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近日，廣州市婦女兒童醫(yī)療和中科院巴斯德研究所聯(lián)合博后湯書兵老師在《Nano Letters》雜志上發(fā)表了科學(xué)文章 《 Versatile functionalization of ferritin nanoparticles by intein-mediated trans-splicing for antigen/adjuvant co-delivery 》。
圖1. 閃譜ClearFirst-3000型蛋白純化系統(tǒng)助力高水平論文發(fā)表
自組裝蛋白納米顆粒擁有高度均一的結(jié)構(gòu)、良好的生物相容性和極好的可塑性等天然性優(yōu)勢(shì)，越來(lái)越廣泛和深入地被設(shè)計(jì)改造，用于整合佐劑和抗原，以激發(fā)持久有效的免疫應(yīng)答。然而，基于表面修飾功能化納米顆粒有兩個(gè)常見(jiàn)問(wèn)題：（1）負(fù)載物時(shí)常引起納米顆粒解聚；（2）抗原與佐劑難以用傳統(tǒng)的基因融合技術(shù)共遞送。該論文報(bào)道了一種基于內(nèi)涵肽介導(dǎo)的反式剪接方法，克服了負(fù)載蛋白對(duì)鐵蛋白納米顆粒穩(wěn)定性的不利影響，并允許在同一個(gè)納米顆粒表面以一種便捷、高效、特異的方式共展示抗原和佐劑。該研究以一種表位抗原為模型，揭示了抗原和佐劑共給藥納米顆粒比其他劑型可誘導(dǎo)更為高效的保護(hù)性免疫。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明蛋白質(zhì)編輯可作為一種應(yīng)用前景廣闊的技術(shù)共遞送抗原/佐劑以增強(qiáng)抗原相關(guān)免疫應(yīng)答。
上海巴斯德研究所錢志康課題組聯(lián)合博后湯書兵老師使用上海閃譜生物科技有限公司ClearFirst-3000型蛋白純化系統(tǒng)從反應(yīng)后溶液中高效純化分離出了多種不同功能的嵌合型納米顆粒，其中包括納米疫苗SP70-HFT（圖2、3）、納米佐劑rhizavidin-HFT（圖4、5；rhizavidin為單體抗生物素蛋白，用以結(jié)合生物素化的CpG）、共遞送納米顆粒（圖6、7）SP70/rhizavidin-HFT等，并比較了它們對(duì)免疫反應(yīng)的影響，發(fā)現(xiàn)抗原/佐劑共輸送的納米顆粒SP70/CpG-HFT可增強(qiáng)與抗原偶聯(lián)的免疫反應(yīng)。以下結(jié)果為本論文中利用ClearFirst-3000型蛋白純化系統(tǒng)純化的不同功能的納米顆粒和ClearFirst-3000型蛋白純化系統(tǒng)。
圖2. 在閃譜ClearFirst-3000型蛋白純化系統(tǒng)上基于凝膠過(guò)濾法從反應(yīng)后溶液中分離純化納米疫苗SP70 /HFT的UV圖譜（摘自Figure 3d）
圖3. Tricine-SDS-PAGE檢測(cè)凝膠過(guò)濾法從反應(yīng)后溶液中分離純化納米疫苗SP70-HFT (摘自Figure 3c)
圖4. 在閃譜ClearFirst-3000型蛋白純化系統(tǒng)上，基于凝膠過(guò)濾法從反應(yīng)后溶液中分離純化納米佐劑rhizavidin-HFT的UV圖譜（摘自Figure S5h）
圖5. Tricine-SDS-PAGE檢測(cè)凝膠過(guò)濾法從反應(yīng)后溶液中分離純化納米佐劑rhizavidin-HFT（摘自Figure S5g）
圖6. 在閃譜ClearFirst-3000型蛋白純化系統(tǒng)上，基于凝膠過(guò)濾法從反應(yīng)后溶液中分離純化共遞送納米制劑SP70/rhizavidin-HFT的UV圖譜（摘自Figure S6b）
圖7. Tricine-SDS-PAGE檢測(cè)凝膠過(guò)濾法從反應(yīng)后溶液中分離純化共遞送納米制劑SP70/rhizavidin-HFT (摘自Figure S6a)
圖8. 閃譜ClearFirst-3000型蛋白純化系統(tǒng)
該文章一經(jīng)發(fā)表便引起整個(gè)行業(yè)的廣泛關(guān)注，文章影響因子高達(dá)12.2分。上海巴斯德研究所錢志康老師和博后湯書兵老師是本次研究課題隊(duì)伍的核心人物。湯書兵老師研究方向是開發(fā)全新的模塊納米顆粒遞進(jìn)技術(shù)，用于疫苗研發(fā)、個(gè)性化腫瘤治療等，致力于推動(dòng)人類生命健康發(fā)展，不斷地進(jìn)行科學(xué)技術(shù)攻關(guān)。
