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生物顯微鏡的使用方法、注意事項(xiàng)及維護(hù)保養(yǎng)

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放大字體  縮小字體    發(fā)布日期:2019-08-31  來源:儀器信息網(wǎng)  作者:Mr liao  瀏覽次數(shù):999
核心提示:生物顯微鏡是最常見的一種顯微鏡,在很多實(shí)驗(yàn)室中都可以見到,主要是用來觀察生物切片、生物細(xì)胞、細(xì)菌以及活體組織培養(yǎng)、流質(zhì)沉淀等的觀察和研究,同時(shí)可以觀察其他透明或者半透明物體以及粉末、細(xì)小顆粒等物體。生物顯微鏡供醫(yī)療衛(wèi)生單位、高等院校、研究所用于微生物、細(xì)胞、細(xì)菌、組織培養(yǎng)、懸浮體、沉淀物等的觀察,可連續(xù)觀察細(xì)胞、細(xì)菌等在培養(yǎng)液中繁殖分裂的過程等。在細(xì)胞學(xué)、寄生蟲學(xué)、腫瘤學(xué)、免疫學(xué)、遺傳工程學(xué)、工業(yè)微生物學(xué)、植物學(xué)等領(lǐng)域中應(yīng)用廣泛。 生物顯微鏡故障分析 生物顯微鏡是一種精密的光學(xué)儀器,由光學(xué)部分、機(jī)械
生物顯微鏡是最常見的一種顯微鏡,在很多實(shí)驗(yàn)室中都可以見到,主要是用來觀察生物切片、生物細(xì)胞、細(xì)菌以及活體組織培養(yǎng)、流質(zhì)沉淀等的觀察和研究,同時(shí)可以觀察其他透明或者半透明物體以及粉末、細(xì)小顆粒等物體。生物顯微鏡供醫(yī)療衛(wèi)生單位、高等院校、研究所用于微生物、細(xì)胞、細(xì)菌、組織培養(yǎng)、懸浮體、沉淀物等的觀察,可連續(xù)觀察細(xì)胞、細(xì)菌等在培養(yǎng)液中繁殖分裂的過程等。在細(xì)胞學(xué)、寄生蟲學(xué)、腫瘤學(xué)、免疫學(xué)、遺傳工程學(xué)、工業(yè)微生物學(xué)、植物學(xué)等領(lǐng)域中應(yīng)用廣泛。


生物顯微鏡故障分析

生物顯微鏡是一種精密的光學(xué)儀器,由光學(xué)部分、機(jī)械部分和電氣部分等組成,在使用中要正確調(diào)節(jié)瞳距、校正光軸以及調(diào)焦、使用油鏡等。為了保證生物顯微鏡的正常使用,要...[查看全部]


生物顯微鏡是用來觀察生物切片、生物細(xì)胞、細(xì)菌以及活體組織培養(yǎng)、流質(zhì)沉淀等的觀察和研究,同時(shí)可以觀察其他透明或者半透明物體以及粉末、細(xì)小顆粒等物體。

生物顯微鏡的分類

生物顯微鏡按照用途可分為普通型,特種型和高級型三類。

普通型生物顯微鏡,僅供作一般使用和普通研究用。如倒置式生物顯微鏡,攜帶式生物顯微鏡以及通常的農(nóng)用和醫(yī)用顯微鏡均屬這一類。

特種型生物顯微鏡,供在特定條件下使用,觀察和研究,或作為某種專門使用,觀察和研究。干涉顯微鏡,暗場生物顯微鏡,相襯生物顯微鏡,熒光生物顯微鏡,紫外光生物顯微鏡和電視生物顯微鏡均屬這一類。

高級型生物顯微鏡,指大型多用途、附件比較齊全的生物顯微鏡。如研究用生物顯微鏡和萬能研究用生物顯微鏡等均屬這一類。

生物顯微鏡的分類.jpg

生物顯微鏡的用途

生物顯微鏡供醫(yī)療衛(wèi)生單位、高等院校、研究所用于微生物、細(xì)胞、細(xì)菌、組織培養(yǎng)、懸浮體、沉淀物等的觀察,可連續(xù)觀察細(xì)胞、細(xì)菌等在培養(yǎng)液中繁殖分裂的過程等。在細(xì)胞學(xué)、寄生蟲學(xué)、腫瘤學(xué)、免疫學(xué)、遺傳工程學(xué)、工業(yè)微生物學(xué)、植物學(xué)等領(lǐng)域中應(yīng)用廣泛。

