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本公司庫細(xì)胞近3500多種;來源于美國ATCC、DSMZ、ECACC等
全國統(tǒng)一價格,全國各地均可發(fā)貨,遠(yuǎn)到香港、澳門、福建、新疆、內(nèi)蒙古等地。
產(chǎn)品名稱:HUVEC-C人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞|HUVEC-C細(xì)胞
庫存狀態(tài):現(xiàn)貨
細(xì)胞規(guī)格:株
質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn):無支原體、無污染、符合標(biāo)準(zhǔn)
運輸方式:新鮮運輸和凍存管運輸
貨期:新鮮運輸需要1-2周,凍存管運輸?shù)男枰?-3天
消毒與滅菌效果好壞,直接關(guān)系到菌種成品 【詳細(xì)說明】
感恩回饋,價格實惠,物美價廉,量大從優(yōu),部分產(chǎn)品贈送。。。。。。
上海素冉生物科技有限公司是一批由美國留學(xué)歸來的致力于服務(wù)中國生物領(lǐng)域的青年創(chuàng)辦的一家新型公司。公司自創(chuàng)辦以來,以優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品、快捷的速度和完善的售后服務(wù),贏得生物界老師的厚愛,您選擇素冉的理由: 產(chǎn)品齊全:囊括實驗室儀器、設(shè)備、實驗室耗材、免疫生物學(xué)試劑、動物生物學(xué)試劑、植物生物學(xué)試劑、微生物學(xué)試劑、細(xì)胞生物學(xué)試劑、遺傳學(xué)生物試劑、生物化學(xué)試劑、分子生物學(xué)試劑。 品牌齊全:囊括國內(nèi)外100多個知名品牌。 方便、快捷,訂貨周期短,選擇服務(wù)質(zhì)量好的快遞,全稱跟蹤,及時到達(dá)您的手中。素冉生物努力打造生物領(lǐng)域內(nèi)的京東商城。 平價:同等質(zhì)量的產(chǎn)品,我們這里價格實惠,為您節(jié)省每一分錢。 優(yōu)質(zhì)的售后服務(wù):實驗過程,我們有技術(shù)全程跟蹤指導(dǎo),若有問題,我們第一時間為您處理,保證您售后無憂。 多姿多彩的技術(shù)服務(wù):免疫學(xué)技術(shù)服務(wù)、Western Blotting技術(shù)服務(wù)、實時熒光定量PCR(RealTime PCR)技術(shù)服務(wù)、病理學(xué)檢測技術(shù)服務(wù)等。 總之,素冉生物是您值得信賴的地方:誠實正直,以客戶的切身利益為出發(fā)點,關(guān)注客戶,協(xié)助客戶一起成長!
公司全部產(chǎn)品進(jìn)入。。。
細(xì)胞名稱HUVEC-C人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞|HUVEC-C細(xì)胞
生長特性 貼壁生長
形態(tài)特性 上皮樣
產(chǎn)品規(guī)格 1 10^6 cells/瓶
培養(yǎng)條件 MEM+10%FBS+1%P/S
生長條件 氣相:5%CO2 95% 空氣 溫度:37 ℃
凍存條件 90%FBS+10%DMSO
背景資料 最初認(rèn)為這個細(xì)胞源自喉上皮癌,但隨后通過同功酶分析、HeLa標(biāo)記染色體和DNA指紋分析發(fā)現(xiàn),起源細(xì)胞已被HeLa污染。 角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性。
HUVEC-C人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞|HUVEC-C細(xì)胞常規(guī)說明:
凍存液成分:10%DMSO+40%FBS+50%基礎(chǔ)培養(yǎng)液
細(xì)胞質(zhì)檢情況:不含細(xì)菌、真菌、支原體等微生物污染
傳代建議:1:2~1:3傳代,2~3天換液1次
特別提醒:簽收細(xì)胞后,如細(xì)胞狀態(tài)不佳,或培養(yǎng)中遇到問題,煩請當(dāng)天盡快聯(lián)系,以便處理。當(dāng)天及時反饋細(xì)胞情況和細(xì)胞照片是售后跟蹤處理重要的參考依據(jù),請務(wù)必重視。
一、 細(xì)胞復(fù)蘇
1. 把凍存管從液氮中取出來,立即投入37℃水浴鍋中,輕微搖動。液體都融化后(大概1-1.5分鐘),拿出來噴點酒精放到超凈工作臺里。
2. 把上述細(xì)胞懸液吸到裝10ml培養(yǎng)基的15ml的離心管中(用培養(yǎng)基把凍存管洗一遍,把粘在壁上的細(xì)胞都洗下來),1000轉(zhuǎn)離心5分鐘。
3. 把上清液倒掉,加1ml培養(yǎng)基把細(xì)胞懸浮起來。吸到裝有10ml培養(yǎng)基的10cm培養(yǎng)皿中前后左右輕輕搖動,使培養(yǎng)皿中的細(xì)胞均勻分布。
4. 標(biāo)好細(xì)胞種類和日期、培養(yǎng)人名字等,放到CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng),細(xì)胞貼壁后換培養(yǎng)基。
5. 3天換一次培養(yǎng)基。
HUVEC-C人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞在進(jìn)行細(xì)胞傳代培養(yǎng)的時候,胰蛋白酶作用的時間是在1~3分鐘,由于我有好幾個培養(yǎng)瓶(4個以上)的細(xì)胞都需要進(jìn)行傳代操作,那么就胰酶消化這一步而言,我是該一個培養(yǎng)瓶一個培養(yǎng)瓶這么分開做,還是可以幾個同時做呢?同時做我怕后來操作的培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞消化過度啊!一個一個的做會不會又太費時呢?
