大腸桿菌的檢測(cè)方法
大腸桿菌,周身鞭毛,能運(yùn)動(dòng),無(wú)芽孢。其是很多動(dòng)物和人的腸道中數(shù)量最多并且也是最主要的一種細(xì)菌,其主要在大腸內(nèi)生活。下面就讓小編帶你了解一下大腸桿菌的檢測(cè)方法。衛(wèi)...[查看全部]
大腸桿菌的檢測(cè)方法 : 大腸桿菌的應(yīng)用和影響大腸桿菌導(dǎo)致的疾病大腸桿菌的防治方法大腸桿菌的致病物質(zhì)大腸桿菌的基因型
大腸桿菌,周身鞭毛,能運(yùn)動(dòng),無(wú)芽孢。其是很多動(dòng)物和人的腸道中數(shù)量最多并且也是最主要的一種細(xì)菌,其主要在大腸內(nèi)生活。下面就讓小編帶你了解一下大腸桿菌的檢測(cè)方法。
衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)檢查
隨著糞便,大腸桿菌不斷被排出體外,使得食品、水源以及周圍的環(huán)境遭受了污染。取樣檢查時(shí),如果樣品中有越多的大腸桿菌,那么就說(shuō)明樣品遭受了更加嚴(yán)重的污染,也表示羊皮紙具有越大的可能性存在大腸桿菌。因此飲水、食品、飲料等應(yīng)該接受衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)檢查。
1、大腸菌數(shù)指數(shù):
采用乳糖發(fā)酵法進(jìn)行檢測(cè),指的是每立升中大腸菌群數(shù)。中國(guó)的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定大腸菌群在每1000ml飲水中不能夠高于3個(gè),瓶裝汽水、果汁等每100ml不能夠有高于5個(gè)大腸菌群。
2、細(xì)菌總數(shù):
對(duì)每毫升或每克樣品中所含細(xì)菌數(shù)進(jìn)行檢測(cè),使用傾注培養(yǎng)計(jì)算。中國(guó)的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定在每毫升飲水中不能夠有高于100個(gè)的細(xì)菌總數(shù)。
全自動(dòng)微生物定量分析儀(TEMPO)檢測(cè)
全自動(dòng)微生物定量分析(TEMPO)儀對(duì)大腸桿菌群進(jìn)行計(jì)數(shù)檢測(cè)有兩種方法,分別是TC和CC。在TEMPO儀器上按照BAM方法專門(mén)被用來(lái)對(duì)食品中大腸桿菌群進(jìn)行24小時(shí)計(jì)數(shù)的方法是TEMPO CC法。該法是為了獲得和AOAC官方方法966.24及美國(guó)公共健康聯(lián)合會(huì)檢測(cè)乳制品檢測(cè)方發(fā)(SMEDP)一致的效果。TEMPO TC的開(kāi)發(fā)是為了獲得NF ISO4832標(biāo)準(zhǔn)相當(dāng)性能水平。原始樣本中大腸桿菌群數(shù)目是TEMPO系統(tǒng)根據(jù)陽(yáng)性空的大小和數(shù)目推算出來(lái)的。
細(xì)菌的分離和鑒定
1.標(biāo)本
腹瀉者取糞便、腸道外感染取中段尿、血液、膿液、腦脊液等。
2.分離培養(yǎng)和鑒定
糞便標(biāo)本直接接種腸道桿菌選擇性培養(yǎng)基。血液需先經(jīng)肉湯增菌,再轉(zhuǎn)種血瓊脂平板。其他標(biāo)本可同時(shí)接種血瓊脂平板和腸道桿菌選擇性培養(yǎng)基。在137℃下孵育18~24小時(shí),然后用先觀察菌落并涂片染色,通過(guò)一系列生化反應(yīng)來(lái)進(jìn)行鑒定腸致病性大腸桿菌需要先做血清學(xué)定型試驗(yàn)。,必要時(shí)對(duì)腸霉毒素進(jìn)行檢定。