人們總是希望能清晰而明亮的理想圖象,這就需要顯微鏡的各項(xiàng)光學(xué)技術(shù)參數(shù)達(dá)到一定的標(biāo)準(zhǔn),并且要求在使用時(shí),必須根據(jù)鏡檢的目的和實(shí)際情況來協(xié)調(diào)各參數(shù)的關(guān)系。只有這樣,才能充分發(fā)揮顯微鏡應(yīng)有的性能,得到滿意的鏡檢效果。

生物顯微鏡的工作參數(shù)

數(shù)值孔徑(NA)

數(shù)值孔徑簡寫NA,數(shù)值孔徑是物鏡和聚光鏡的主要技術(shù)參數(shù),是判斷兩者(尤其對物鏡而言)性能高低的重要標(biāo)志。其數(shù)值的大小,分別標(biāo)刻在物鏡和聚光鏡的外殼上。它是物鏡前透鏡與被檢物體之間介質(zhì)的折射率(n)和孔徑角(u)半數(shù)的正弦之乘積。用公式表示如下:NA=nsinu/2。它與分辨率成正比,與放大率成正比,與焦深成反比,NA值增大,視場寬度與工作距離都會相應(yīng)地變小。

分辨率

生物顯微鏡的分辨率是指能被顯微鏡清晰區(qū)分的兩個(gè)物點(diǎn)的最小間距

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生物顯微鏡是一種精密的光學(xué)儀器,廣泛應(yīng)用于科學(xué)技術(shù)的各個(gè)領(lǐng)域,是醫(yī)學(xué)、生物學(xué)等科研教學(xué)不可或缺的輔助工具。生物顯微鏡使用不當(dāng)就會出現(xiàn)許多故障,或者不能達(dá)到應(yīng)有的效果。因此,生物顯微鏡合理使用非常重要。

生物顯微鏡的使用規(guī)范

1、安裝

在使用生物顯微鏡時(shí),首先要根據(jù)使用要求,選用適當(dāng)?shù)姆糯蟊稊?shù)。生物顯微鏡的總放大倍數(shù)為:物鏡放大倍數(shù)乘上目鏡放大倍數(shù)。

將生物顯微鏡各放大倍率的物鏡按順序裝在轉(zhuǎn)換器上,在物鏡安裝前一定要將物鏡的螺紋相接觸端面以及轉(zhuǎn)換器的螺孔進(jìn)行清潔處理,不允許有任何灰塵存在,否則,會造成安裝不良而影響光學(xué)系統(tǒng)和成像質(zhì)量。接著將目鏡插入目鏡筒中,等待觀察使用。

將所要觀察的標(biāo)本切片放置在工作臺面上并用壓片夾把標(biāo)本切片壓齊,如有移動尺的生物顯微鏡可用襖腳將標(biāo)本切片卡平穩(wěn),否則當(dāng)移動尺作縱向或橫向移動時(shí),觀察的像質(zhì)不穩(wěn)定,當(dāng)然這也可能是由于移動尺本身質(zhì)量不好所致。如有像質(zhì)不穩(wěn)定時(shí),則可作適量的微調(diào)即能彌補(bǔ)這個(gè)缺陷。

生物顯微鏡的使用規(guī)范.jpg

2、照明

在使用生物顯微鏡觀察標(biāo)本切片時(shí),需要有一定的照明,其照明的光源有自然光源和人工光源兩種,不管用哪種光源,為使在觀察時(shí)能得到清晰的物象,其亮度必須適中。要得到適中的亮度,可以從幾個(gè)方面進(jìn)行調(diào)節(jié):一方面可以選用平面的或凹面的反光鏡,同時(shí)又可以轉(zhuǎn)動反光鏡的位置而得到不同的亮度。

當(dāng)光線比較暗時(shí),可選用凹面反光鏡以使光線進(jìn)行會聚而提高亮度。當(dāng)光線比較強(qiáng)時(shí),則選用平面反光鏡,這時(shí)反光鏡使光線轉(zhuǎn)向作用降低亮度。注意切勿將太陽光直射反光鏡,以免使人感覺目眩,從而影響觀察。如有聚光鏡的生物顯微鏡則可將聚光鏡作上下移動使其亮度適中,另外也可以改變可變光闌的孔徑以達(dá)到適中的亮度。如果光線太暗時(shí),則可將聚光鏡適當(dāng)上升,使可變光闌的孔徑適當(dāng)放大。如果光線太強(qiáng)時(shí),則可將聚光鏡適當(dāng)下降,使可變光闌的孔徑適當(dāng)減小。

