在顯色培養(yǎng)基培養(yǎng)時經(jīng)常會用到固體培養(yǎng)基，但是，在配制培養(yǎng)基過程中偶爾會出現(xiàn)不凝固、半凝固或者一搖晃培養(yǎng)基就破碎的現(xiàn)象，問題在哪里呢？
     許多文獻(xiàn)指出，瓊脂的凝固程度主要受到PH值和瓊脂含量的影響，PH值較低( 4.0)時，PH值是影響凝固等級的主要因素；PH值較高(5.0~8.0)時，瓊脂濃度是影響凝固等級的主要因素。藥典上培養(yǎng)基配方中明確規(guī)定了PH值和瓊脂含量，如配制操作正常，凝固應(yīng)是不會出現(xiàn)問題的。為此，我們針對培養(yǎng)基出現(xiàn)的凝固異常進(jìn)行了分析及試驗：
     一、培養(yǎng)基PH值問題：培養(yǎng)基滅菌前后PH值有何變化？經(jīng)查閱大量相關(guān)學(xué)術(shù)研究，不同培養(yǎng)基滅菌前后PH普遍有這樣的變化超勢：高壓滅菌前pH值4.5-8.0的培養(yǎng)基滅菌后pH值變化較小，偏酸性的略上升，偏堿性的略下降。但酸性或堿性較強(qiáng)的培養(yǎng)基滅菌前后PH值變化較大。因我們常使用的培養(yǎng)基pH值均在4.5-8.0范圍內(nèi)，所以偶爾出現(xiàn)的培養(yǎng)基凝固不好應(yīng)不是PH值影響的。
     二、瓊脂問題：瓊脂是顯色培養(yǎng)基zui常用的凝固劑，是一種海藻多糖，PH在4-10之間才會形成凝膠，且其凝膠強(qiáng)度和瓊脂糖的濃度有關(guān)。目前我們實驗室使用的均是成熟配方的培養(yǎng)基，為什么會偶爾出現(xiàn)凝固不好的現(xiàn)象呢？
     我仔細(xì)核查了瓊脂粉的生產(chǎn)廠家、批號、保質(zhì)期及配制時的稱量、溶解、定容和轉(zhuǎn)移等過程。排除了瓊脂粉質(zhì)量問題，但發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基分裝準(zhǔn)備高溫滅菌時，有部分經(jīng)開水溶解的瓊脂呈細(xì)小顆粒狀沉在瓶底，即未完全溶解，后查閱資料發(fā)現(xiàn)，瓊脂加熱至95℃時才開始溶解，說明我們用熱水溶解瓊脂時，瓊脂未能完全溶解，這可能是導(dǎo)致培養(yǎng)基難凝固的原因。于是我們在配制培養(yǎng)基時，先將瓊脂煮沸5分鐘后再分裝、滅菌，zui后培養(yǎng)基冷卻至40℃時能完全凝固。自瓊脂溶解方式改變后，便未再出現(xiàn)培養(yǎng)基不凝固、半凝固或者一搖晃顯色培養(yǎng)基就破碎的現(xiàn)象

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