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檢測宮頸惡性上皮瘤病變(CIN)是宮頸癌（CC）篩查最成功的癌癥預(yù)防方法。然而，目前宮頸癌篩查的準(zhǔn)確性很低?，F(xiàn)有研究發(fā)現(xiàn)，外泌體中含有大量遺傳分子，如miRNA，環(huán)狀RNA，LncRNA，mRNA等，它是細(xì)胞間傳遞信息的穩(wěn)定和有效的媒介。鑒于此，作者帶領(lǐng)他的團(tuán)隊，開發(fā)一種更精確且不需要侵入性的外泌體miRNA檢測方法，該成果于2019年4月2日，發(fā)表在了Molecular Cancer雜志（IF=10.679）。作者從121例健康志愿者、宮頸癌患者和CIN患者的血漿外泌體進(jìn)行miRNA測序，并識別候選的外泌體miRNA作為診斷生物標(biāo)志物。為了區(qū)分CIN II+(包括晚期CIN II患者)和CIN-(包括CIN I患者和健康志愿者)的患者，作者鑒定了8個顯著差異表達(dá)的外泌體miRNAs。其中，let-7d-3p和miR-30d-5p在宮頸腫瘤與鄰近正常組織之間存在顯著差異，并在203個血漿外泌體中得到了進(jìn)一步驗證，ROC曲線結(jié)果顯示二者可作為區(qū)分CIN+和CIN-的分子標(biāo)志物。本研究為臨床非侵入性疾病篩查提供了新的視角和方向。 文章信息
發(fā)表時間：2019年4月2日
發(fā)表雜志：Molecular Cancer
影響因子：10.679
測序樣本：121例健康志愿者、宮頸癌患者和CIN患者的血漿外泌體
實驗方法：外泌體miRNA測序 文章技術(shù)路線 文章解析
第一步：對臨床疾病宮頸癌患者樣本準(zhǔn)確性進(jìn)行分類及驗證（臨床樣品收集） A：本研究中的患者人數(shù)。B：本研究收集的所有患者樣本細(xì)胞學(xué)檢測的準(zhǔn)確性。C：研究中所有患者活檢結(jié)果的準(zhǔn)確性。
第二步：進(jìn)行外泌體miRNA測序，篩選差異外泌體miRNA（進(jìn)行測序篩選差異）
樣本：血漿外泌體102例，包括23例健康志愿者，5例CIN I病人，59例CIN II-III，21例SCC（宮頸鱗狀細(xì)胞癌）病人，13例ACC（?腺癌）病人
不同組中差異外泌體miRNA的測序結(jié)果展示 第三步：生信分析（多方向生信分析）
A：差異miRNA的維恩圖解。B：61個差異外泌體RNA的主成分分析。C：61個差異外泌體RNA聚類分析。D：顯著差異的前8個外泌體miRNAs的主成分分析。E：顯著差異的前8個外泌體miRNAs的聚類分析。F：顯著差異的前8個外泌體miRNA的ROC曲線分析。G：4個下調(diào)外泌體miRNA的ROC曲線。F：4個上調(diào)外泌體miRNA的ROC曲線。（G和F中外泌體miRNA表達(dá)水平量化為來自測序數(shù)據(jù)的RPM值）。I：外泌體miRNA靶基因的生物功能富集。J：miRNA-靶基因網(wǎng)絡(luò)圖。 第四步：縮小并擴(kuò)大樣本量驗證差異驗證差異外泌體miRNA（擴(kuò)大樣本量驗證，并進(jìn)行臨床ROC分析）
（1）在46對宮頸癌組織和癌旁組織中，qPCR進(jìn)一步確定候選差異外泌體miRNA的表達(dá)，與外泌體樣本中趨勢一致：其中5個miRNA顯著差異表達(dá) （let-7a-3p, let-7d-3p, miR-30d-5p, miR-183-5p, and miR-182-5p） A：4個在測序結(jié)果中下調(diào)的miRNA。B：4個在測序結(jié)果中上調(diào)的miRNA （2）擴(kuò)大樣本量驗證并進(jìn)行ROC曲線分析
203個血漿樣本，包括50個健康人、34 CIN I病人、56 CIN II-III病人、63 CC病人。 A：let-7d-3p的ROC曲線分析。B：miR-30d-5p的ROC曲線分析。C：let-7d-3p和miR-30d-5p PCR和測序數(shù)據(jù)的ROC分析。D：let-7d-3p和miR-30d-5p的細(xì)胞學(xué)檢測結(jié)果的ROC分析。 文章總結(jié)
本文已鑒定的外泌體miR-30d-5p和let-7d-3p是宮頸癌及無創(chuàng)篩查有價值的診斷生物標(biāo)志物。與TCT或巴氏涂片檢查相比，抽血更方便，而且陰道/子宮頸感染的風(fēng)險更低。它也可以用于常規(guī)血液檢測，這大大減少了患者和臨床醫(yī)生的檢測時間。此外，這些血漿外泌體中的miRNA是穩(wěn)定的，并且對物理降解具有抵抗能力，這使得它們成為篩查宮頸癌的有希望的診斷生物標(biāo)志物。然而，在應(yīng)用于臨床診斷之前，還需要進(jìn)一步使用大樣本進(jìn)行驗證。對這些miRNA的功能研究可以為其在宮頸癌進(jìn)展中的機(jī)制和生理相關(guān)性提供新的見解。 文章鏈接：
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC6446401/ 外泌體相關(guān)科研服務(wù)：
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云序提供外泌體測序服務(wù)
云序提供生信分析服務(wù) 云序生物外泌體相關(guān)產(chǎn)品
Shanghai Cloud-seq Biotech Co., Ltd.
