核酸蛋白檢測(cè)儀和紫外分析儀的區(qū)別
核酸蛋白檢測(cè)儀又稱紫外檢測(cè)儀,是根據(jù)生命科學(xué)的發(fā)展對(duì)于現(xiàn)代色譜儀器的要求而改進(jìn)設(shè)計(jì)的一種新型紫外檢測(cè)儀。以對(duì)蛋白、核酸、肽等生物大分子物質(zhì)的檢測(cè)、分離和純化...[查看全部]
核酸蛋白檢測(cè)儀又稱紫外檢測(cè)儀,是液相色譜中的一種紫外裝置,核酸蛋白檢測(cè)儀配上層析柱,恒流泵,部分收集器等,即組成一套完整的液相色譜分離分析系統(tǒng)。核酸蛋白檢測(cè)儀是現(xiàn)代生物學(xué)研究,藥物測(cè)定、農(nóng)業(yè)科研、化工、食品及醫(yī)療單位對(duì)具有紫外吸收的樣品作定性,半定量分析不可或缺的設(shè)備之一。
核酸蛋白檢測(cè)儀的作用近年來,市場(chǎng)上相繼出現(xiàn)了可代替記錄儀的“電腦采集器”、“電腦核酸蛋白檢測(cè)儀”、“雙波長(zhǎng)電腦核酸蛋白檢測(cè)儀”、“層析-電導(dǎo)聯(lián)用系統(tǒng)”等產(chǎn)品,迅速應(yīng)用到教學(xué)實(shí)驗(yàn)、科學(xué)研究和藥物生產(chǎn)領(lǐng)域。
核酸蛋白檢測(cè)儀主要元器件性能穩(wěn)定、靈敏度高等。核酸蛋白檢測(cè)儀的數(shù)字顯示分為固定光吸收A顯示記錄儀,和可變量程光吸收A顯示記錄儀用兩種模式,這樣不但方便讀數(shù)而且還可以依據(jù)科研需要進(jìn)行可變量程的高靈敏度讀數(shù),有利于對(duì)低濃度樣品檢測(cè)。
所有紫外吸收檢測(cè)器工作原理都是基于光的吸收定律——朗伯-比耳定律。光源經(jīng)220nm、254nm、280nm、340nm等干涉濾色片提供單色光作為檢測(cè)核酸、蛋白、酶、多肽的光源。具體工作原理正如該定律指出,當(dāng)一束單色光(λ)輻射通過稀濃度物質(zhì)溶液時(shí),如果溶劑不吸收光,則液體的吸光度與吸光物質(zhì)的濃度和光經(jīng)過溶液的距離成正比。核酸蛋白檢測(cè)儀其關(guān)系式為:
A(λ)=a(λ)bc
A=-LgT=Lg1/T
核酸蛋白檢測(cè)儀使用某一波長(zhǎng)(280nm或254nm等)進(jìn)行定性檢測(cè)分離,用記錄儀描譜,長(zhǎng)期在高校實(shí)驗(yàn)室使用。
核酸蛋白檢測(cè)儀層析裝置分類按描譜方式分有:記錄儀描譜和電腦描譜(外加采集分析器)。
按檢測(cè)波長(zhǎng)分有:?jiǎn)尾ㄩL(zhǎng)檢測(cè)和雙波長(zhǎng)(多波長(zhǎng))同步檢測(cè)。
按檢驗(yàn)器分有:核酸蛋白檢測(cè)和核酸蛋白檢測(cè)-電導(dǎo)檢測(cè)聯(lián)用。
傳統(tǒng)核酸蛋白檢測(cè)儀傳統(tǒng)層析試驗(yàn)設(shè)備由單波長(zhǎng)核酸蛋白檢測(cè)儀(外加電腦采集器或?qū)㈦娔X采集器裝入檢測(cè)儀中也屬此類)、層析柱、恒流泵、部分收集器和記錄
... 查看全文核酸蛋白檢測(cè)儀又稱紫外檢測(cè)儀,是液相色譜中具有紫外吸收物質(zhì)(蛋白、核酸、多肽、酶)的一種紫外檢測(cè)裝置,可直接讀出光密度A值,且波長(zhǎng)準(zhǔn)確度和重復(fù)性高、單色性好、定性、定量分析中能直接記錄各個(gè)峰面積的相對(duì)峰面值,并能計(jì)算質(zhì)量相對(duì)的含量。
核酸蛋白檢測(cè)儀的結(jié)構(gòu)核酸蛋白檢測(cè)儀是單光路結(jié)構(gòu),由紫外檢測(cè)器、電源和記錄儀三部分組成,由紫外檢測(cè)器和電源連結(jié),屬單體結(jié)構(gòu),現(xiàn)將其構(gòu)造分別說明如下:
1、紫外檢測(cè)器
核酸蛋白檢測(cè)儀由一組光源,四塊干涉濾色片,一塊聚光透鏡,一只樣品池,一只光電倍增管,一塊放大板和一塊對(duì)數(shù)板等組成。面板上有聚乙烯塑料管的進(jìn)樣口和出樣口,A調(diào)零以及調(diào)節(jié)“光量”大小旋鈕(光量大下以箭頭表示)。還有光源指示燈、電源指示燈以及量程轉(zhuǎn)換旋鈕。
核酸蛋白檢測(cè)儀光源主要有214nm、220nm、254nm、280nm、340nm,分別作為檢測(cè)核酸、蛋白、酶、多肽等的光源。