培養(yǎng)基 D-MEM/F-12培養(yǎng)基(GIBCO,貨號12400024,添加L-glutamine 150mg/L, NaHCO3 1.5g/L),90%;0.3mg/ml G418;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:33.5攝氏度。
生長特性 貼壁生長
1、一個一個做!防止污染,和消化細(xì)胞時間的不均勻。
2、原則上,為了避免細(xì)胞系之間的污染,應(yīng)該一個一個的做。但是如果你能保證無菌操作的原則,
HUVEC-C人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞也能把握好各種貼壁細(xì)胞系消化的時間,是可以同時做,這樣效率高。建議你剛開始一個一個的做,熟練以后根據(jù)具體情況決定如何做。
3、4個可以同時做,時間到了用移液槍給4個瓶加含血清的培養(yǎng)基終止就行。
4、新手的話強(qiáng)烈建議一個一個處理細(xì)胞,特別是消化,除非你養(yǎng)的細(xì)胞對消化都不敏感,不然很容易消化過度或者不到位。另外同時處理多個細(xì)胞容易出現(xiàn)細(xì)胞間交叉污染,一旦污染基本沒救,比細(xì)菌污染還要麻煩。
5、剛開始還是一個一個來,HUVEC-C人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞消化的時間與細(xì)胞的來源有很大關(guān)系,貼壁性強(qiáng)的細(xì)胞,需要消化的時間較長。一般除了貼壁性強(qiáng)的癌細(xì)胞外,細(xì)胞消化時間1-3min,還有胰蛋白酶的濃度有關(guān)系,濃度高的消化時間要短一些,不然會消化過了,對于細(xì)胞的生長不好。你可以在分散打入胰蛋白酶時,輕晃培養(yǎng)瓶,在顯微鏡下看見細(xì)胞開始變亮,皺縮,卷邊的時候就加入培養(yǎng)液或者血清終止消化。
失敗的關(guān)鍵原因還是細(xì)胞復(fù)蘇的時候沒有迅速解凍的緣故,最后一次成功是因為注意到這個問題。細(xì)胞的復(fù)蘇及凍存遵循慢凍速融原則,如果HUVEC-C人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞取出后沒有在盡可能短的時間里解凍的話細(xì)胞內(nèi)部會產(chǎn)生很多冰晶對細(xì)胞就有致命的損失了。另外,細(xì)胞的確應(yīng)該是在液氮條件下保存,如果液氮可以保存1-2年的細(xì)胞,放-80度保存恐怕不到三個月就不行了,并且狀態(tài)會很差。ZYC3821 神經(jīng)前體細(xì)胞培養(yǎng)基 NPrCM 形態(tài):貼壁,懸浮均有;上皮細(xì)胞樣 培養(yǎng)條件:MEM/F12 +10% FBS
ZYC3822 神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)基 NM 形態(tài):貼壁,懸浮均有;上皮細(xì)胞樣 培養(yǎng)條件:MEM/F12 +10% FBS
ZYC3823 少突膠質(zhì)前體細(xì)胞培養(yǎng)基 OPCM 形態(tài):貼壁,懸浮均有;上皮細(xì)胞樣 培養(yǎng)條件:MEM/F12 +10% FBS
ZYC3824 球狀少突細(xì)胞培養(yǎng)基 OsM 形態(tài):貼壁,懸浮均有;上皮細(xì)胞樣 培養(yǎng)條件:MEM/F12 +10% FBS
ZYC3825 角質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基 KM 形態(tài):貼壁,懸浮均有;上皮細(xì)胞樣 培養(yǎng)條件:MEM/F12 +10% FBS
