細(xì)胞凍存是現(xiàn)在生物科學(xué)中，非常重要的保存細(xì)胞的一種非常有效的手段，細(xì)胞凍存最主要的就是細(xì)胞凍存液的使用，在細(xì)胞凍存過程中，配合細(xì)胞凍存液的使用才可以讓細(xì)胞較大程度的保持其原有的一種活性。那么細(xì)胞凍存液的配制方法和注意事項(xiàng)有什么呢？  目前細(xì)胞凍存的過程中，大多都是采用甘油或者二甲基亞砜作為細(xì)胞凍存的保護(hù)劑，常用細(xì)胞凍存液的組成成分包括：20％的血清、10％的DMSO、70％的1640培養(yǎng)液；或者可以采用90％的血清、10％的DMSO，這樣的配制方法可以更加防止細(xì)胞內(nèi)的冰晶形成。配制過程中需要將DMSO和FBS加入到DMEM之中，然后各自的含量占總體積的10%，最后需要濾膜過濾后進(jìn)行分裝，用以保存?zhèn)溆?。DMSO在凍存液中分子量小、溶解度較大、易透過細(xì)胞膜，這樣就會降低細(xì)胞外溶液中的溶質(zhì)濃度，可以使細(xì)胞免受高濃度溶質(zhì)的傷害，細(xì)胞內(nèi)的水分也不會外滲的過多，所以這樣就更加的避免了由于細(xì)胞過分脫水而產(chǎn)生皺縮的現(xiàn)象產(chǎn)生。DMSO與水分子產(chǎn)生結(jié)合，這樣就可以使冰點(diǎn)下降從而可以減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成，減少冰晶損傷。  在配制細(xì)胞凍存液的時候，需要注意：DMSO這一物質(zhì)不能夠用高壓進(jìn)行滅菌處理；DMEM不能使用高溫高壓進(jìn)行滅菌處理，不過可以進(jìn)行過濾除菌。DMSO在配制的時候必須要用新的，而且需要注意要進(jìn)行避光保存。DMSO中必須含10%FBS的DMEM。細(xì)胞凍存液的配制必須要保證是在無菌的條件下進(jìn)行的，很多時候由于實(shí)驗(yàn)人員沒有做好消毒工作而導(dǎo)致凍存液的配制失去原有功能是常有的事情，所以每一個實(shí)驗(yàn)人員都需要嚴(yán)格的注意操作環(huán)境。

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