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中國科學(xué)院上海細(xì)胞庫|T82 人的原粒細(xì)胞(已通過STR鑒定)_T82 細(xì)胞,細(xì)胞 T82,T82 人的原粒細(xì)胞,人的細(xì)胞 T82,T82 人的細(xì)胞_供應(yīng)信息_91化工儀器網(wǎng)

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放大字體  縮小字體    發(fā)布日期:2019-09-02  來源:儀器信息網(wǎng)  作者:Mr liao  瀏覽次數(shù):1033
核心提示:感恩回饋,價(jià)格實(shí)惠,物美價(jià)廉,量大從優(yōu),部分產(chǎn)品贈送。。。。。。上海素冉生物科技有限公司是一批由美國留學(xué)歸來的致力于服務(wù)中國生物領(lǐng)域的青年創(chuàng)辦的一家新型公司。公司自創(chuàng)辦以來,以優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品、快捷的速度和完善的售后服務(wù),贏得生物界老師的厚愛,您選擇素冉的理由: 產(chǎn)品齊全:囊括實(shí)驗(yàn)室儀器、設(shè)備、實(shí)驗(yàn)室耗材、免疫生物學(xué)試劑、動物生物學(xué)試劑、植物生物學(xué)試劑、微生物學(xué)試劑、細(xì)胞生物學(xué)試劑、遺傳學(xué)生物試劑、生物化學(xué)試劑、分子生物學(xué)試劑。 品牌齊全:囊括國內(nèi)外100多個(gè)知名品牌。 方便、快捷,訂貨周期短,選擇服務(wù)質(zhì)量好的

感恩回饋,價(jià)格實(shí)惠,物美價(jià)廉,量大從優(yōu),部分產(chǎn)品贈送。。。。。。

 上海素冉生物科技有限公司是一批由美國留學(xué)歸來的致力于服務(wù)中國生物領(lǐng)域的青年創(chuàng)辦的一家新型公司。公司自創(chuàng)辦以來,以優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品、快捷的速度和完善的售后服務(wù),贏得生物界老師的厚愛,您選擇素冉的理由: 產(chǎn)品齊全:囊括實(shí)驗(yàn)室儀器、設(shè)備、實(shí)驗(yàn)室耗材、免疫生物學(xué)試劑、動物生物學(xué)試劑、植物生物學(xué)試劑、微生物學(xué)試劑、細(xì)胞生物學(xué)試劑、遺傳學(xué)生物試劑、生物化學(xué)試劑、分子生物學(xué)試劑。 品牌齊全:囊括國內(nèi)外100多個(gè)知名品牌。 方便、快捷,訂貨周期短,選擇服務(wù)質(zhì)量好的快遞,全稱跟蹤,及時(shí)到達(dá)您的手中。素冉生物努力打造生物領(lǐng)域內(nèi)的京東商城。 平價(jià):同等質(zhì)量的產(chǎn)品,我們這里價(jià)格實(shí)惠,為您節(jié)省每一分錢。 優(yōu)質(zhì)的售后服務(wù):實(shí)驗(yàn)過程,我們有技術(shù)全程跟蹤指導(dǎo),若有問題,我們第一時(shí)間為您處理,保證您售后無憂。 多姿多彩的技術(shù)服務(wù):免疫學(xué)技術(shù)服務(wù)、Western Blotting技術(shù)服務(wù)、實(shí)時(shí)熒光定量PCR(RealTime PCR)技術(shù)服務(wù)、病理學(xué)檢測技術(shù)服務(wù)等。 總之,素冉生物是您值得信賴的地方:誠實(shí)正直,以客戶的切身利益為出發(fā)點(diǎn),關(guān)注客戶,協(xié)助客戶一起成長!