ZYC3826 角質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基(確定) KM-d 形態(tài):貼壁,懸浮均有;上皮細(xì)胞樣 培養(yǎng)條件:MEM/F12 +10% FBS
細(xì)胞培養(yǎng)常見問題及解決方法
問題
原因
解決方案
細(xì)胞生長緩慢
生長培養(yǎng)基使用不當(dāng)
按照生產(chǎn)商的建議,使用相應(yīng)的預(yù)熱生長培養(yǎng)基。
生長培養(yǎng)基中血清質(zhì)量差
使用其他批次血清。
傳代操作不當(dāng)
按照生產(chǎn)商的建議消化時間及傳代比例進(jìn)行操作。
換液過于頻繁
降低換液頻率,參考生產(chǎn)商推薦的換液頻率。
細(xì)胞傳代次數(shù)過多
使用傳代次數(shù)較少的健康細(xì)胞。
細(xì)胞生長超過匯合狀態(tài)
哺乳動物細(xì)胞傳代應(yīng)在細(xì)胞處于對數(shù)期、未達(dá)到匯合狀態(tài)時進(jìn)行,建議細(xì)胞密度達(dá) 80-90%傳代。
細(xì)胞被支原體污染
將細(xì)胞、培養(yǎng)基和試劑丟棄;新取一只凍存細(xì)胞,并且使用新的培養(yǎng)基和試劑。
細(xì)胞復(fù)蘇存活率低
細(xì)胞凍存不當(dāng)
新取一只凍存細(xì)胞,并儲存在液氮中。將細(xì)胞儲存在液氮中,直至復(fù)蘇。
自行制備的凍存細(xì)胞無活性
將細(xì)胞按照生產(chǎn)商推薦的密度凍存。
制備凍存細(xì)胞時使用傳代次數(shù)少的細(xì)胞。
嚴(yán)格按照生產(chǎn)商推薦的操作程序凍存細(xì)胞。請注意本手冊推薦的冷凍程序是凍存細(xì)胞的一般流程,只能作為指導(dǎo)原則使用。
新取一只凍存細(xì)胞。
細(xì)胞復(fù)蘇方法不當(dāng)
嚴(yán)格按照生產(chǎn)商推薦的操作程序復(fù)蘇細(xì)胞。請注意本手冊推薦的解凍程序是復(fù)蘇細(xì)胞的一般流程,只能作為指導(dǎo)原則使用。
確保冷凍細(xì)胞解凍迅速,接種前用預(yù)熱的生長培養(yǎng)基緩慢稀釋細(xì)胞。
復(fù)蘇培養(yǎng)基使用不當(dāng)
使用生產(chǎn)商推薦的培養(yǎng)基。確保培養(yǎng)基使用前已經(jīng)預(yù)熱。
細(xì)胞稀釋過度
按照生產(chǎn)商的建議,將解凍后的細(xì)胞高密度接種,以改善復(fù)蘇效果。
處理細(xì)胞時動作不夠輕柔
凍存和復(fù)蘇過程對大多數(shù)細(xì)胞都會造成不利影 響。不要通過渦旋振蕩或者用力敲打培養(yǎng)瓶的方法使細(xì)胞脫落(培養(yǎng)昆蟲細(xì)胞時除外),也不要高速離心細(xì)胞。
凍存液中所用保護(hù)劑在儲存過程中未避光
如果未避光儲存,凍存保護(hù)劑會轉(zhuǎn)變?yōu)閷?xì)胞有毒性的物質(zhì);新取一只凍存保護(hù)劑,重新凍存細(xì)胞。
★由于細(xì)胞庫現(xiàn)有細(xì)胞類目多,為了不出現(xiàn)混亂錯誤,需要了解相關(guān)細(xì)胞價格及詳細(xì)資料直接call,對您造成的不便還請見諒!
★注:如運輸過程中導(dǎo)致細(xì)胞污染或者死亡,我們將無條件補(bǔ)發(fā)
收貨后十個工作日內(nèi)有其他問題提供照片可半價重發(fā)
最后,通過低溫保藏儲備一些細(xì)胞,以防支原體大面積來襲。如果支原體有抬頭的跡象,或常規(guī)檢測呈陽性結(jié)果,那么最可靠的補(bǔ)救措施是扔掉所有培養(yǎng)物,清潔培養(yǎng)箱和超凈臺,一切從頭開始。當(dāng)然,你得確保儲備的細(xì)胞是不含支原體的。
*驗證碼: = 請輸入計算結(jié)果(填寫阿拉伯?dāng)?shù)字),如:三加四=7