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固相萃取是近年發(fā)展起來一種樣品預處理技術(shù)，由液固萃取和柱液相色譜技術(shù)相結(jié)合發(fā)展而來，主要用于樣品的分離、純化和濃縮，與傳統(tǒng)的液液萃取法相比較可以提高分析物的回收率，更有效的將分析物與干擾組分分離，減少樣品預處理過程，操作簡單、省時、省力。廣泛的應用在醫(yī)藥、食品、環(huán)境、商檢、化工等領(lǐng)域。
固相萃取儀針對填料保留機理的不同(填料保留目標化合物或保留雜質(zhì))，操作稍有不同。固相萃取操作一般有四步:
萃取前先用充滿小柱的溶劑沖洗小柱或用5-10ml溶劑沖洗濾膜使SPE填料保持濕潤，因為填料干燥會降低樣品保留值，而各小柱的干燥程度不一，也會影響回收率的重現(xiàn)性。先用甲醇等水溶性有機溶劑沖洗填料，因為甲醇能潤濕吸附劑表面，并滲透到非極性的硅膠鍵合相中，使硅膠更容易被水潤濕；然后再加入水或緩沖液沖洗，創(chuàng)造和樣品溶劑相容的環(huán)境并提高回收率。
一般可采取以下四種方法：
(1)用0.1mol/L酸或堿調(diào)節(jié)，使pH9，離心取上層液萃??；
(2)用甲醇、乙腈等沉淀蛋白質(zhì)后取上清液，以水或緩沖液稀釋后萃?。?/p>
(3)用酸或無機鹽沉淀蛋白質(zhì)后取上清液，調(diào)節(jié)pH值后萃取；
(4)超聲15min后加入水、緩沖液，取上清液萃取。流速應控制為1ml/min，流速快不利于待測物與固定相結(jié)合。
反相SPE的清洗溶劑多為水或緩沖液，可在清洗液中加入少量有機溶劑、無機鹽或調(diào)節(jié)pH值。加入小柱的清洗液應不超過一個小柱的容積，而SPE濾膜為5～10ml。
應選用5～10ml離子強度較弱但能洗下待測物的洗脫溶劑。若需較高靈敏度，則可先將洗脫液揮干后，再用流動相重組殘留物后進樣。體內(nèi)樣品洗脫后多含有水，可選用冷凍干燥法。保留能力較弱的SPE填料可用小體積、較弱的洗脫液洗下待測物，再用極性較強的HPLC分析柱如C18柱分析洗脫物。
若待測物可電離，可調(diào)節(jié)pH值，抑制樣品離子化，以增強待測物在反相SPE填料中的保留，洗脫時調(diào)節(jié)pH值使其離子化并用較弱的溶劑洗脫，收集洗脫液后再調(diào)節(jié)pH值使其在HPLC分析中達到最佳分離效果。在洗脫過程中應減慢流速，用兩次小體積洗脫代替一次大體積洗脫，回收率更高。
2.填料保留雜質(zhì)固相萃取操作一般有三步:
活化--除去柱子內(nèi)的雜質(zhì)并創(chuàng)造一定的溶劑環(huán)境。
上樣--將樣品轉(zhuǎn)移入柱，此時大部分目標化合物會隨樣品基液流出，雜質(zhì)被保留在柱上，開始收集。
洗脫---用小體積的溶劑將組分淋洗下來并收集，合并收集液。
此種情況多用于食品或農(nóng)殘分析中去除色素。
1.一個樣品包括分離物和干擾物通過吸附劑；
2.吸附劑選擇性的保留分離物和一些干擾物，其他干擾物通過吸附劑；
3.用適當?shù)娜軇┝芟次絼瓜惹氨Ａ舻母蓴_物選擇性的淋洗掉，分離物保留在吸附劑床上；
4.純化、濃縮的分離物從吸附劑上淋洗下來。
固相萃取儀的使用操作注意事項不正確的使用固相萃取儀會導致觸電或火災事故。為防止發(fā)生危險情況，請在安裝使用、維護和清潔固相萃取儀時遵照下述指引。為確保您的安全及延長固相萃取儀的使用壽命， 保持固相萃取儀的使用質(zhì)量，請仔細閱讀下述安全注意事項。
1、向該裝置提供的真空壓力不應大于0.1Mpa。
2、固相萃取柱與接頭應安裝配合好，當發(fā)現(xiàn)系統(tǒng)總是達不到設(shè)定壓力時，請檢查各接頭是否擰緊，氣壓蓋密封墊是否平整。
3、玻璃器件在操作過程中請一定放置平當。
4、系統(tǒng)配有12支流量閥開關(guān)，當某一路不使用時，可將其關(guān)閉，以保證系統(tǒng)保持一定壓力。
5.電源線應妥善設(shè)置，避免被人踩踏和物體擠壓。
6.交流電源插座和延展電線不可過荷，過荷會引發(fā)火災或觸電事故。
7.請勿將任何異物通過通風孔或開口塞入機內(nèi)，請勿將水或其它液體濺到機箱的控制面板上。
2018-07-31 14:21:22 3118次 http://www.yiqi.com/daogou/detail_631.html 熱門標簽：利用數(shù)控泵的技術(shù)，各小柱接頭可獨立提供相對恒定的負壓，讓各種溶液按標準分析程序要求的流速通過小柱，確保目標分析物質(zhì)的高效萃取，最后將小柱轉(zhuǎn)換到洗脫架上，正壓勻速洗脫，避免交叉污染。
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