品 牌：QIAGEN
英文名稱：RNeasy Plus Universal Mini Kit
中文名稱：Qiagen通用總RNA提取試劑盒
從各種類型組織中純化總RNA，配有g(shù)DNA Eliminator Solution
適用于所有組織溶液類型
整合RNeasy和QIAzol技術(shù)，節(jié)省時間
不使用酶，快速去除基因組DNA
RNA純度高，適用于下游應用 【詳細說明】

Qiagen通用總RNA提取試劑盒

Qiagen通用總RNA提取試劑盒RNeasy Plus Universal Kits可快速、方便的純化RNA，同時有效地去除基因組DNA。優(yōu)化的實驗方案可從各種組織類型，包括難裂解組織中純化高品質(zhì)RNA。該試劑盒含有QIAzol Lysis Reagent和RNeasy離心柱，前者用于裂解脂肪組織和其他組織類型，后者用于純化高品質(zhì)RNA。該試劑盒有兩種規(guī)格：RNeasy Plus Universal Mini Kit可從至多50 mg組織中純化RNA，RNeasy Plus Universal Midi Kit可從至多250 mg組織中純化RNA。RNeasy Plus Universal Mini Kit可在QIAcube全自動核酸純化儀上自動化進行純化。
 

特點

參數(shù)

應用PCR, real-time PCR, microarray洗脫體積Mini: 30 l; Midi:150 l自動化處理Mini format can be automated on the QIAcube規(guī)格Mini and Midi Format整合基因組DNA去除步驟Yes主要樣本類型Tissue samples including difficult-to-lyse and demanding tissues處理Manual (centrifugation), automated (QIAcube)純化總RNA、miRNA、poly A+ mRNA、DNA或蛋白RNA樣本量Mini: 5-50 mg; Midi: 50-250 mg技術(shù)QIAzol/Spin column technology

 

性能

RNeasy Plus Universal操作流程可從各種類型的組織中得到高品質(zhì)RNA，重復性好，適用組織包括脂肪組織和不易裂解的組織（參見下表）。不同物種和不同發(fā)育階段的組織的純化產(chǎn)量不同，尤其是脂肪組織。

RNeasy Plus Universal Kits純化得到總RNA的產(chǎn)量大鼠/小鼠組織(10 mg)總RNA產(chǎn)量 ( g)脂肪組織 0.5 2.5腦5 20心臟5 25腸10 60腎5 40肝15 80肺5 15肌肉5 35皮膚2 5脾15 100 

使用real-time RT-PCR和QIAxcel體系分析純化得到的RNA，表明這些RNA具有較好的完整性。gDNA Eliminator Solution和RNeasy技術(shù)可高效去除大部分基因組DNA污染，無需進行DNase處理。

原理

RNeasy Plus Universal操作流程可從各種類型組織中純化RNA，包括脂肪或不易裂解的組織。RNeasy Plus Universal Kits整合了苯酚/胍裂解技術(shù)和硅膠膜總RNA純化技術(shù)。試劑盒中的QIAzol Lysis Reagent是一種由苯酚和硫氰酸胍組成的單相溶液，專為方便的裂解各種組織設計，并能抑制RNases的活性。高效的裂解以及通過有機抽提去除污染物，使RNeasy離心柱可用于處理更大量的組織。gDNA Eliminator溶液能有效去除基因組DNA污染，非常有助于DNA分離到中間相。

操作流程

RNeasy Plus Universal操作流程易于進行，與苯酚處理后回收相比，此方法更快、更有效，能得到更高純度和產(chǎn)量的RNA。RNeasy Plus Universal Mini Kit可從50 mg組織中純化RNA；RNeasy Plus Universal Midi Kit可從250 mg組織中純化RNA。

可使用TissueRuptor、TissueLyser LT或TissueLyser II在QIAzol Lysis Reagent中進行樣本勻漿。加入gDNA Eliminator Solution，勻漿離心分為水相和有機相。收集含有RNA的上層水相，加入乙醇，使用RNeasy離心柱純化RNA。總RNA結(jié)合到離心柱膜上，苯酚和其他污染物被高效洗去。獲得的高品質(zhì)RNA可用RNase-free水洗脫下來。

該實驗方案適用于富集mRNA，不包括大部分小于200 nt的RNAs（如rRNAs和tRNAs）。RNeasy Plus Universal操作流程稍作修改后可從培養(yǎng)細胞中純化包含miRNA等小RNAs的總RNA。

應用

RNeasy Plus Universal Kits純化得到的RNA非常適用于對少量DNA敏感的下游應用，如定量real-time RT-PCR。純化得到的RNA還可以用于其他應用。

 

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