THP-1細胞/ THP-1人單核細胞白血病  培養(yǎng)步驟

產(chǎn)品名稱：THP-1細胞

中文名稱：人單核細胞白血?。籘HP-1

規(guī)格：T25

形態(tài)特征：該細胞從一名1歲的患有急性單核細胞性白血病的男孩的外周血中分離建立。該細胞可以吞噬乳膠顆粒和激活的紅細胞，細胞膜和胞漿內(nèi)均沒有免疫球蛋白，表達C3R和FcR；可受佛波酯TPA誘導(dǎo)向單核系方向分化；可作為轉(zhuǎn)染宿主。

生長狀態(tài)：單核細胞

特征特性：懸浮生長

培養(yǎng)條件：RPMI1640+0.05mM2-硫基乙醇+10%FBS（推薦HAKATA優(yōu)等胎牛血清貨號：HN-FBS-500）

傳代方法：維持細胞濃度在2~4 105~8 105/ml，勿超過1 106/ml；2~3天換液1次。

凍存條件：HAKATA 無血清細胞凍存液 貨號：H-W-100 規(guī)格：100ML

支原體檢測：陰性

使用權(quán)限：A類

參考文獻：

供應(yīng)商：上?；鄯f生物科技有限公司

復(fù)蘇周期：10個工作日左右

培養(yǎng)步驟：

1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加4-6mL完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

1、對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的完全培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細胞，完全脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

PS：若客戶收到2ml小管細胞，收到細胞后，用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作；將小管細胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右完全培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細胞密度：若密度未超過80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進行傳代（方法同上）。

2、對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，進行離心收集，1000RPM條件下離心8-10分鐘，去除上清，按凍存數(shù)量加入血清及DMSO，凍存比例為90%FBS+10%DMSO。

PS：若客戶收到2ml小管細胞，收到細胞后，用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作；將小管細胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右完全培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細胞密度：若密度未超過80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進行傳代（方法同上）。

慧穎生物是一家專業(yè)從事細胞培養(yǎng)相關(guān)產(chǎn)品的公司，擁有獨立細胞房（可隨時約定參觀），供應(yīng)胎牛血清，無血清細胞凍存液，無血清培養(yǎng)基，常規(guī)培養(yǎng)基，胰酶，雙抗，完全培養(yǎng)基，STR鑒定細胞，感受態(tài)細胞等，專業(yè)，專注，性價比高，是您Shou選之家。

熱賣細胞：

貨號  簡稱  中文名稱  培養(yǎng)條件  特性  形態(tài)

H001  HeLa  人宮頸癌細胞  DMEM+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H002  143B  人骨肉瘤細胞  DMEM+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H003  293T  人胚腎細胞 DMEM+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H004  A2780  人卵巢癌細胞  RPMI-1640+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H005  A549  人非小細胞肺癌細胞  RPMI-1640+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H006  A673  人尤因肉瘤細胞  DMEM+10% FBS  貼壁  多邊形

H007  AGS 人胃腺癌細胞  RPMI-1640+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H008  BGC823  人胃腺癌細胞(低分化)  RPMI-1640+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H009  C33A  人宮頸癌細胞   DMEM+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H010  CACO2  人結(jié)直腸腺癌細胞  DMEM+20% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H011  COLO205 人結(jié)腸癌細胞   RPMI-1640+10% FBS  半懸浮  上皮細胞樣

H012  DU145  人前列腺癌細胞  DMEM+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H013  ES-2  人卵巢透明細胞癌細胞   McCoy s 5A+10%FBS  貼壁  上皮細胞樣

H014  H1650  人非小細胞肺癌細胞  RPMI-1640+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H015  H460  人大細胞肺癌細胞   RPMI-1640+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H016  HACAT  人永生化角質(zhì)形成細胞  DMEM+15% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H017  HCT116  人結(jié)腸癌細胞  McCoy s 5A+10%FBS  貼壁  上皮細胞樣