3、凋焦

在觀察標(biāo)本切片時(shí),必然要進(jìn)行調(diào)

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生物顯微鏡是貴重精密的光學(xué)儀器,是各類生物專業(yè)實(shí)驗(yàn)和科學(xué)研究中最基礎(chǔ)的設(shè)備。生物顯微鏡使用中許多操作不規(guī)范甚至操作錯(cuò)誤的現(xiàn)象,給實(shí)驗(yàn)和科研工作帶來了很多不便,同時(shí),也會降低了生物顯微鏡的使用壽命。

1、生物顯微鏡的取放

不規(guī)范操作:拿取生物顯微鏡時(shí)一只手斜握鏡壁,隨意掂起就放在實(shí)驗(yàn)桌上。

這種方法是不規(guī)范的,很容易造成生物顯微鏡鏡體碰撞和傾斜,導(dǎo)致目鏡筒脫落。正確的方法是右手握緊鏡壁,左手托著鏡座,輕拿輕放,使鏡體保持平衡狀態(tài)。

生物顯微鏡注意事項(xiàng).jpg

2、高倍鏡找視野

不規(guī)范操作:直接用40倍鏡找物象,結(jié)果很難找到目標(biāo),這是生物顯微鏡操作不規(guī)范造成的。

正確的方法如下:

①拿到玻片以后,先要對著光線找到玻片中觀察對象所在的位置,再把玻片(蓋有蓋玻片的面向上)放在載物臺上,用玻片夾固定,這時(shí)扭動載物臺調(diào)節(jié)鈕使玻片上的觀察對象所在位置對準(zhǔn)聚光鏡孔;

②旋轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)換器,先轉(zhuǎn)換成低倍鏡頭,旋轉(zhuǎn)粗調(diào)手鈕捕捉物象后再用微調(diào)手鈕使觀察對象在低倍鏡下清晰可見;

③在低倍鏡下把觀察對象移到視野中央,旋轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)換器換成高倍鏡頭,用微調(diào)手鈕(切忌使用粗調(diào)手鈕)使物象清晰即可觀察目標(biāo)。

3、雙目鏡圖像不重合

不規(guī)范操作:在使用生物顯微鏡時(shí),總是感覺左右眼觀察到的物象不一致。原因是物鏡調(diào)節(jié)圈上與瞳距數(shù)相同數(shù)值的刻線與左右目鏡筒上的刻線不一致。

正確的方法是:通過向內(nèi)或向外滑動物鏡筒蓋板,使左、右鏡中的圖像合并成一,讀取瞳距數(shù),旋轉(zhuǎn)目鏡視度調(diào)節(jié)圈,使調(diào)節(jié)圈上瞳距數(shù)相同數(shù)值的刻線與目鏡筒上的刻線對齊(左、右目同步調(diào))。

4、視野和放大率成反比

不規(guī)范操作:在低倍鏡下看得很清楚的觀察對象,換到高倍鏡下就找不到目標(biāo)了。這是由于忽略了低倍鏡和高倍鏡、油鏡視野的差別所致。對任何一種型號的生物顯微鏡來說,生物顯微鏡放大倍數(shù)越高,視野越小。

正確的操作方法是在低倍鏡找到視野后,把物象移到視野中央,換成高倍鏡再輕

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生物顯微鏡是一種供醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)、實(shí)驗(yàn)室、高等院校、科研院所觀察和測量微生物、細(xì)胞、細(xì)菌的結(jié)構(gòu)尺寸,生物組織切片;以及活體組織培養(yǎng)、流質(zhì)沉淀量、粉末和細(xì)小顆粒的粒度等參數(shù)的測量設(shè)備。

生物顯微鏡在組織學(xué)、細(xì)胞學(xué)、寄生蟲學(xué)、微生物學(xué)、腫瘤學(xué)、免疫學(xué)、遺傳工程學(xué)、植物學(xué)等領(lǐng)域中廣泛應(yīng)用。為得到清晰明亮的理想圖像和滿意的鏡檢效果,分辨率是觀察效果最重要的指標(biāo)。從物理學(xué)角度看,生物顯微鏡的分辨率受光的干涉現(xiàn)象及所用物鏡性能的限制。因此,應(yīng)對生物顯微鏡各項(xiàng)光學(xué)技術(shù)參數(shù)按標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行校準(zhǔn),并對校準(zhǔn)過程中涉及量值準(zhǔn)確要求的項(xiàng)目采取質(zhì)量控制,以保證測量結(jié)果的準(zhǔn)確可靠。

