PNA BIO INC致力于為基礎(chǔ)研究和應(yīng)用領(lǐng)域的實(shí)驗(yàn)室提供的研究產(chǎn)品和服務(wù)。

PNA Bio提供PNA（Peptide Nucleic Acid）產(chǎn)品，包括定制寡核苷酸，F(xiàn)ISH探針，miRNA抑制劑，PNA鉗夾探針和Fmoc單體。HPLC純化后，它們與MS / MS數(shù)據(jù)一起提供 95％的純度。PNA產(chǎn)品由Panagene制造。

PNA Bio還提供工程化核酸酶服務(wù)，包括CRISPR / Cas9核酸酶（RGEN）合成，驗(yàn)證和Cas9蛋白以及敲除和敲入細(xì)胞系服務(wù)。

Cas9蛋白與指導(dǎo)RNA復(fù)合，為CRISPR / Cas9技術(shù)提供了優(yōu)于質(zhì)?；騧RNA轉(zhuǎn)染的益處。大的好處是，您可以制備準(zhǔn)備在體內(nèi)工作的RNP復(fù)合物。Cas9蛋白壽命短（細(xì)胞半衰期約為24小時(shí)），因此可以大限度地減少脫靶效應(yīng)和鑲嵌現(xiàn)象。您還可以通過(guò)簡(jiǎn)單的切割試驗(yàn)輕松測(cè)試體外指導(dǎo)RNA的活性。此外，Cas9蛋白非常穩(wěn)定，與mRNA相比，活性確認(rèn)更容易。后，它在更廣泛的生物體中是活躍的，例如線蟲，昆蟲，植物和非典型的模型系統(tǒng)，因?yàn)樗恍枰D(zhuǎn)錄或翻譯。

由PNA Bio提供的Cas9蛋白與NLS綴合，并且它是注射/轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備形式。

Cy3-Cas9可以很容易地富集用CRISPR / Cas9復(fù)合物轉(zhuǎn)染的細(xì)胞。

體外切割測(cè)定

將PCR產(chǎn)物與不同量的Cas9蛋白一起溫育并在凝膠上運(yùn)行。體外切割測(cè)定是檢查sgRNA活性的簡(jiǎn)單方法。

轉(zhuǎn)染RNP復(fù)合物

通過(guò)電穿孔（Neon）或脂質(zhì)轉(zhuǎn)染胺（LF2000）將sgRNA和不同量Cas9蛋白的RNP復(fù)合物轉(zhuǎn)染到NIH3T3細(xì)胞中。

注射RNP復(fù)合物

對(duì)于小鼠胚胎注射，將60ng / ul Cas9蛋白的RNP復(fù)合物和兩種sgRNA各15ng / ul注射到小鼠胚胎中。從幼仔準(zhǔn)備尾部DNA并進(jìn)行T7E1測(cè)定.Grey代表WT，綠色代表大的缺失（＃2,3,4,8），紅色代表小/ del（＃5,6,7），藍(lán)色代表純合子小/ in（＃9,10）。

Cas9蛋白

 來(lái)自化膿性鏈球菌的 Cas9蛋白與NLS

 注射，轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備好

 通過(guò)體外切割測(cè)定，電穿孔（作為RNP復(fù)合物）和
每批次的小鼠胚胎注射驗(yàn)證活性

 標(biāo)準(zhǔn)濃度（CP01，重組至1 mg / ml）：20 ug，50 ug或200 ug（50 ug x 4）

 高濃度（CP02和CP03，重組至5 mg / ml）：250 ug（CP02）或1 mg（CP03,250 ug x 4）

 包裝：CP01為20 ug或50 ug，CP02 / CP03為250 ug

 建議使用CP01進(jìn)行顯微注射，建議使用CP02 / CP03進(jìn)行電穿孔

 也可用：D10A Nickase（CN01）和D10A / H840A dCas9（CD01）蛋白

液體形式的Cas9蛋白 

 可用1 mg / ml或5 mg / ml

 CP04-100：1mg / ml（6 M），20 g 5管

 CP04-500：5mg / ml（30 M），100 g 5管

Nickase和dCas9蛋白

 D10A Cas9 Nickase蛋白與來(lái)自化膿性鏈球菌的 NLS （CN01和CN02）

 D10A / H840A Cas9裂解死蛋白與來(lái)自化膿性鏈球菌的 NLS （CD01和CD02）

 以50 g大小提供，重構(gòu)為1mg / ml（CN01 / CD01）或250 g大小，重構(gòu)為5mg / ml（CN02 / CD02）。

Cy3-Cas9和Cy3-dCas9蛋白

 Cy3標(biāo)記Cas9蛋白與NLS（CP06），以實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)染細(xì)胞的分選和可視化