 

公司全部產(chǎn)品進(jìn)入。。。

 

 

細(xì)胞名稱:中國科學(xué)院上海細(xì)胞庫|T82 人的原粒細(xì)胞(已通過STR鑒定)

T82 人的原粒細(xì)胞| T82細(xì)胞

細(xì)胞介紹

T-47分離自一位54歲乳房侵入性導(dǎo)管癌的女性患者胸水。發(fā)現(xiàn)分化的上皮亞株(T-47D)有細(xì)胞質(zhì)連接和17 雌二醇及其他類固醇降血鈣素的受體。細(xì)胞表達(dá)WNT7B癌基因。

 

細(xì)胞特性

1) 來源:乳腺管癌

2) 形態(tài):上皮細(xì)胞樣

3) 含量: 1x106 個(gè)/mL

4) 污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測為陰性

5) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

 

運(yùn)輸和保存

可選擇干冰運(yùn)輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細(xì)胞方式:

(1)干冰運(yùn)輸,收到后立即轉(zhuǎn)入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復(fù)蘇;

(2)存活細(xì)胞,收到后應(yīng)繼續(xù)生長,傳代達(dá)到細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),再進(jìn)行凍存。具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。

(3)收到細(xì)胞后請拍照,3天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染,請及時(shí)拍照與我們聯(lián)系。

 

細(xì)胞用途:僅供科研使用。

細(xì)胞接受后的處理:

1) 收到細(xì)胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。

2) 請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。

3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml新的完全培養(yǎng)基。

4) 如果細(xì)胞長滿(80%-90%)請及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代。

5) 接到細(xì)胞次日,請檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時(shí)與我們?nèi)〉寐?lián)系。

 

T82 人的原粒細(xì)胞| T82細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1) 準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;添加0.01mg/ml胰島素;雙抗,1%。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。

二. 細(xì)胞處理:

1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

注:第一次傳代推薦傳代比例為1:2,以后傳代比例可根據(jù)客戶需要自己決定。

3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。

下面T25瓶為例;

1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。

2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。

3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。


 

收到細(xì)胞后如何處理

1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時(shí)與臻科生物技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。

2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。

4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。

5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。

6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí),若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作。

 

做細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的同學(xué)看過來。原裝ATCC細(xì)胞現(xiàn)貨來啦。 

選擇上海素冉生物細(xì)胞有3個(gè)理由:

1、細(xì)胞狀態(tài)好,形態(tài)佳,易成活,是市面上比較好養(yǎng)的細(xì)胞之一;

2、物流迅速,復(fù)蘇好后發(fā)貨,次日就能到;

3、使用我司推薦的進(jìn)口品牌血清進(jìn)行培養(yǎng)實(shí)驗(yàn),效果更佳。

 

 

專業(yè)技術(shù)人員李工收藏的細(xì)胞培養(yǎng)小技巧:

1. 買細(xì)胞要去靠譜的地方買,比如 ATCC 或者素冉生物。一般上面會有針對細(xì)胞的介紹,這樣培養(yǎng)之前可以了解細(xì)胞正常生長的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等。

2. 不管是買的細(xì)胞,還是別人惠贈的細(xì)胞,剛拿到手趕緊的做兩件事:檢測是否有支原體污染;迅速擴(kuò)增凍存,凍存細(xì)胞復(fù)蘇后第二天蕞好更換一次培養(yǎng)基。

3. 發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有污染迅速處理掉,特別是當(dāng)你養(yǎng)了很多種細(xì)胞時(shí)。細(xì)菌污染、真菌污染很容易發(fā)現(xiàn),支原體污染的話,細(xì)胞會長的慢,可以買個(gè)支原體檢測的試劑盒定期檢測一下。

4. 不同細(xì)胞生長周期不同。有的生長很快,比如說 MDA-MB-231,傳代的時(shí)候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了。有的又是特別慢,比如 BT474,傳代是一分二,復(fù)蘇起始的時(shí)候兩周多才能長滿。這就需要要在培養(yǎng)細(xì)胞的過程中多多摸索。

5. 對于嬌弱的細(xì)胞,就得細(xì)心呵護(hù)。胰酶消化不能過久,吹得時(shí)候要輕柔,離心時(shí)候也要注意轉(zhuǎn)速和時(shí)間。每天都要去看一下細(xì)胞,肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀況。記住,是每天。

 

 

細(xì)胞培養(yǎng)常見問題及解決方法

問題

原因

解決方案

細(xì)胞生長緩慢

生長培養(yǎng)基使用不當(dāng)

