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高內(nèi)涵在模式生物中的應(yīng)用(二)——中國生物器材網(wǎng)

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放大字體  縮小字體    發(fā)布日期:2019-08-15  來源:儀器信息網(wǎng)  作者:Mr liao  瀏覽次數(shù):1095
高內(nèi)涵系統(tǒng)不僅僅適用于各種各樣的細(xì)胞模型,對(duì)各種小型的模式生物也非常友好,通過將這些模式生物放在微孔板中,我們就可以用高內(nèi)涵系統(tǒng)來拍攝和分析它們。本期,我們將繼續(xù)介紹高內(nèi)涵與這些模式生物的故事。     擬南芥為兩年生草本,一般可長到7-40厘米,是植物學(xué)最為常見的模式生物。其幼苗、根、莖、葉、原生質(zhì)體均可在高內(nèi)涵上進(jìn)行自動(dòng)成像和分析。     高內(nèi)涵用于研究活體擬南芥全葉組織中膜運(yùn)輸?shù)恼{(diào)節(jié),40倍水浸式物鏡對(duì)擬南芥葉片進(jìn)行多層掃描,使用高內(nèi)涵分析軟件Harmony識(shí)別膜泡轉(zhuǎn)運(yùn)體,統(tǒng)計(jì)其數(shù)目、熒光強(qiáng)度、定位等參數(shù)[2](如下圖)。  

  秀麗隱桿線蟲   秀麗隱桿線蟲在遺傳與發(fā)育生物學(xué)、行為與神經(jīng)生物學(xué)、衰老與壽命、人類遺傳性疾病都有非常重要的貢獻(xiàn),成蟲體長為1mm,通身透明。一般首先對(duì)秀麗線蟲進(jìn)行麻醉,再進(jìn)行高內(nèi)涵拍攝。     分析不同藥物處理后秀麗線蟲的數(shù)量和熒光強(qiáng)度,10倍物鏡拍攝多個(gè)視野,高內(nèi)涵分析軟件Harmony識(shí)別不同線蟲,計(jì)數(shù)并分析線蟲的熒光強(qiáng)度[3](如下圖)。  

    藻類的生長、繁殖與水體環(huán)境密切相關(guān),常作為水體污染指示物,用于對(duì)水體的實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)中。小型藻類可放置于微孔板中,通過離心使其貼底,從而進(jìn)行高內(nèi)涵的拍攝,根據(jù)研究內(nèi)容不同,一般采用20倍-63倍水浸式物鏡進(jìn)行成像。很多研究中通過對(duì)葉綠體的成像來判斷藻類的狀態(tài),成像過程需要設(shè)置針對(duì)葉綠素自發(fā)熒光特殊的檢測(cè)方法,即通過設(shè)定激發(fā)光和發(fā)射光,定義一個(gè)新的通道(excitation 460-490nm,emission 655-705nm)。     藻類用于檢測(cè)水質(zhì)污染,本研究中,模擬微塑料水質(zhì)污染,檢驗(yàn)裸藻的生長狀態(tài),采用20倍水浸式物鏡(NA 1.0) 進(jìn)行成像,綠色為微塑料,紅色為葉綠素。(如下圖)  

  生長狀態(tài)不好的裸藻葉綠素?zé)晒鈴?qiáng)度減弱,形態(tài)發(fā)生變化。(如下圖)  

  左圖為Harmony軟件識(shí)別裸藻細(xì)胞,中間圖為通過形態(tài)區(qū)分形態(tài)正常的梭狀裸藻(紅色)和因毒性變圓的裸藻(綠色),右圖為通過熒光強(qiáng)度區(qū)分死亡裸藻(綠色)和存活裸藻(紅色)。     2.High-throughput confocal imaging of intact live tissue enables quantification of membrane trafficking in Arabidopsis. Plant Physiol. 2010 Nov;154(3):1096-104. doi: 10.1104/pp.110.160325. Epub 2010 Sep 14. 3.Expanding the Biological Application of Fluorescent Benzothiadiazole Derivatives: A Phenotypic Screening Strategy for Anthelmintic Drug Discovery Using Caenorhabditis elegans. SLAS Discov. 2019 Aug;24(7):755-765. doi: 10.1177/2472555219851130. Epub 2019 Jun 10.   關(guān)于珀金埃爾默:   珀金埃爾默致力于為創(chuàng)建更健康的世界而持續(xù)創(chuàng)新。我們?yōu)樵\斷、生命科學(xué)、食品及應(yīng)用市場(chǎng)推出獨(dú)特的解決方案,助力科學(xué)家、研究人員和臨床醫(yī)生解決最棘手的科學(xué)和醫(yī)療難題。憑借深厚的市場(chǎng)了解和技術(shù)專長,我們助力客戶更早地獲得更準(zhǔn)確的洞見。在全球,我們擁有12500名專業(yè)技術(shù)人員,服務(wù)于150多個(gè)國家,時(shí)刻專注于幫助客戶打造更健康的家庭,改善人類生活質(zhì)量。2018年,珀金埃爾默年?duì)I收達(dá)到約28億美元,為標(biāo)準(zhǔn)普爾500指數(shù)中的一員,紐交所上市代號(hào)1-877-PKI-NYSE。了解更多有關(guān)珀金埃爾默的信息,請(qǐng)?jiān)L問www.perkinelmer.com.cn。
 
關(guān)鍵詞: 線蟲 內(nèi)涵 物鏡 熒光 擬南芥
 
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