 通過(guò)共聚焦顯微鏡檢測(cè)熒光

 通過(guò)體外切割測(cè)定和細(xì)胞轉(zhuǎn)染確認(rèn)活性

 可提供濃度為5 mg / ml的50 ug（CP06-50）或200 ug（CP06-200）

 還可獲得Cy3標(biāo)記的dCas9蛋白（CD07）

通過(guò)電穿孔進(jìn)入細(xì)胞，然后進(jìn)行T7E1測(cè)定，證實(shí)Cy3-Cas9蛋白的活性。通過(guò)共聚焦顯微鏡確認(rèn)熒光。

產(chǎn)品

描述

可用尺寸

CP01 
Cas9蛋白

含有NLS的Cas9蛋白（注射準(zhǔn)備好）; 
重組至1 mg / ml（6 uM）

20微克（120 pmol / 6 uM x 20 ul）
50 ug（300 pmol / 6 uM x 50 ul）
200 ug（50 ug x 4 tube）

CP02 
高濃縮
Cas9蛋白

含有NLS的Cas9蛋白（注射準(zhǔn)備好）; 
重組至5毫克/毫升（30微摩爾）;

250微克（1530 pmol / 30 uM x 50 ul）

CP03 
高濃縮
Cas9蛋白

含有NLS的Cas9蛋白（注射準(zhǔn)備好）; 
重組至5毫克/毫升（30微摩爾）;

1毫克（250微克x 4）

CP04-100 
Cas9蛋白

含有NLS的Cas9蛋白（注射準(zhǔn)備好）; 
液體形式，1毫克/毫升（6微摩爾）;

100微克（20微克x 5）

CP04-500 
高濃縮
Cas9蛋白

含有NLS的Cas9蛋白（注射準(zhǔn)備好）; 
液體形式，5毫克/毫升（30微摩爾）;

500微克（100微克x 5）

CN01切口
酶蛋白

用NLS準(zhǔn)備Cas9 D10A Nickase蛋白質(zhì); 重組至1 mg / ml（6 uM）

50微克

CN02切口
酶蛋白

用NLS準(zhǔn)備Cas9 D10A Nickase蛋白質(zhì); 重組至5 mg / ml（30 uM）

250微克

CD01 
dCas9蛋白

含有NLS的Cas9 D10A / H840A蛋白; 
注射準(zhǔn)備好，重組至1毫克/毫升（6微米）

50微克

CD02 
dCas9蛋白

含有NLS的Cas9 D10A / H840A蛋白; 
準(zhǔn)備注射，重組至5 mg / ml（30 uM）

250微克

CP06 
Cy3-Cas9蛋白

Cy3標(biāo)記的Cas9蛋白與NLS; 
5 mg / ml溶液（30 uM）

50微克
200微克

CD07 
Cy3-dCas9蛋白

Cy3標(biāo)記的Cas9死蛋白與NLS; 
5 mg / ml溶液（30 uM）

50微克
200微克

Pnabio 部分產(chǎn)品列表

貨號(hào)

品名

規(guī)格

品牌

CP01-20

Reconstitutes to 1 mg/ml, 120 pmol (6 uM x 20 ul)

20 ug

pnabio

CP01-50

Reconstitutes to 1 mg/ml, 300 pmol (6 uM x 50 ul)

50 ug

pnabio

CP01-200

Reconstitutes to 1 mg/ml, 1200 pmol (6 uM x 200 ul)

200 ug (50 ug x 4)

pnabio

CP02

Reconstitutes to 5 mg/ml, 1530 pmol (30 uM x 50 ul)

250 ug

pnabio

CP03

Reconstitutes to 5 mg/ml, 6000 pmol (30 uM x 50 ul x 4 tubes)