按照生產(chǎn)商的建議,使用相應(yīng)的預(yù)熱生長培養(yǎng)基。

生長培養(yǎng)基中血清質(zhì)量差

使用其他批次血清。

傳代操作不當(dāng)

按照生產(chǎn)商的建議消化時(shí)間及傳代比例進(jìn)行操作。

換液過于頻繁

降低換液頻率,參考生產(chǎn)商推薦的換液頻率。

細(xì)胞傳代次數(shù)過多

使用傳代次數(shù)較少的健康細(xì)胞。

細(xì)胞生長超過匯合狀態(tài)

哺乳動物細(xì)胞傳代應(yīng)在細(xì)胞處于對數(shù)期、未達(dá)到匯合狀態(tài)時(shí)進(jìn)行,建議細(xì)胞密度達(dá) 80-90%傳代。

細(xì)胞被支原體污染

將細(xì)胞、培養(yǎng)基和試劑丟棄;新取一只凍存細(xì)胞,并且使用新的培養(yǎng)基和試劑。

細(xì)胞復(fù)蘇存活率低

細(xì)胞凍存不當(dāng)

新取一只凍存細(xì)胞,并儲存在液氮中。將細(xì)胞儲存在液氮中,直至復(fù)蘇。

自行制備的凍存細(xì)胞無活性

將細(xì)胞按照生產(chǎn)商推薦的密度凍存。

制備凍存細(xì)胞時(shí)使用傳代次數(shù)少的細(xì)胞。

嚴(yán)格按照生產(chǎn)商推薦的操作程序凍存細(xì)胞。請注意本手冊推薦的冷凍程序是凍存細(xì)胞的一般流程,只能作為指導(dǎo)原則使用。

新取一只凍存細(xì)胞。

細(xì)胞復(fù)蘇方法不當(dāng)

嚴(yán)格按照生產(chǎn)商推薦的操作程序復(fù)蘇細(xì)胞。請注意本手冊推薦的解凍程序是復(fù)蘇細(xì)胞的一般流程,只能作為指導(dǎo)原則使用。

確保冷凍細(xì)胞解凍迅速,接種前用預(yù)熱的生長培養(yǎng)基緩慢稀釋細(xì)胞。

復(fù)蘇培養(yǎng)基使用不當(dāng)

使用生產(chǎn)商推薦的培養(yǎng)基。確保培養(yǎng)基使用前已經(jīng)預(yù)熱。

細(xì)胞稀釋過度

按照生產(chǎn)商的建議,將解凍后的細(xì)胞高密度接種,以改善復(fù)蘇效果。

處理細(xì)胞時(shí)動作不夠輕柔

凍存和復(fù)蘇過程對大多數(shù)細(xì)胞都會造成不利影 響。不要通過渦旋振蕩或者用力敲打培養(yǎng)瓶的方法使細(xì)胞脫落(培養(yǎng)昆蟲細(xì)胞時(shí)除外),也不要高速離心細(xì)胞。

凍存液中所用保護(hù)劑在儲存過程中未避光

如果未避光儲存,凍存保護(hù)劑會轉(zhuǎn)變?yōu)閷?xì)胞有毒性的物質(zhì);新取一只凍存保護(hù)劑,重新凍存細(xì)胞。

 

 ★由于細(xì)胞庫現(xiàn)有細(xì)胞類目多,為了不出現(xiàn)混亂錯(cuò)誤,需要了解相關(guān)細(xì)胞價(jià)格及詳細(xì)資料直接call,對您造成的不便還請見諒!
 ★注:如運(yùn)輸過程中導(dǎo)致細(xì)胞污染或者死亡,我們將無條件補(bǔ)發(fā)
       收貨后十個(gè)工作日內(nèi)有其他問題提供照片可半價(jià)重發(fā)
最后,通過低溫保藏儲備一些細(xì)胞,以防支原體大面積來襲。如果支原體有抬頭的跡象,或常規(guī)檢測呈陽性結(jié)果,那么最可靠的補(bǔ)救措施是扔掉所有培養(yǎng)物,清潔培養(yǎng)箱和超凈臺,一切從頭開始。當(dāng)然,你得確保儲備的細(xì)胞是不含支原體的。

 

 

 

 
 
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