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大腸桿菌(Escherichia coli,E.coli) 革蘭氏陰性短桿菌,大小為0.5×1~3μm。周生鞭毛,能運(yùn)動(dòng),無(wú)芽孢??梢园l(fā)酵多種糖類產(chǎn)酸、產(chǎn)氣,是人和動(dòng)物腸道中的正常棲居菌,嬰兒出生后其就隨著哺乳進(jìn)入腸道,糞便干重的1/3幾乎都是它。根據(jù)國(guó)家規(guī)定每毫升飲用水中的菌落總數(shù)小于100,每100毫升水中總大腸菌群不能被檢測(cè)出。大腸桿菌有很復(fù)雜的抗原成分,表面抗原(K)、鞭毛抗原(H)和菌體抗原(O)均包括其中,表面抗原(K)能夠抗機(jī)體吞噬和抗補(bǔ)體。下面就讓小編帶你一起去了解一下大腸桿菌的防治辦法。
治療方法
感染大腸桿菌O157 :H7的臨床治理方法主要屬支持性治療。如果患者出現(xiàn)腹瀉,補(bǔ)充失去的水分及電解質(zhì)尤為重要。大約一半有腎并發(fā)癥的患者在出現(xiàn)急性癥狀時(shí)需要特別治療或輸血。能夠使用抗革蘭氏陰性菌細(xì)菌藥物,但部分藥物沒(méi)有效果。
預(yù)防方法
1.使地方和廚房的器皿保持干凈,應(yīng)該經(jīng)常使用消毒柜對(duì)餐具器皿進(jìn)行消毒,并且妥善處理垃圾。
2.需要經(jīng)常修剪指甲,保持雙手清潔。
3.在吃飯或者處理食物的時(shí)候,應(yīng)該先用肥皂水或者清水把雙手洗干凈。在換完尿片或者上完廁所后也需要把手洗干凈。
4.自來(lái)水最好燒開(kāi)后再喝。
5.食物要挑選新鮮的買(mǎi),不要吃不干凈的食物。
6.不要食用高危食物,例如沒(méi)有經(jīng)過(guò)低溫消毒法處理的牛奶,沒(méi)有熟透的漢堡以及其他肉類。
7.燒菜時(shí),最好穿干凈的衣服和戴上帽子。
8.食物要洗干凈
9.容易腐壞的食物應(yīng)該用蓋子蓋好,然后放在冰箱里保存。
10.生的食物和熟的食物不要放在一起,避免交叉感染
11.冰箱應(yīng)定期清潔和融雪,溫度應(yīng)保持于攝氏4度或以下。
12.如果食物的所有部分都加熱到75度,那么就可以將大腸桿菌消滅掉。
13.不要徒手處理熟食,有需要的話應(yīng)該戴上手套。
14.食物煮熟之后應(yīng)該盡快食用。
15.吃剩的熟食,要用冰箱冷藏,并且要盡快吃,吃之前要加熱,已經(jīng)變質(zhì)的食物要丟掉。
16. 體質(zhì)弱、衰老
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大腸桿菌,周身鞭毛,能運(yùn)動(dòng),無(wú)芽孢。其是很多動(dòng)物和人的腸道中數(shù)量最多并且也是最主要的一種細(xì)菌,其主要在大腸內(nèi)生活。下面就讓小編帶你了解一下大腸桿菌的主要特點(diǎn)。
1.大腸桿菌是原核生物,其是細(xì)菌,其含有由肽聚糖組成的細(xì)胞壁,沒(méi)有細(xì)胞核有擬核,只具有核糖體簡(jiǎn)單的細(xì)胞器。通常由細(xì)胞質(zhì)中的質(zhì)粒作為基因工程中的運(yùn)載體。
2.異養(yǎng)兼性厭氧型是大腸桿菌的代謝類型。
3.在正常的情況下,也就是不致病的情況下,人體與大腸桿菌為互利共生的關(guān)系,而當(dāng)在致病的情況下,人體與大腸桿菌則被認(rèn)為是寄生的關(guān)系。
