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PBS和D-PBS緩沖溶液的配制方法_91化工儀器網

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放大字體  縮小字體    發(fā)布日期:2019-09-02  來源:儀器信息網  作者:Mr liao  瀏覽次數(shù):636
核心提示:磷酸鹽緩沖液(簡稱PBS)的是生物化學中常用的一種阻礙溶液pH變化的緩沖溶液,這種由鹽溶液中含有氯化鈉,磷酸鹽,磷酸鹽,氯的化的鉀和磷酸鉀組成。組份濃度:137 mM 氯化鈉,2.7 mM 氯的化的鉀,10 mM 磷酸二氫鈉,2 mM 磷酸二氫鉀。本文總結了PBS和D-PBS溶液的配制方法。1、常規(guī)PBS磷酸鹽緩沖液組成成份磷酸二氫鉀34g1mol/L氫氧化鈉溶液 175ml蒸餾水825mlPH 7.2配置:先將磷酸鹽溶解于500mL蒸餾水中,用1mol/L氫氧化鈉溶液校正pH后,再用蒸餾水稀釋至1000

 

 磷酸鹽緩沖液(簡稱PBS)的是生物化學中常用的一種阻礙溶液pH變化的緩沖溶液,這種由鹽溶液中含有氯化鈉,磷酸鹽,磷酸鹽,氯的化的鉀和磷酸鉀組成。組份濃度:137 mM 氯化鈉,2.7 mM 氯的化的鉀,10 mM 磷酸二氫鈉,2 mM 磷酸二氫鉀。本文總結了PBS和D-PBS溶液的配制方法。

 

1、常規(guī)PBS磷酸鹽緩沖液

 

組成成份

 

磷酸二氫鉀 34g

 

1mol/L氫氧化鈉溶液 175ml

 

蒸餾水 825ml

 

PH 7.2

 

配置:先將磷酸鹽溶解于500mL蒸餾水中,用1mol/L氫氧化鈉溶液校正pH后,再用蒸餾水稀釋至1000mL。

 

稀釋液

 

取儲存液1.25mL,用蒸餾水稀釋至1000mL。分裝每瓶100mL或每管10mL,121℃高壓滅菌15min。

 

用途

 

主要用于一些化學實驗中不影響實驗反應的情況下調節(jié)pH值,以便讓實驗的化學反應在zui佳條件下進行。部分用于食品或是飼料行業(yè)加工,如食品或者飼料真菌毒素檢驗中Elisa方法的洗板應用或者食品微生物檢驗中的稀釋緩沖液。

 

2、PBS Buffer的配制具體步驟

 

組份濃度:137 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 10 mM Na2HPO4, 2 mM KH2PO4

 

配制量:1 L

 

配制方法:

 

1. 稱量下列試劑,置于1 L燒杯中。

 

NaC l8g

 

KCl 0.2g

 

Na2HPO4 1.42g

 

KH2PO4 0.27g

 

2. 向燒杯中加入約800 ml的去離子水,充分攪拌溶解。

 

3. 滴加濃鹽酸將pH值調節(jié)至7.4,然后加入去離子水將溶液定容至1 L。

 

4. 高溫高壓滅菌后,室溫保存。

 

注意:上述PBS Buffer中無二價陽離子,如需要,可在配方中補充1 mM CaCl2和0.5 mM MgCl2。

 

3、D-PBS是杜氏磷酸緩沖液

 

全稱為:Dulbecco s Phosphate Buffered Saline

 

組分 分子量 濃度 (gm/L) 摩爾濃度 (mM)

 

氯的化的鉀 (KCl) 75 0.20 2.67

 

磷酸二氫鉀 (KH2PO4) 136 0.20 1.47

 

氯化鈉 (NaCl) 58 8.00 138.00

 

磷酸氫二鈉 (Na2HPO4) 142 1.15 8.10

 

pH值為7.4。

 

(1)、杜氏磷酸鹽緩沖液(Dulbecco s Phosphate Buffered Saline,D-PBS)也是一種磷酸鹽緩沖液,與常規(guī)PBS的不同之處在于磷酸鹽的含量稍低些,并含有鈣鎂離子。D-PBS主要用于胚胎學方面的研究,多用于胚胎的沖洗液、凍存液和培養(yǎng)液。

 

(2)、D-PBS配方:氯化鈉8g,氯的化的鉀0.2g,磷酸氫二鈉1.15g,磷酸二氫鉀0.2g,氯化鈣0.1g,含6個結晶水的氯化鎂0.1g溶于1L ddH2O中。

 

(3)、以上配方為含有鈣鎂離子的D-PBS,如不加氯化鈣和氯化鎂,即為無鈣鎂的D-PBS。

 

(4)、在以上配方的基礎上,還可以加入葡萄糖、丙酮酸鈉等,以更利于培養(yǎng)物的生長。

 

D-PBS是杜氏磷酸緩沖液,也是一種磷酸鹽緩沖液,與常規(guī)磷酸緩沖液zui大的不同點在于磷酸鹽的含量稍低些,根據(jù)是否含鈣鎂分為兩種即D-PBS w/鈣 鎂和D-PBS w/o 鈣 鎂。

(來源:上海江林生物科技有限公司)

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