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CCK-8,您細(xì)胞活力檢測(cè)的專家_分子生物學(xué)-上海翊圣生物科技有限公司

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放大字體  縮小字體    發(fā)布日期:2019-09-02  來(lái)源:儀器信息網(wǎng)  作者:Mr liao  瀏覽次數(shù):348
核心提示:產(chǎn)品特點(diǎn)操作簡(jiǎn)單:產(chǎn)品本身是液體,即開(kāi)即用;甲臜產(chǎn)物是水溶性的,不需要用有機(jī)溶劑溶解。靈敏度高:線性范圍廣,靈敏度高,重復(fù)性好。細(xì)胞毒性低:細(xì)胞毒性非常低,對(duì)后續(xù)實(shí)驗(yàn)沒(méi)有影響。穩(wěn)定性好:培養(yǎng)液中酚紅和血清的存在不會(huì)對(duì)檢測(cè)造成影響。 應(yīng)用性廣:可用于大規(guī)模、高通量樣品檢測(cè)。 【詳細(xì)說(shuō)明】 CCK-8,您細(xì)胞活力檢測(cè)的專家 靈敏、簡(jiǎn)便、低毒關(guān)鍵詞:細(xì)胞增殖;細(xì)胞毒性;CCK-8;MTT產(chǎn)品背景細(xì)胞功能實(shí)驗(yàn)中,對(duì)于細(xì)胞增殖、毒性和活力的檢測(cè)是至關(guān)重要的。目前常用的細(xì)胞增殖與活性檢測(cè)試劑通常是通過(guò)基于線粒體內(nèi)的脫
產(chǎn)品特點(diǎn)
操作簡(jiǎn)單:產(chǎn)品本身是液體,即開(kāi)即用;甲臜產(chǎn)物是水溶性的,不需要用有機(jī)溶劑溶解。
靈敏度高:線性范圍廣,靈敏度高,重復(fù)性好。
細(xì)胞毒性低:細(xì)胞毒性非常低,對(duì)后續(xù)實(shí)驗(yàn)沒(méi)有影響。
穩(wěn)定性好:培養(yǎng)液中酚紅和血清的存在不會(huì)對(duì)檢測(cè)造成影響。
應(yīng)用性廣:可用于大規(guī)模、高通量樣品檢測(cè)。 【詳細(xì)說(shuō)明】

CCK-8,您細(xì)胞活力檢測(cè)的專家

靈敏、簡(jiǎn)便、低毒

關(guān)鍵詞:細(xì)胞增殖;細(xì)胞毒性;CCK-8;MTT

產(chǎn)品背景

細(xì)胞功能實(shí)驗(yàn)中,對(duì)于細(xì)胞增殖、毒性和活力的檢測(cè)是至關(guān)重要的。目前常用的細(xì)胞增殖與活性檢測(cè)試劑通常是通過(guò)基于線粒體內(nèi)的脫氫還原酶的還原能力來(lái)進(jìn)行檢測(cè)的,如MTT法,XTT法,WST-1法,CCK 法等。

翊圣生物推出一款基于WST-8的細(xì)胞活性檢測(cè)試劑盒 Cell Counting Kit簡(jiǎn)稱CCK試劑盒,相較于MTT等其細(xì)胞毒性更低,檢測(cè)更靈敏,操作更簡(jiǎn)便。

實(shí)驗(yàn)原理

WST-8(2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽)在電子耦合載體1-Methoxy PMS存在的情況下,可以被線粒體內(nèi)的脫氫酶還原生成高度水溶性的橙黃色甲臜產(chǎn)物(formazan),顏色的深淺與細(xì)胞的增殖成正比,與細(xì)胞毒性成反比。使用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定OD值,間接反映活細(xì)胞數(shù)量。

 

表1 CCK法與其他細(xì)胞增殖/毒性檢測(cè)方法的優(yōu)勢(shì)比較

檢測(cè)方法

MTT法

XTT法

WST-1法

CCK 法

甲臜產(chǎn)物的水溶性

差(需加有機(jī)溶劑溶解檢測(cè))

產(chǎn)品性狀

粉末

2瓶溶液

溶液

1瓶溶液

使用方法

配成溶液后使用

現(xiàn)配現(xiàn)用

即開(kāi)即用

即開(kāi)即用

檢測(cè)靈敏度

很高

很高

檢測(cè)時(shí)間

較長(zhǎng)