生物顯微鏡的校準(zhǔn)項(xiàng)目

1、外觀檢查。

2、微調(diào)手輪刻線間隔量:帶有刻度的微調(diào)手輪,其平均刻線間隔量應(yīng)為1μm或其整數(shù)倍。

3、生物顯微鏡物鏡放大倍數(shù)誤差:生物顯微鏡物鏡放大率誤差不超過±5%。

4、雙目顯微鏡左右兩系統(tǒng)放大倍數(shù)差:雙目顯微鏡的左右兩系統(tǒng)放大倍數(shù)差不超過2%。

5、雙目顯微鏡左右視場中心偏差。

6、目鏡標(biāo)尺的刻線間隔誤差:目鏡標(biāo)尺的刻線間隔誤差不超過±0.01mm。

生物顯微鏡的校準(zhǔn)項(xiàng)目.jpg

生物顯微鏡校準(zhǔn)環(huán)境條件

環(huán)境溫度:(20±10)℃;相對濕度:45%~85%。

生物顯微鏡校準(zhǔn)方法

1、外觀方面

生物顯微鏡應(yīng)標(biāo)有名稱、型號、編號、制造廠等信息。光學(xué)系統(tǒng)在整個(gè)視場內(nèi)成像應(yīng)清晰,視場內(nèi)不應(yīng)有影響觀察的陰影或反射光斑等,成像的清晰區(qū)域應(yīng)與視場同心。

生物顯微鏡各部分運(yùn)動應(yīng)靈活平穩(wěn),無卡滯和跳動現(xiàn)象,視場內(nèi)照明均勻。雙目顯微鏡左右兩系統(tǒng)的光譜色應(yīng)基本一致,無明顯的明暗差異。

2、微調(diào)手輪刻線間隔量

微調(diào)手輪應(yīng)靈活平穩(wěn),松緊適中。微調(diào)手輪刻線間隔量應(yīng)測量手輪的起始、中間、末端三個(gè)位置。測量前,將指示表用專用夾具固定在生物顯微鏡上,保證指示表與顯微鏡緊固、牢靠,固定指示表時(shí)應(yīng)保證測量頭與載物臺垂直接觸。調(diào)節(jié)生物顯微鏡調(diào)焦手

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生物顯微鏡在教學(xué)和科學(xué)研究中具有很重要作用。但是,如何維護(hù)、保養(yǎng)生物顯微鏡,使它發(fā)揮最大的性能,并能延長其使用壽命,是生物顯微鏡使用中不可忽視的工作。

生物顯微鏡的維護(hù)保養(yǎng)

在日常使用中,生物顯微鏡需要保養(yǎng)的光學(xué)部件有物鏡表面、目鏡的上表面、聚光鏡、底座光源出口、目鏡筒內(nèi)側(cè)等;機(jī)械部件有主機(jī)架、載物臺;光源部分有燈泡的更換等等。

1、理想的清潔工具及清潔液的配制

清潔工具包括吹氣球,清潔液,棉花與軟木棍,擦鏡紙,軟紗布,放大鏡(可用目鏡代用)。

清潔溶液為分析純酒精,分析純乙 醚。其中,無水乙醇占30%、乙 醚占70%。

考慮到乙 醚容易揮發(fā),造成混合液比例改變,影響清潔效果,所以最好現(xiàn)配現(xiàn)用。不推薦用100%無水酒精和二甲苯。因?yàn)?00%無水酒精清潔后容易留下痕跡,二甲苯不僅容易留下痕跡,而且對鍍膜的傷害較大。

生物顯微鏡的維護(hù)保養(yǎng).jpg

2、光學(xué)部件的擦拭方向及清潔步驟

擦拭透鏡前一定要先除去灰塵沙礫,以免使鏡劃起溝紋影響使用效果。最好先用吹氣球或者吹氣 槍吹掉表面的塵土顆粒,結(jié)合軟毛刷輕輕吹刷,然后再用擦鏡紙醮取清潔液進(jìn)行擦拭。

3、光學(xué)部件的維護(hù)

