細(xì)菌或細(xì)胞等顆粒性抗原與相應(yīng)抗體直接反應(yīng)，出現(xiàn)的凝集現(xiàn)象，主要有玻片法和試管法。玻片法是抗原和相應(yīng)抗體在玻片上進(jìn)行的凝集反應(yīng)，用于定性檢測抗原，如 ABO 血型鑒定、細(xì)菌鑒定等。試管法是在試管中倍比稀釋待檢血清，加入已知顆粒性抗原進(jìn)行的凝集反應(yīng)，用于定量檢測抗體，如診斷傷寒病的肥達(dá)試驗(yàn)。試管法凝集反應(yīng)時(shí)，抗原抗體結(jié)合出現(xiàn)明顯可見反應(yīng)的大的抗血清或抗原制劑稀釋度稱為效價(jià)，又稱滴度。其原理是細(xì)菌、螺旋體和紅細(xì)胞等顆粒性抗原，在適當(dāng)?shù)碾娊赓|(zhì)參與下可直接與相應(yīng)抗體結(jié)合出現(xiàn)凝集，稱直接凝集反應(yīng)。參加凝集反應(yīng)的抗原稱凝集原，抗體則稱為凝集素。從方法上來講，有玻片法和試管法兩類。

玻片法凝集主要用于抗原的定性分析，短時(shí)間便能觀察結(jié)果醫(yī)學(xué)教|育網(wǎng)搜集整理，一般用來鑒定菌種或分型；也用于人類AB0血型的測定。

試管凝集反應(yīng)是用定量抗原懸液與一系列遞度倍比稀釋的待檢血清混合，保溫靜置后，根據(jù)每管內(nèi)顆粒凝集的程度，以判斷待檢血清中有無相應(yīng)抗體及其效價(jià)，可以用來協(xié)助臨床診斷或流行病原調(diào)查研究。醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)整理例如Widal反應(yīng)、Well-Felix反應(yīng)、輸血時(shí)也常用于受體和供體兩者間的交叉配血試驗(yàn)。

顆?？乖c抗體直接結(jié)合出現(xiàn)的凝集現(xiàn)象稱為直接凝集反應(yīng)。

(1)玻片凝集反應(yīng)

①取清潔玻片一張，用記號(hào)筆劃為三格，并注明號(hào)碼。無菌操作下，用接種環(huán)于第1格、第2格內(nèi)加1：10稀釋的傷寒桿菌診斷血清1～2滴，第3格加1～2滴生理鹽水。

②無菌操作下，用接種環(huán)取傷寒桿菌培養(yǎng)物少許，混于第3格中，再混于第1格中(不能先混第1格再混第3格，因?yàn)檫@樣將使診斷血清混入鹽水而影響對(duì)照結(jié)果)，將細(xì)菌與鹽水或血清混合均勻，使呈乳狀液。此時(shí)取菌量不可過多，使懸液呈輕度乳濁即可。

③同法取陰性對(duì)照菌培養(yǎng)物少許，于第2格內(nèi)混勻。

④輕輕搖動(dòng)玻片，經(jīng)1～2min后肉眼觀察。出現(xiàn)乳白色凝集塊者，即為陽性反應(yīng)；仍為乳濁液者，即為陰性反應(yīng)。如結(jié)果不夠清晰，可將玻片放于低倍顯微鏡下觀察。

(2)試管凝集反應(yīng)

試管凝集反應(yīng)為一種定量試驗(yàn)，用已知抗原檢查血清中有無特異抗體，并測定其相對(duì)含量。方法如下。

①取潔凈小試管14只分兩排排列于試管架上，每排7只依次用蠟筆注明號(hào)碼，于每管中分別加入0.5mL生理鹽水。

②在第1排第1管中加入1：10稀釋傷寒H血清0.5mL ，于管內(nèi)連續(xù)吹吸3次，使血清與鹽水充分混合，而后吸出0.5mL注入第2管，同樣予以混勻后吸出0.5mL注入第3管。依次類推，稀釋到第6管，自第6管中吸出0.5mL 棄去。此時(shí)，自第1～6管的血清稀釋倍數(shù)為1：20、1：40、1：80、1：160、1：320、1：640。第7管不加血清作為對(duì)照。

③同法用吸管吸取1：10稀釋傷寒桿菌O血清加入第2排第1管，并依次如上法予以稀釋。

④用移液管吸取傷寒桿菌H菌液，加收第1排各管中每管0.5mL (由鹽水對(duì)照管開始，依次由后向前加入)，此時(shí)血清稀釋倍數(shù)又增加了1倍。

⑤同法于第2排各管中加入傷寒桿菌O菌液0.5mL。

⑥將各管振蕩混勻，放37℃水浴箱中2～4h或37℃孵育箱中過夜，次日取出觀察結(jié)果。

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