較短

較短

zui短

檢測(cè)波長(zhǎng)

560-600 nm

420-480 nm

420-480 nm

430-490 nm

細(xì)胞毒性

高,細(xì)胞形態(tài)完全消失

很低,細(xì)胞形態(tài)不變

很低,細(xì)胞形態(tài)不變

很低,細(xì)胞形態(tài)不變

試劑穩(wěn)定性

一般

較差

一般

很好

批量樣品檢測(cè)

可以

非常適合

非常適合

非常適合

便捷程度

一般

便捷

便捷

非常便捷

產(chǎn)品特點(diǎn)

操作簡(jiǎn)單:產(chǎn)品本身是液體,即開(kāi)即用;甲臜產(chǎn)物是水溶性的,不需要用有機(jī)溶劑溶解。

靈敏度高:線性范圍廣,靈敏度高,重復(fù)性好。

細(xì)胞毒性低:細(xì)胞毒性非常低,對(duì)后續(xù)實(shí)驗(yàn)沒(méi)有影響。

穩(wěn)定性好:培養(yǎng)液中酚紅和血清的存在不會(huì)對(duì)檢測(cè)造成影響。

應(yīng)用性廣:可用于大規(guī)模、高通量樣品檢測(cè)。

適用范圍

細(xì)胞增殖測(cè)定、細(xì)胞毒性、藥物篩選、腫瘤藥敏試驗(yàn)、生物因子的活性檢測(cè)等

產(chǎn)品數(shù)據(jù)

同類產(chǎn)品性能比較:

細(xì)胞類型:293T人胚腎細(xì)胞;培養(yǎng)基:10% FBS 高糖DMEM培養(yǎng)基

孵育時(shí)間:3h;細(xì)胞數(shù)目:1000

引用已發(fā)表文獻(xiàn)數(shù)據(jù)

GIST-T1細(xì)胞增殖檢測(cè)

CRTL為空白對(duì)照組,Lv-shNC為陰性干擾組,Lv-shOrai1為Orai1敲除組

ROS17/2.8細(xì)胞增殖檢測(cè)

WT為野生型,KO為BK基因敲除組

rMSCs細(xì)胞活性檢測(cè)

在2.5,5,10,20ug/mL的濃度 G/SWCNT hybrids, G, and SWCNTs處理下的細(xì)胞活性檢測(cè)

rMSCs細(xì)胞增殖檢測(cè)

G/SWCNT hybrids 在2.5,5,10,20ug/mL的濃度下處理1,3和7天細(xì)胞活性檢測(cè)

Huh6細(xì)胞干擾EZH2基因和陰性對(duì)照組細(xì)胞活性檢測(cè)

HepG2細(xì)胞干擾EZH2基因和陰性對(duì)照組細(xì)胞活性檢測(cè)

GIST-T1 細(xì)胞活性檢測(cè)

分別在2-APB 不同濃度0, 50, 100, and 150 M處理下的細(xì)胞活力檢測(cè)

GIST-T1 細(xì)胞活性檢測(cè)

分別在SKF-96365不同濃度下

0, 0.5, 1.0, and 1.5 M處理下胞活力檢測(cè)

FAQ

Q1:CCK的保存和穩(wěn)定性如何?

答:CCK穩(wěn)定性高,避光條件-20℃有效期2年,4℃有效期1年。經(jīng)常使用建議4℃保存,避免反復(fù)凍融。CCK正常顏色為粉紅色,若顏色發(fā)生明顯偏差,質(zhì)量可能有發(fā)生變化。

Q2:CCK的細(xì)胞毒性如何?

答:CCK毒性非常低,因此CCK檢測(cè)完后相同的細(xì)胞還能用于其它細(xì)胞增殖檢測(cè)如結(jié)晶紫染色法,中性紅染色法或DNA熒光染色法。

Q3:CCK會(huì)對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行染色嗎?

答:不會(huì),首先WST-8不會(huì)進(jìn)入細(xì)胞染色,整個(gè)顯色反應(yīng)都是在培養(yǎng)體系中進(jìn)行的。另外WST和WST-8甲臜都屬于高度水溶性組分,反應(yīng)結(jié)束更換新的培養(yǎng)液,即可清除外源組分。

Q4:做細(xì)胞活性檢測(cè)時(shí),每孔應(yīng)該接種多少個(gè)細(xì)胞?