核酸蛋白檢測(cè)儀濾色器一般由214nm、220nm、254nm、280nm、340nm,四塊干涉濾色片組成。從光源發(fā)出的光束除214nm、220nm、254nm、280nm、340nm譜線外尚含有其他波長(zhǎng)的譜線,通過各自所對(duì)應(yīng)的濾色片就把非主譜線波長(zhǎng)以外的其他波長(zhǎng)濾去,這就保證了核酸蛋白檢測(cè)儀的單色性。
核酸蛋白檢測(cè)儀樣品池由一般石英玻璃管拉制而成,內(nèi)徑一般為3毫米左右,容積不大于100微升。
光電倍增管采用IP28或R212(進(jìn)口)光電倍增管作為電轉(zhuǎn)換器,具有靈敏度高,穩(wěn)定性好的優(yōu)點(diǎn)。緊靠在光電倍增管后的放大器是一高輸入阻抗噪音的直流放大器,它把光電倍增管輸出的光電流進(jìn)一步放大,然后輸入到對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換器。
2、核酸蛋白檢測(cè)儀的電源
核酸蛋白檢測(cè)儀的電源部分是一個(gè)獨(dú)立系統(tǒng),單獨(dú)安裝在一機(jī)箱內(nèi)。機(jī)箱內(nèi)有兩塊電路板,一塊是輸出±12V和+27V的低壓穩(wěn)壓電源板,另一塊是帶有高壓負(fù)反饋的高壓穩(wěn)壓電源板
... 查看全文核酸蛋白檢測(cè)儀又稱紫外檢測(cè)儀,是根據(jù)生命科學(xué)的發(fā)展對(duì)于現(xiàn)代色譜儀器的要求而改進(jìn)設(shè)計(jì)的一種新型紫外檢測(cè)儀。以對(duì)蛋白、核酸、肽等生物大分子物質(zhì)的檢測(cè)、分離和純化為目的。
核酸蛋白檢測(cè)儀核酸蛋白檢測(cè)儀是層析分析的主要裝置,核酸蛋白檢測(cè)儀配上層析柱、恒流泵、部分收集器、層析譜分析系統(tǒng)(根據(jù)需要選配)和電腦打印設(shè)備即構(gòu)成一套完整的核酸蛋白檢測(cè)儀分離層析系統(tǒng)。
核酸蛋白檢測(cè)儀是當(dāng)今從事生命科學(xué)研究、藥物測(cè)定、化工、食品科學(xué)及醫(yī)學(xué)研究等行業(yè)的現(xiàn)代分析實(shí)驗(yàn)儀器。核酸蛋白檢測(cè)儀分析系統(tǒng)廣泛用于工業(yè)、農(nóng)業(yè)、科研和大專院校的科學(xué)研究和教學(xué)實(shí)驗(yàn)。
核酸蛋白檢測(cè)儀其原理是根據(jù)物質(zhì)(樣品)對(duì)紫外光有明顯吸收的特征,實(shí)現(xiàn)對(duì)樣品成份含量比對(duì)分析,以便進(jìn)行樣品蛋白、核酸物質(zhì)識(shí)別檢測(cè)和含量測(cè)定。在生化分析、環(huán)??茖W(xué)、食品研究、毒理研究、新藥開發(fā)等領(lǐng)域中對(duì)核酸、蛋白檢測(cè)、純化和提取提供了一種獨(dú)特的分析手段。
紫外檢測(cè)原理基于被測(cè)組分和背景電解質(zhì)的吸光度不同,當(dāng)被檢測(cè)組分通過檢測(cè)窗時(shí),吸光度發(fā)生變化服從朗伯-比爾定律,即在一定的實(shí)驗(yàn)條件下,吸光度與被測(cè)組分的濃度成正比。
紫外分析儀用于核酸蛋白檢測(cè)
首先,核酸的基本結(jié)構(gòu)單位是核苷酸。核苷酸由一個(gè)含氮堿基,一個(gè)戊糖和一個(gè)或幾個(gè)磷酸組成。由于核酸的堿基具有共軛雙鍵,因而有紫外吸收的性質(zhì)。各種堿基、核苷和核苷酸的吸收光譜略有區(qū)別。核酸的紫外吸收峰在260nm附近,可用于測(cè)定核酸。根據(jù)260nm與280nm的吸收光度可判斷核酸純度。
再談蛋白質(zhì),構(gòu)成它的組成是氨基酸,其中的種類包含酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸,這幾種芳香族氨基酸的苯環(huán)含有共軛雙鍵,使蛋白質(zhì)具有吸收紫外光的性質(zhì)。吸收高峰在280nm處,其吸光度(即光密度值)與蛋白質(zhì)含量成正比。所以,紫外吸收法是280nm的光吸收法,含有核酸的蛋白質(zhì)溶液使用280和260nm的吸收差法較好。蛋白質(zhì)的稀
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