔn)品100 次
D- 氨基酸氧化酶5 mg
PCR 抑制物清除劑1mL
人血液和骨髓造血干細(xì)胞分離液 1.068-1200mL
18-0470-48羥脯氨酸測(cè)試盒 ( 消化法 )( 測(cè)培養(yǎng)細(xì)胞、培養(yǎng)液 )48 T
101222-1.5DNA 堿性膠上樣液 ,6 1.5mL
山羊抗小鼠 IgG(H+L), 堿性磷酸酶標(biāo)記100 L
DNA  SDS( 十二烷基硫酸 )100g1-Bromopropane1-溴丙烷106-94-5
1-Iodo-3-nitrobenzene1-碘-3-基645-00-1
Tetraisopropyl methylenediphosphonate亞基二磷酸四異丙酯1660-95-3
AZOMETHINE H偶氮-H-,水合5941/7/1
Erythromycin紅霉素114-07-8
CHROMIUM(III) FLUORIDE化鉻7788-97-8
4-(Trifluoromethoxy)benzonitrile4-三氧基332-25-2
2,3-Dichlorophenol2,3-二酚576-24-9
Histamine dihydrochloride組胺二酸56-92-8
XANTHOTOXOL(RG)花椒毒酚
Allyl phenyl sulfone丙基砜16212-05-8
Sodium ferulic阿魏酸24276-84-4
Platinum(0)-1,3-divinyl-1,1,3,3-tetramethyldisiloxane1,3-二乙基-1,1,3,3-四基二硅氧烷鉑(0)68478-92-2
2-AMINOETHANETHIOL -巰基乙胺60-23-1
N-BUTANE正丁烷106-97-8
Sodium formate酸141-53-7
1,3,5-Tri-2-propenyl-1,3,5-triazine-2,4,6(1H,3H,5H)-trione三丙基異脲酸酯1025-15-6
(R)-(+)-2-AMINOMETHYL-1-ETHYLPYRROLIDINE2-(氨基)-1-乙基吡咯烷22795-97-7
(S)-(-)-2-Methyl-2-propanesulfinamideS-叔丁基亞磺酰胺343338-28-3
TRIS(NONYLPHENYL) PHOSPHITE三(4-壬基)亞磷酸酯3050-88-2
4-Pentylcyclohexanone對(duì)基環(huán)己61203-83-6
6-Aminofluorescein6-氨基熒光素51649-83-3