H018  HEK293  人胚腎細胞 DMEM+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H019  HEPG2  人肝癌細胞  DMEM+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H020  HGC27  人胃癌細胞(未分化)  DMEM+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H021  HT-29  人結(jié)腸癌細胞   McCoy s 5A+10%FBS  貼壁  上皮細胞樣

H022  HUVEC  人臍靜脈內(nèi)皮細胞  ECM 貼壁  上皮細胞樣

H023  KYSE150 人食道癌細胞  RPMI-1640+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H024  L02(HL7702)(QSG-7701)  人正常肝細胞    RPMI-1640+20% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H025  LOVO  人結(jié)腸癌細胞   F12K+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H026  MCF-10A 人正常乳腺上皮細胞  DMEM/F12(1:1) 培養(yǎng)基+胰島素(10ug/ml)+表皮生長因子(20ng/ml)+100ng/ml霍亂病毒 +5% 馬血清  貼壁  上皮細胞樣

H027  MCF7  人乳腺癌細胞   DMEM+10% FBS+10 g/ml 胰島素  貼壁  上皮細胞樣

H028  LX-2  人肝星狀細胞  DMEM+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H029  MDA-MB-468  人乳腺癌細胞  L-15+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H030  MIA Paca2  人胰腺癌細胞  DMEM+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣 少量圓形懸浮

H031  NCI-H1299  人非小細胞肺癌細胞 RPMI1640+10%FBS 貼壁  上皮細胞樣

H032  PANC-1  人胰腺癌細胞   DMEM+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H033  RBE 人肝膽管癌細胞 DMEM+10%FBS 貼壁  上皮細胞樣

H034  SAOS-2  人成骨肉瘤細胞 McCoy s 5A+15%FBS  貼壁  上皮細胞樣

H035  SiHa  人子宮頸鱗癌細胞  DMEM+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H036  NB 4  急性早幼粒細胞白血病細胞  RPMI-1640+10% FBS  懸浮  圓形

H037  SPC-A-1 人肺腺癌細胞  DMEM+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H038  SW480  人結(jié)腸癌細胞   L-15+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H039  U-87MG 人腦星形膠質(zhì)母細胞瘤細胞  DMEM+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H040  ZR-75-1 人乳腺癌細胞  RPMI-1640+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H041  SW1116  人結(jié)腸腺癌細胞  L-15+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H042  293A  人胚腎細胞  DMEM+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H043  SGC-7901  人胃腺癌細胞  RPMI-1640 +10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H044  Ishikawa  人子宮內(nèi)膜癌細胞  DMEM+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H045  Eca-109 人食管癌細胞  RPMI-1640+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H046  RD-ES  人尤文氏肉瘤  RPMI-1640+15% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H047  NCI-H1437  人肺癌細胞  RPMI-1640+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H048  HOS   人骨肉瘤細胞  DMEM+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H049  Hela S3 人宮頸癌細胞  F12K+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H050  ECC1   人宮頸內(nèi)膜腺癌細胞  DMEM+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H051  SUP-B15   人Ph+急淋白血病細胞系  IMDM+20% FBS  懸浮  淋巴母細胞樣

H052  TF-1   人血液白血病細胞  RPMI1640+ 10% FBS+2ng/mL 重組人GM-CSF  懸浮  淋巴母細胞樣

H053  NCI-H446  人小細胞肺癌細胞  RPMI-1640+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H054  GES-1  人胃正常黏膜上皮細胞  RPMI-1640+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H055  IOSE80 人卵巢正常上皮細胞株  RPMI-1640+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H056  GIST882 人胃腸道間質(zhì)瘤細胞  RPMI-1640+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H057  KGN 人卵巢顆粒細胞癌  DMEM/F12(1:1)+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H058  U937  人組織細胞淋巴瘤細胞  RPMI-1640 +10% FBS  懸浮  單核細胞樣

H059  SV-HUC-1  人膀胱上皮永生化細胞  F12K+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H060  tpc-1  人乳頭瘤狀甲狀腺癌細胞  F12K+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H061  hela-luci  Luciferase穩(wěn)定表達Hela細胞 DMEM(L)+10% FBS 貼壁  上皮細胞樣

