厭氧菌與人類及動物的生命密切相關,隨著醫(yī)學及生物技術的發(fā)展,人類對厭氧菌的研究越來越廣泛,由于厭氧菌的厭氧特性,其培養(yǎng)必須在無氧條件下進行,用厭氧培養(yǎng)法進行厭氧菌的培養(yǎng)很簡便、實用,是醫(yī)院、工廠、教育及科研領域培養(yǎng)、檢驗、研究厭氧菌的重要手段。
常見的厭氧培養(yǎng)裝置近年關于厭氧菌培養(yǎng)技術和方法獲得驚人的發(fā)展,使厭氧菌的培養(yǎng)技術日趨完善。厭氧培養(yǎng)技術可分為一般厭氧技術和嚴格厭氧技術,一般厭氧技術又可分為厭氧袋法和厭氧罐法,嚴格厭氧技術是指厭氧箱法。
1、厭氧袋
國外商品名為“Bio-Bag”為一透明、不透氣的塑料袋,內配有產氣、催化、厭氧度指示及吸濕四個系統(tǒng),可在1.5h內建立厭氧條件,并能保持一周。
2、厭氧罐
厭氧罐培養(yǎng)技術自1916年問世以來,大體經(jīng)歷了一個簡便化、高效化安全化、規(guī)?;蜕唐坊难葑冞^程。使厭氧罐達到無氧狀態(tài)有多種方法,例如,用抽氣換氣法以氮或二氧化碳驅除罐內氧氣。
3、厭氧培養(yǎng)箱
我國八十年代曾由陳聰敏教授等人開發(fā)厭氧手套箱和義烏生產的抽氣換氣厭氧培養(yǎng)裝置,但終因造價較高,厭氧性能稍遜而未獲得全國的推廣和使用,現(xiàn)在國內有單位在霍爾碼(forma)厭氧手套箱開發(fā)原理基礎上,開發(fā)研制出小型簡易的厭氧手套培養(yǎng)箱,立足于我國的國情,裝置造價低廉,操作使用簡單容易。
厭氧培養(yǎng)裝置的原理及使用1、厭氧袋的原理及使用
根據(jù)氫“燃燒”除氧的原理所設計的一種簡易厭氧袋,不但適用于培養(yǎng)各種臨床標本中的厭氧菌,也適合培養(yǎng)其他專性厭氧菌。
厭氧袋除氧的主要原理是:①利用氫硼化鈉或氫硼化鉀與水反應產生氫,氫與密封袋中的氧氣在鈀催化下結合成水,從而建立起無氧小環(huán)境。②厭氧袋中二氧化碳由檸檬酸生成,利用美藍的變色反應作為厭氧度的指示劑。厭氧環(huán)境無氧指示劑呈無色,有氧則變?yōu)樗{色。
厭氧袋結構:
①塑料袋:用電熱法燙制的無毒復合透明薄膜塑料袋(14*32cm):
②產氣系統(tǒng):取直徑1.0cm,長16cm左右的無毒塑料軟管1根,用電熱法封其一端。將NaBH4 0.2g和NaHCO3 0.2g(按袋體積500mL計算)用擦鏡紙包成小包,塞入軟管底部,其上塞少量脫脂棉花。再將內含5%的檸檬酸溶液1.5mL的安瓶管裝入塑料管,然后加上一個有缺口的泡沫塑料小塞即成:
③厭氧度指示管指示系統(tǒng):取直徑1cm,長8cm無毒透明塑料軟管1根。將內含1mL美藍指標劑的安瓶裝人軟管,在其上下口都先塞入少量脫脂棉花,再加泡沫塑料軟塞即成;
④催化劑催化系統(tǒng):取市售鈀粒(A型)5-10粒,經(jīng)加熱活化后裝入帶有孔的小塑料硬管內即可;
⑤吸濕劑包吸濕系統(tǒng):取變色硅膠少許,用濾紙包成小包就可以。
使用時放入已接種好的平板后,盡量擠出袋內空氣,然后密封袋口。先折斷氣體發(fā)生管,后折斷美蘭指示劑管,使袋內在半小時內造成無氣環(huán)境,如不變化表示袋內已達厭氧狀態(tài)。
2、厭氧罐的原理及使用
厭氧罐,罐體為聚碳酸酯材料制成,透明度好,配有硅橡膠密封圈,以保證密封。罐內分有三個空間,可分別放置培養(yǎng)皿、脫氧劑和指示劑。
(1)罐體:常見的規(guī)格是內徑為15cm,高25cm的圓筒形罐休,其內可放直徑9cm培養(yǎng)皿10只;在蓋的下方中央,旋連著一個金屬絲網(wǎng)盒,用于存放活化的鈀粒。
(2)H2和CO2的供應:厭氧罐供氫和CO2有內源法和外源法兩種。內源法相似于厭氧袋。外源法抽氣換氣程序為:抽氣一換氣一再抽氣一充N2-CO2充H2。
(3)催化劑目前一般均用常溫下即可起催化的“冷式”催化劑,如“鈀粒”、“鈀條”等,它是由含鈀的石棉等填充料加工而成的。每次使用前,把催化劑在140-160攝氏度烘箱內烘2h活化;
(4)厭氧指示劑:目前常用的仍是化學法,尤其是利用美藍,也有用刃天青作為指標劑。
3、厭氧培養(yǎng)箱的原理及使用
厭氧培養(yǎng)箱是一種在無氧環(huán)境下進行細菌培養(yǎng)及操作的專用裝置,可培養(yǎng)最難生長的厭氧生物,又能避免以往厭氧生物在大氣中的操作時接觸氧而死亡的危險性嘲。