1 mg (250 ug x 4)

pnabio

CP04-100

Liquid form 1 mg/ml, 600 pmol (6 uM x 20 ul x 5 tubes)

100 ug (20 ug x 5)

pnabio

CP04-500

Liquid form 5 mg/ml, 3000 pmol (30 uM x 20 ul x 5 tubes)

500 ug (100 ug x 5)

pnabio

CN01

Reconstitutes to 1 mg/ml, 300 pmol (6 uM x 50 ul)

50 ug

pnabio

CN02

Reconstitutes to 5 mg/ml,1530 pmol (30 uM x 50 ul)

250 ug

pnabio

CD01

Reconstitutes to 1 mg/ml,  300 pmol (6 uM x 50 ul)

50 ug

pnabio

CD02

Reconstitutes to 5 mg/ml,1530 pmol (30 uM x 50 ul)

250 ug

pnabio

F1001

C-rich telomere probe, FAM labeled

5 nmole

pnabio

F1002

C-rich telomere probe, Cy3 labeled

5 nmole

pnabio

F1003

C-rich telomere probe,  Cy5 labeled

5 nmole

pnabio

F1004

C-rich telomere probe, Alexa Fluor 488 labeled

5 nmole

pnabio

F1005

G-rich telomere probe, FAM labeled

5 nmole

pnabio

F1006

G-rich telomere probe, Cy3 labeled

5 nmole

pnabio

F1007

G-rich telomere probe, Cy5 labeled

5 nmole

pnabio

F1008

G-rich telomere probe, Alexa Fluor 488 labeled

5 nmole

pnabio

F1009

C-rich telomere probe, FITC labeled

5 nmole

pnabio

F1010

G-rich telomere probe, FITC labeled

5 nmole

pnabio

F1013

 C-rich telomere probe,  Alexa Fluor 647 labeled

5 nmole

pnabio

F1014

 G-rich telomere probe,  Alexa Fluor 647 labeled

5 nmole

pnabio

F1020

TelC probe for arthropods, Alexa Fluor 488 labeled

5 nmole

pnabio

F2001

C-rich telomere probe, Biotin labeled

5 nmole

pnabio

F3001

Centromere probe, FAM labeled

5 nmole

pnabio

F3002

Centromere probe, Cy3 labeled

5 nmole

pnabio

F3005

Centromere probe, Cy5 labeled

5 nmole

pnabio

F3004

Centromere probe, Alexa Fluor 488 labeled

5 nmole

pnabio

F3008

Centromere probe, Biotin labeled

5 nmole

pnabio

F3003

Centromere probe, Cy3 labeled

5 nmole

pnabio

F3006

Centromere probe, FAM labeled

5 nmole

pnabio

F5001

CAG repeats, Cy3 labeled

5 nmole

pnabio

G2001-3

A set of 4 PNA oligos against human globin,

3 nmole

pnabio

G2001-10

A set of 4 PNA oligos against human globin

10 nmole

pnabio

MP01-25

ggcaagtgttcttcgga

25 nmole

pnabio

MP01-50

ggcaagtgttcttcgga

50 nmole

pnabio

PP01-25

ggctcaaccctggacag

25 nmole

pnabio

PP01-50

ggctcaaccctggacag

50 nmole

pnabio

RV01

Surrogate reporter vector with GFP for FACS

5 ug

pnabio

RV02

Surrogate reporter vector with GFP and H2KK for MACS

5 ug

pnabio

RV03

Surrogate reporter vector with GFP and Hygromycin-R

5 ug

pnabio

CV01

Cas9 co-transfection vector (CMV promoter)

5 ug

pnabio

CV02

Cas9, Hygromycin R, and GFP expression vector (CMV promoter)

5 ug

pnabio

CV03

Cas9, RFP, puromycin R expression vector (CMV promoter)

5 ug

pnabio

CV11

Cas9 co-expression vector (EF1a promoter)

5 ug

pnabio

CV12

Cas9, Hygromycin R, and GFP expression vector (EF1a promoter)

5 ug

pnabio

CV13

Cas9, RFP, and Puromycin R expression vector (EF1a promoter)

5 ug

pnabio

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