圖9. 文章作者湯書兵老師
錢志康老師1996年7月畢業(yè)于復(fù)旦大學(xué)生物化學(xué)系，獲學(xué)士學(xué)位；2005年1月畢業(yè)于復(fù)旦大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，獲博士學(xué)位。2005年6月至2012年3月在美國(guó)華盛頓大學(xué)醫(yī)學(xué)院微生物系先后為博士后，研究員（Staff scientist）?，F(xiàn)任中國(guó)科學(xué)院上海巴斯德研究所皰疹病毒分生物學(xué)研究組組長(zhǎng)，研究員，博士生導(dǎo)師。 從事人類重要病毒學(xué)研究十余年，主要工作集中在人巨細(xì)胞病毒（HCMV）的分子生物學(xué)及其與宿主相互作用的研究，已在Journal of Virology, PLoS Pathogens 等權(quán)威國(guó)際學(xué)術(shù)刊物上發(fā)表論文10余篇，申請(qǐng)專利6項(xiàng)，獲授權(quán)專利4項(xiàng)。近五年承擔(dān)了國(guó)家自然科學(xué)基金、國(guó)家科技部重大專項(xiàng)，國(guó)家重大基礎(chǔ)研究，中科院重點(diǎn)項(xiàng)目，是美國(guó)微生物協(xié)會(huì)和病毒學(xué)協(xié)會(huì)會(huì)員。
圖10：文章作者錢志康老師
本次課題研究使用的是上海閃譜生物科技有限公司的ClearFirst-3000型蛋白純化系統(tǒng)，該儀器主要應(yīng)用于大型生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)室的蛋白純化工作，與傳統(tǒng)方法相比，極大提高了純化工作的效率，節(jié)約大量的人力物力。上海閃譜生物科技有限公司是國(guó)內(nèi)知名分析儀器公司投資的，以留學(xué)人員為主體的高科技公司，專注于蛋白純化系統(tǒng)和酶標(biāo)儀等生命科學(xué)儀器的研發(fā)生產(chǎn)，致力于為生命科學(xué)工作者提供優(yōu)質(zhì)的科學(xué)儀器。上海閃譜生物科技有限公司與廣州市婦女兒童醫(yī)療中心和中科院巴斯德研究所共同合作促進(jìn)了本次課題研究的成功，以后上海閃譜會(huì)繼續(xù)提供優(yōu)質(zhì)的生命科學(xué)儀器，為推動(dòng)中國(guó)的生命科學(xué)研究不斷進(jìn)步！
圖1. 閃譜ClearFirst-3000型蛋白純化系統(tǒng)助力高水平論文發(fā)表
自組裝蛋白納米顆粒擁有高度均一的結(jié)構(gòu)、良好的生物相容性和極好的可塑性等天然性優(yōu)勢(shì)，越來(lái)越廣泛和深入地被設(shè)計(jì)改造，用于整合佐劑和抗原，以激發(fā)持久有效的免疫應(yīng)答。然而，基于表面修飾功能化納米顆粒有兩個(gè)常見(jiàn)問(wèn)題：（1）負(fù)載物時(shí)常引起納米顆粒解聚；（2）抗原與佐劑難以用傳統(tǒng)的基因融合技術(shù)共遞送。該論文報(bào)道了一種基于內(nèi)涵肽介導(dǎo)的反式剪接方法，克服了負(fù)載蛋白對(duì)鐵蛋白納米顆粒穩(wěn)定性的不利影響，并允許在同一個(gè)納米顆粒表面以一種便捷、高效、特異的方式共展示抗原和佐劑。該研究以一種表位抗原為模型，揭示了抗原和佐劑共給藥納米顆粒比其他劑型可誘導(dǎo)更為高效的保護(hù)性免疫。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明蛋白質(zhì)編輯可作為一種應(yīng)用前景廣闊的技術(shù)共遞送抗原/佐劑以增強(qiáng)抗原相關(guān)免疫應(yīng)答。
上海巴斯德研究所錢志康課題組聯(lián)合博后湯書兵老師使用上海閃譜生物科技有限公司ClearFirst-3000型蛋白純化系統(tǒng)從反應(yīng)后溶液中高效純化分離出了多種不同功能的嵌合型納米顆粒，其中包括納米疫苗SP70-HFT（圖2、3）、納米佐劑rhizavidin-HFT（圖4、5；rhizavidin為單體抗生物素蛋白，用以結(jié)合生物素化的CpG）、共遞送納米顆粒（圖6、7）SP70/rhizavidin-HFT等，并比較了它們對(duì)免疫反應(yīng)的影響，發(fā)現(xiàn)抗原/佐劑共輸送的納米顆粒SP70/CpG-HFT可增強(qiáng)與抗原偶聯(lián)的免疫反應(yīng)。以下結(jié)果為本論文中利用ClearFirst-3000型蛋白純化系統(tǒng)純化的不同功能的納米顆粒和ClearFirst-3000型蛋白純化系統(tǒng)。