H062  colo320 人結(jié)腸癌細胞  RPMI-1640+10% FBS  半懸浮  圓形

H063  bxpc-3  人胰腺腺癌細胞  RPMI-1640+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H064  raji  人Burkitt s淋巴瘤細胞  RPMI-1640+10% FBS  懸浮  淋巴母細胞樣

H065  5637  人膀胱癌細胞  RPMI-1640+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H066  chang-liver 人肝細胞(已被hela污染）  DMEM(L)+10% FBS 貼壁  上皮細胞樣

H067  a549-gfp  gfp標(biāo)記的A549細胞  F12K+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H068  hs578.t 人乳腺癌細胞  DMEM+10% FBS+10 g/ml 胰島素  貼壁  上皮細胞樣

H069  T24 人膀胱移行細胞癌細胞  McCoy s 5A+15%FBS  貼壁  上皮細胞樣

H070  K562  人慢性髓系白血病細胞  IMDM+10% FBS  懸浮  淋巴母細胞樣

H071  EH-GB1  人膽囊癌細胞（表達GFP和RED2）  DMEM+15% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H072  skov-3  人卵巢腺癌細胞  McCoy s 5A+15%FBS  貼壁  上皮細胞樣

H073  ECV304  人膀胱癌細胞（T24衍生物）  M199+20%FBS 貼壁  上皮細胞樣

H074  nci-n87 人胃癌細胞  RPMI-1640+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H075  B-CPAP  人甲狀腺癌細胞  RPMI-1640+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H076  NCI-H1975  人非小細胞肺腺癌細胞  RPMI-1640+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H077  HK-2  人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細胞  DMEM/F12(1:1)+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H078  J82 人膀胱癌細胞  DMEM(L)+10% FBS 貼壁  上皮細胞樣

H079  A431  人皮膚鱗癌細胞  DMEM+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H080  MG63  人骨肉瘤細胞  DMEM(L)+10% FBS 貼壁  上皮細胞樣

H081  SW48  人結(jié)腸癌細胞   DMEM+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H082  ME180  人宮頸表皮樣癌  McCoy s 5A+10%FBS  貼壁  上皮細胞樣

H083  hepaRG-GFP  Gfp標(biāo)記的人肝癌細胞 DMEM(L)+10% FBS 貼壁  上皮細胞樣

H084  BEAS-2B 人正常肺上皮細胞  DMEM+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H085  THP-1  ATCC：TIB-202  人髓系白血病單核細胞  RPMI-1640+10% FBS  懸浮  單核細胞樣

H086  PC9 人肺癌細胞  DMEM+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H087  Fadu  人咽鱗癌細胞  DMEM(L)+10% FBS 貼壁  上皮細胞樣

H088  Huh7  人肝癌細胞  DMEM+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H089  Hcc9810 人肝癌細胞  RPMI-1640+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H090  Jurkat cloneE6-1  人急性T淋巴細胞白血病細胞  RPMI-1640+10% FBS  懸浮  淋巴母細胞樣

H091  KBM-7  人慢性粒細胞白血病細胞  IMDM+10% FBS  懸浮  圓形

H092  GBC-SD  人膽囊癌細胞  RPMI-1640+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H093  JEKO-1  人套細胞淋巴癌細胞  RPMI-1640+20% FBS  懸浮  圓形

H094  CAL27  人口腔鱗癌  DMEM+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H095  DB  彌漫大B細胞淋巴瘤細胞  RPMI-1640+10% FBS  懸浮  淋巴母細胞樣

H096  hne1-lmp1  轉(zhuǎn)入LMP1基因人鼻咽癌細胞  RPMI-1640+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H097  nci-h226  人肺鱗癌細胞  RPMI-1640+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

H098  hepg2.2.15  人肝癌細胞  DMEM+10% FBS  貼壁  上皮細胞樣

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