①生物顯微鏡光路污染判斷

當(dāng)生物顯微鏡光源開啟時(shí),將高倍物鏡轉(zhuǎn)入光路,放上標(biāo)本聚焦,將聚光鏡的孔徑光瀾關(guān)小,再移開標(biāo)本,通過目鏡觀察,光路中的污點(diǎn)將出現(xiàn)。這些污點(diǎn)可能存在于以下光學(xué)部件,目鏡、物鏡、觀察筒、或者一些中間光學(xué)組件中。可以單獨(dú)旋轉(zhuǎn)目鏡或者物鏡來判斷污點(diǎn),當(dāng)單獨(dú)旋轉(zhuǎn)目鏡或者物鏡時(shí),污點(diǎn)轉(zhuǎn)動,那么污點(diǎn)是在目鏡或者物鏡上,此時(shí)我們可以進(jìn)一步拆卸目鏡和物鏡進(jìn)行檢查并清除。如果轉(zhuǎn)動目鏡和物鏡時(shí),污點(diǎn)不動,那么污點(diǎn)可能在觀察筒和中間光學(xué)組件中,此時(shí)我們可以轉(zhuǎn)動觀察筒來判斷,同樣我們也能找出污點(diǎn)所在并清除。

②目鏡和物鏡表面臟物檢查

拆下目鏡,逆著光的方向并不斷改變觀察角度,可以清楚地看到物鏡表面是否有污物。

當(dāng)物鏡有污物時(shí)

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生物顯微鏡是一種精密的光學(xué)儀器,由光學(xué)部分、機(jī)械部分和電氣部分等組成,在使用中要正確調(diào)節(jié)瞳距、校正光軸以及調(diào)焦、使用油鏡等。為了保證生物顯微鏡的正常使用,要學(xué)會及時(shí)排除生物顯微鏡的故障。

生物顯微鏡常見故障維修

1、生物顯微鏡的載物臺自行下滑

載物臺是用于承載需要觀察物品的平臺,載物臺只有處于恰當(dāng)?shù)奈恢貌⒈3制椒€(wěn)的狀態(tài)才能夠保證科研人員在進(jìn)行觀察時(shí)能夠在穩(wěn)定的狀態(tài)下認(rèn)真地觀察,但是在利用生物顯微鏡進(jìn)行觀察的過程中常常會出現(xiàn)載物臺自動向下滑的問題,這也是生物顯微鏡常見的故障之一。

生物顯微鏡常見故障維修.jpg

當(dāng)出現(xiàn)生物顯微鏡的載物臺出現(xiàn)上述問題時(shí),一般利用下述的方法來排除故障:首先,可以用適當(dāng)旋緊鎖緊手輪以增加齒輪和齒條之間的嚙合間隙;或者用定位手輪固定平臺,使之不會下降來保證觀察的準(zhǔn)確性。然而如果經(jīng)過上述的調(diào)試之后,載物臺自動向下滑落的問題沒有得到解決,那么就應(yīng)該通過調(diào)整彈片的高低的方法來加大摩擦,進(jìn)而穩(wěn)固載物臺,具體做法是把微動手輪拆卸下來,拉出齒輪箱部件,拿出波紋彈片,適當(dāng)調(diào)整波紋程度后重新安裝即可。

2、生物顯微鏡的鏡頭內(nèi)的視野不清晰

生物顯微鏡的鏡頭內(nèi)部視野不清晰是在使用生物顯微鏡過程中另一個(gè)常見的故障,導(dǎo)致這個(gè)問題的直接原因是生物顯微鏡的鏡頭受到污染,如鏡頭內(nèi)部產(chǎn)生了霉斑或者塵埃,需要對目鏡和物鏡等進(jìn)行清洗,清洗目鏡和物鏡都需要把鏡片拆下來再清洗,對于目鏡而言,把目鏡直接拆下來并清洗即可,但是對于物鏡而言,拆卸的過程就比較復(fù)雜了,原因是物鏡的內(nèi)部結(jié)構(gòu)很復(fù)雜,物鏡內(nèi)鏡片的疊放層次和順序都有自己的規(guī)律,因此清洗完物鏡的鏡片之后,必須嚴(yán)格按照物鏡鏡片原來的位置重新安裝物鏡鏡片。

3、生物顯微鏡的物鏡轉(zhuǎn)動困難

生物顯微鏡物鏡的轉(zhuǎn)換器具有根據(jù)使用者的需求可以轉(zhuǎn)動的功能,但是在使用過程中物鏡轉(zhuǎn)換器會出現(xiàn)轉(zhuǎn)動困難或者不能夠準(zhǔn)確定位的問題,這主要是因?yàn)楣潭萁z擰的太緊或者太松造成的。

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