結構特點:該產品由培養(yǎng)操作室、取樣室、氣路及電路控制系統(tǒng)、熔蠟消毒器等部分組成。溫控系統(tǒng)采用高精度數(shù)顯式控溫儀,能準確直觀的反映箱內實際溫度,加上有效的限溫保護裝置,安全可靠。箱內裝有紫外線殺菌燈,氣體經(jīng)過過濾后進入箱內,可有效避免細菌污染。歧路裝置可任意調節(jié)流量,能任意輸入各種氣體。操作室均由不銹鋼板制成。其前窗采用透明耐沖壓特種玻璃制成。操作使用專用手套,可靠、舒適、靈活、使用方便。操作室內配有特殊接種棒滅菌器,熔蠟消毒裝置,還裝有除氧催化器。
操作方法:操作者將手伸入操作室,關緊操作室與取樣室的封閉門。打開取樣室的封閉門,將培養(yǎng)皿放入取樣室,關緊取樣室封閉門。將培養(yǎng)皿放入操作室內培養(yǎng)箱,操作室與取樣室間的封閉門虛掩。調溫,使操作室內培養(yǎng)箱溫度達到所需溫度。充入氮氣和混合氣各三次以上。檢察操作系統(tǒng)。
注意事項:禁止在真空狀態(tài)下打開艙門、手套口壓蓋或進行拆卸檢修。內置電源為220V、50Hz、1KW。手套應先于或同時于箱體抽真空,后于或同時于箱體停止抽真空。外接氣源管件應適配、接插應密封牢靠,充氣時不宜超過零壓即1個大氣壓。
4、其他厭氧培養(yǎng)裝置及厭氧培養(yǎng)方法
厭氧缸:接種好標本的平板或液體培養(yǎng)基試管,可放入?yún)捬醺變扰囵B(yǎng),厭氧缸是普通的干燥缸,用物理化學的方法使缸內造成厭氧環(huán)境,從而將厭氧菌培養(yǎng)出來。
厭氧盒:原理同厭氧袋,有成品銷售。
生物耗氧法:在一密閉的容器內放以生物(多是植物),消耗氧氣,同時產生二氧化碳,供細菌生長用。
焦性末食子酸法:在一潔凈的玻片上鋪上紗布或濾紙,均勻撒上焦性末食子酸,然后再混入NaHCO3粉末或NaOH溶液,迅速將已接種細菌的平板倒扣在上面,用融化的自蠟封邊,造成一個封閉空間。
厭氧培養(yǎng)裝置的應用目前實驗室應用較多的為百寶牌Bb03-A型2.4升厭氧菌培養(yǎng)罐,SHELLAB厭氧箱及YQX厭氧培養(yǎng)箱。隨著厭氧菌等相關研究領域的發(fā)展,厭氧裝置是高等院校、科研單位、企業(yè)實驗室開展科學實驗理想的厭氧裝置,將會更廣泛的應用于生化、冶金、電子、化工、地質、礦產、醫(yī)藥等部門。
2018-09-19 15:40:47 1987次 http://www.yiqi.com/daogou/detail_852.html 熱門標簽:我國制造培養(yǎng)箱的歷史也已有幾十年的歷史了,在世界培養(yǎng)箱市場的中低端我們占有一席之地。培養(yǎng)箱適用于環(huán)境保護、衛(wèi)生防疫、藥檢、農畜、水產等研究、院校、生產部門。是水體分析,細菌、霉菌、微生物的培養(yǎng)、保存,植物栽培,育種實驗的專用恒溫設備。
09-19
培養(yǎng)箱的種類繁多,目前應用最為廣泛的培養(yǎng)箱主要有生化培養(yǎng)箱、二氧化碳培養(yǎng)箱、電熱恒溫培養(yǎng)箱、隔水式電熱恒溫培養(yǎng)箱四種類型,每種類型都有其特點和獨特的功用,以用于不同的科研及教學領域。
09-19
培養(yǎng)箱具有制冷和加熱雙向調溫系統(tǒng),是植物、微生物、遺傳等科研部門不可缺少的實驗室設備,被廣泛應用于低溫恒溫試驗、培養(yǎng)試驗、環(huán)境試驗等。近年來,隨著科學技術的發(fā)展,培養(yǎng)箱為生命科學及生化醫(yī)藥領域帶來新變革。
09-19
用戶對培養(yǎng)箱都有兩條最基本的要求:一是要求培養(yǎng)箱能夠對溫度和濕度提供最精確穩(wěn)定的控制,以便于其研究工作的進展;二是要求培養(yǎng)箱能夠對培養(yǎng)箱內的微生物污染進行有效的防范,并且能夠定期消除污染,以保護研究成果,防止樣品損失。
09-19
培養(yǎng)箱,具有制冷和加熱雙向調溫系統(tǒng),溫度可控的功能,是植物、生物、微生物、遺傳、病毒、醫(yī)學、環(huán)保等科研、教育部門不可缺少的實驗室設備,廣泛應用于低溫恒溫試驗、培養(yǎng)試驗、環(huán)境試驗等。
09-19