答:當(dāng)使用標(biāo)準(zhǔn)96孔板時(shí),貼壁細(xì)胞的zui小接種量至少為1,000個(gè)/孔(100 L培養(yǎng)基)。檢測(cè)白細(xì)胞時(shí)的靈敏度相對(duì)較低,因此推薦接種量不低于2,500個(gè)/孔(100 L培養(yǎng)基)。

Q5:若是使用6孔或者24孔板進(jìn)行試驗(yàn),CCK試劑使用量怎么樣呢?

答:如果要使用6孔板或24孔板實(shí)驗(yàn),請(qǐng)先計(jì)算每孔相應(yīng)的接種量,并按照每孔培養(yǎng)基總體積的10%加入CCK溶液。

Q6:培養(yǎng)基的本底顏色如酚紅會(huì)不會(huì)影響細(xì)胞活性的檢測(cè)呢?

答:不會(huì)的,培養(yǎng)基中酚紅的吸光度可以在計(jì)算時(shí),通過(guò)扣除空白孔中本底的吸光值而消去,因此不會(huì)對(duì)檢測(cè)造成影響。

Q7:能否用384孔板進(jìn)行細(xì)胞增殖與活性檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)?zāi)兀?/p>

答:可以,CCK-8產(chǎn)品的使用量為每孔培養(yǎng)基總體積的10%。建議先將CCK-8產(chǎn)品稀釋一倍,然后加入培養(yǎng)基總體積的20%即可,這樣可減少誤差。

Q8:只可以在450 nm波長(zhǎng)處測(cè)OD值嗎?

答:可以在450 nm波長(zhǎng)處測(cè)OD值,但是若無(wú)此波長(zhǎng)的濾光片,可選擇吸光度在430-490 nm之間的濾光片,但是450 nm濾光片的檢測(cè)靈敏度zui高。

Q9:若是暫不檢測(cè)OD值,該如何處理?

答:若暫時(shí)不測(cè)定OD值,可以向每孔中加入10 L 0.1 M的HCL溶液或者1% w/v SDS溶液,并遮蓋培養(yǎng)板避光保存在室溫條件下。24小時(shí)內(nèi)測(cè)定,吸光度不會(huì)發(fā)生變化

Q10:在加入CCK-8時(shí)可否不更換培養(yǎng)基?

答:一般情況下可以不更換培養(yǎng)基。但是如果培養(yǎng)基里有氧化還原性物質(zhì)的話,有可能會(huì)產(chǎn)生誤差,必須更換其它培養(yǎng)基。

Q11:在實(shí)驗(yàn)中OD值太高,怎么解決?

答:可以縮短加入CCK-8后的培養(yǎng)時(shí)間。例如:可以把加入CCK-8試劑后的培養(yǎng)時(shí)間由2小時(shí)縮短為1小時(shí)。此外,可適當(dāng)減少細(xì)胞的數(shù)量。

Q12:如果OD值太低,怎么解決?

答:可以采取2個(gè)辦法:1、適當(dāng)增加細(xì)胞數(shù)量  2、延長(zhǎng)加入CCK-8試劑后的反應(yīng)時(shí)間。

Q13:應(yīng)該每次做標(biāo)準(zhǔn)曲線嗎?

答:建議每次做。雖然細(xì)胞是一樣的,但是細(xì)胞的狀態(tài)不一定一樣。對(duì)于狀態(tài)不一樣的細(xì)胞,建議每次做標(biāo)準(zhǔn)曲線。

文獻(xiàn)引用:

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產(chǎn)品信息

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品編號(hào)

規(guī)格

價(jià)格(元)

促銷價(jià)(元)

Cell Counting Kit(CCK-8)CCK-8試劑盒

40203ES60

100T (1 mL)

150.00

150.00

Cell Counting Kit(CCK-8)CCK-8試劑盒

40203ES76

500T (5 mL)

480.00

480.00

Cell Counting Kit(CCK-8)CCK-8試劑盒

40203ES80

1000T (10 mL)

920.00

897.00

Cell Counting Kit(CCK-8)CCK-8試劑盒

40203ES88

3000T (30 mL)

1833.00

1687.00

Cell Counting Kit(CCK-8)CCK-8試劑盒

40203ES92

10000T (100 mL)

5122.00

4897.00

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