圖2. 在閃譜ClearFirst-3000型蛋白純化系統(tǒng)上基于凝膠過(guò)濾法從反應(yīng)后溶液中分離純化納米疫苗SP70 /HFT的UV圖譜（摘自Figure 3d）
圖3. Tricine-SDS-PAGE檢測(cè)凝膠過(guò)濾法從反應(yīng)后溶液中分離純化納米疫苗SP70-HFT (摘自Figure 3c)
圖4. 在閃譜ClearFirst-3000型蛋白純化系統(tǒng)上，基于凝膠過(guò)濾法從反應(yīng)后溶液中分離純化納米佐劑rhizavidin-HFT的UV圖譜（摘自Figure S5h）
圖5. Tricine-SDS-PAGE檢測(cè)凝膠過(guò)濾法從反應(yīng)后溶液中分離純化納米佐劑rhizavidin-HFT（摘自Figure S5g）
圖6. 在閃譜ClearFirst-3000型蛋白純化系統(tǒng)上，基于凝膠過(guò)濾法從反應(yīng)后溶液中分離純化共遞送納米制劑SP70/rhizavidin-HFT的UV圖譜（摘自Figure S6b）
圖7. Tricine-SDS-PAGE檢測(cè)凝膠過(guò)濾法從反應(yīng)后溶液中分離純化共遞送納米制劑SP70/rhizavidin-HFT (摘自Figure S6a)
圖8. 閃譜ClearFirst-3000型蛋白純化系統(tǒng)
該文章一經(jīng)發(fā)表便引起整個(gè)行業(yè)的廣泛關(guān)注，文章影響因子高達(dá)12.2分。上海巴斯德研究所錢志康老師和博后湯書兵老師是本次研究課題隊(duì)伍的核心人物。湯書兵老師研究方向是開發(fā)全新的模塊納米顆粒遞進(jìn)技術(shù)，用于疫苗研發(fā)、個(gè)性化腫瘤治療等，致力于推動(dòng)人類生命健康發(fā)展，不斷地進(jìn)行科學(xué)技術(shù)攻關(guān)。
圖9. 文章作者湯書兵老師
錢志康老師1996年7月畢業(yè)于復(fù)旦大學(xué)生物化學(xué)系，獲學(xué)士學(xué)位；2005年1月畢業(yè)于復(fù)旦大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，獲博士學(xué)位。2005年6月至2012年3月在美國(guó)華盛頓大學(xué)醫(yī)學(xué)院微生物系先后為博士后，研究員（Staff scientist）?，F(xiàn)任中國(guó)科學(xué)院上海巴斯德研究所皰疹病毒分生物學(xué)研究組組長(zhǎng)，研究員，博士生導(dǎo)師。 從事人類重要病毒學(xué)研究十余年，主要工作集中在人巨細(xì)胞病毒（HCMV）的分子生物學(xué)及其與宿主相互作用的研究，已在Journal of Virology, PLoS Pathogens 等權(quán)威國(guó)際學(xué)術(shù)刊物上發(fā)表論文10余篇，申請(qǐng)專利6項(xiàng)，獲授權(quán)專利4項(xiàng)。近五年承擔(dān)了國(guó)家自然科學(xué)基金、國(guó)家科技部重大專項(xiàng)，國(guó)家重大基礎(chǔ)研究，中科院重點(diǎn)項(xiàng)目，是美國(guó)微生物協(xié)會(huì)和病毒學(xué)協(xié)會(huì)會(huì)員。
圖10：文章作者錢志康老師
本次課題研究使用的是上海閃譜生物科技有限公司的ClearFirst-3000型蛋白純化系統(tǒng)，該儀器主要應(yīng)用于大型生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)室的蛋白純化工作，與傳統(tǒng)方法相比，極大提高了純化工作的效率，節(jié)約大量的人力物力。上海閃譜生物科技有限公司是國(guó)內(nèi)知名分析儀器公司投資的，以留學(xué)人員為主體的高科技公司，專注于蛋白純化系統(tǒng)和酶標(biāo)儀等生命科學(xué)儀器的研發(fā)生產(chǎn)，致力于為生命科學(xué)工作者提供優(yōu)質(zhì)的科學(xué)儀器。上海閃譜生物科技有限公司與廣州市婦女兒童醫(yī)療中心和中科院巴斯德研究所共同合作促進(jìn)了本次課題研究的成功，以后上海閃譜會(huì)繼續(xù)提供優(yōu)質(zhì)的生命科學(xué)儀器，為推動(dòng)中國(guó)的生命科學(xué)研究不斷進(jìn)步！