4.在培養(yǎng)時(shí)不需要想培養(yǎng)基內(nèi)加入生長(zhǎng)因子,鑒別大腸桿菌是否存在的方法是將伊紅美藍(lán)添加到培養(yǎng)基中,因?yàn)橐良t美藍(lán)與大腸桿菌相遇,菌落會(huì)呈深紫色,并帶有金屬光澤。
5.作為外源基因表達(dá)的宿主,大腸桿菌有著清楚的遺傳背景,技術(shù)操作簡(jiǎn)單,培養(yǎng)條件簡(jiǎn)單,能夠進(jìn)行大規(guī)模的發(fā)酵,經(jīng)濟(jì)實(shí)惠,很受遺傳工程專家的重視,大腸桿菌在生物技術(shù)中得到廣泛的應(yīng)用。
6.在生態(tài)系統(tǒng)中,如果大腸桿菌生活在體外,那么其就屬于分解者,如果大腸桿菌生活在大腸里,那么其就屬于消費(fèi)者。
7.大腸桿菌的基因組DNA為擬核中的一個(gè)環(huán)狀分子,同時(shí)可以有多個(gè)環(huán)狀質(zhì)粒DNA。
8.大腸桿菌細(xì)胞的擬核有1個(gè)DNA分子,長(zhǎng)度約為4700000個(gè)堿基對(duì),在DNA分子上分布著大約4 400個(gè)基因,每個(gè)基因的平均長(zhǎng)度約1000個(gè)堿基對(duì)。
大腸桿菌的致病物質(zhì) : 大腸桿菌的應(yīng)用和影響大腸桿菌的檢測(cè)方法大腸桿菌導(dǎo)致的疾病大腸桿菌的防治方法大腸桿菌的基因型
大腸桿菌屬于革蘭氏陰性細(xì)菌(G-)。大腸桿菌是一種普通的原核生物。按照其不同的生物學(xué)特性,致病性大腸桿菌包括彌散粘附性大腸桿菌(DAEC)、腸黏附性大腸桿菌(EAEC)、腸出血性大腸桿菌(EHEC)、腸侵襲性大腸桿菌(EIEC)、腸產(chǎn)毒性大腸桿菌(ETEC)與腸致病性大腸桿菌(EPEC)這六類。下面就讓小編帶你了解一下大腸桿菌中的致病物質(zhì)。
黏附素
定居因子(colonizationfactor,CF),又被叫做粘附素(Adhesin),就是大腸桿菌的菌毛。為了避免被腸蠕動(dòng)和腸分泌液清除,致病大腸桿菌必須先在宿主腸壁上粘附。CFAⅠ、CTAⅡ(colonizationfactorantigenⅠ、Ⅱ)能夠?qū)е氯藗兏篂a。定居因子具有較強(qiáng)的免疫原性,可以刺激機(jī)體產(chǎn)生特異性抗體。大腸桿菌具有諸如外毒素、黏附素、〣型分泌系統(tǒng)(〣型分泌系統(tǒng)指的是可以向真核靶細(xì)胞內(nèi)輸送毒性基因產(chǎn)物的細(xì)菌效應(yīng)系統(tǒng)。其大約是由20余種蛋白質(zhì)構(gòu)成。)、莢膜以及內(nèi)毒素等多種毒力因子。
細(xì)菌可以利用黏附素在泌尿道和腸道的細(xì)胞上緊密黏著,從而避免了因排尿時(shí)尿液的沖刷和腸道的蠕動(dòng)作用而被排除。大腸桿菌黏附素具有高特異性的特點(diǎn)。其包含Dr菌毛、侵襲質(zhì)??乖鞍住菌毛、緊密黏附素、束形成菌毛、集聚黏附菌毛〡和〣以及定植因子抗原〡,〢,〣等。
外毒素
很多種類的外毒素都可以通過(guò)大腸桿菌而產(chǎn)生,不耐熱腸毒素〡和〢、耐熱腸毒素〡和〢以及志賀毒素〡和〢都包含在其中。除此之外,在尿路致病性大腸桿菌所致疾病中,溶血素A具有重要的作用。腸產(chǎn)毒性大腸桿菌在生長(zhǎng)繁殖過(guò)程中釋放的外毒素,被稱為腸毒素,其分為不耐熱和耐熱兩種。
耐熱腸毒素
耐熱腸毒素(Heatstableenterotoxin,ST),對(duì)熱穩(wěn)定,在100℃保持20分鐘,依然沒(méi)有被破壞,它具有很小的分子量和很弱的免疫原性。小腸上皮細(xì)胞的鳥(niǎo)苷酸環(huán)化酶能夠被ST激活,從而增加了胞內(nèi)的cGMP
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