地址：上海市松江區(qū)莘磚公路 518 號 20 號樓 3 樓
電話：021-64878766
傳真：021-64878766
網(wǎng)址：www.cloud-seq.com.cn
郵箱：market@cloud-seq.com.cn
檢測宮頸惡性上皮瘤病變(CIN)是宮頸癌（CC）篩查最成功的癌癥預(yù)防方法。然而，目前宮頸癌篩查的準(zhǔn)確性很低?，F(xiàn)有研究發(fā)現(xiàn)，外泌體中含有大量遺傳分子，如miRNA，環(huán)狀RNA，LncRNA，mRNA等，它是細(xì)胞間傳遞信息的穩(wěn)定和有效的媒介。鑒于此，作者帶領(lǐng)他的團(tuán)隊，開發(fā)一種更精確且不需要侵入性的外泌體miRNA檢測方法，該成果于2019年4月2日，發(fā)表在了Molecular Cancer雜志（IF=10.679）。作者從121例健康志愿者、宮頸癌患者和CIN患者的血漿外泌體進(jìn)行miRNA測序，并識別候選的外泌體miRNA作為診斷生物標(biāo)志物。為了區(qū)分CIN II+(包括晚期CIN II患者)和CIN-(包括CIN I患者和健康志愿者)的患者，作者鑒定了8個顯著差異表達(dá)的外泌體miRNAs。其中，let-7d-3p和miR-30d-5p在宮頸腫瘤與鄰近正常組織之間存在顯著差異，并在203個血漿外泌體中得到了進(jìn)一步驗證，ROC曲線結(jié)果顯示二者可作為區(qū)分CIN+和CIN-的分子標(biāo)志物。本研究為臨床非侵入性疾病篩查提供了新的視角和方向。 文章信息
發(fā)表時間：2019年4月2日
發(fā)表雜志：Molecular Cancer
影響因子：10.679
測序樣本：121例健康志愿者、宮頸癌患者和CIN患者的血漿外泌體
實驗方法：外泌體miRNA測序 文章技術(shù)路線 文章解析
第一步：對臨床疾病宮頸癌患者樣本準(zhǔn)確性進(jìn)行分類及驗證（臨床樣品收集） A：本研究中的患者人數(shù)。B：本研究收集的所有患者樣本細(xì)胞學(xué)檢測的準(zhǔn)確性。C：研究中所有患者活檢結(jié)果的準(zhǔn)確性。
第二步：進(jìn)行外泌體miRNA測序，篩選差異外泌體miRNA（進(jìn)行測序篩選差異）
樣本：血漿外泌體102例，包括23例健康志愿者，5例CIN I病人，59例CIN II-III，21例SCC（宮頸鱗狀細(xì)胞癌）病人，13例ACC（?腺癌）病人
不同組中差異外泌體miRNA的測序結(jié)果展示 第三步：生信分析（多方向生信分析）
A：差異miRNA的維恩圖解。B：61個差異外泌體RNA的主成分分析。C：61個差異外泌體RNA聚類分析。D：顯著差異的前8個外泌體miRNAs的主成分分析。E：顯著差異的前8個外泌體miRNAs的聚類分析。F：顯著差異的前8個外泌體miRNA的ROC曲線分析。G：4個下調(diào)外泌體miRNA的ROC曲線。F：4個上調(diào)外泌體miRNA的ROC曲線。（G和F中外泌體miRNA表達(dá)水平量化為來自測序數(shù)據(jù)的RPM值）。I：外泌體miRNA靶基因的生物功能富集。J：miRNA-靶基因網(wǎng)絡(luò)圖。 第四步：縮小并擴(kuò)大樣本量驗證差異驗證差異外泌體miRNA（擴(kuò)大樣本量驗證，并進(jìn)行臨床ROC分析）
（1）在46對宮頸癌組織和癌旁組織中，qPCR進(jìn)一步確定候選差異外泌體miRNA的表達(dá)，與外泌體樣本中趨勢一致：其中5個miRNA顯著差異表達(dá) （let-7a-3p, let-7d-3p, miR-30d-5p, miR-183-5p, and miR-182-5p） A：4個在測序結(jié)果中下調(diào)的miRNA。B：4個在測序結(jié)果中上調(diào)的miRNA （2）擴(kuò)大樣本量驗證并進(jìn)行ROC曲線分析
203個血漿樣本，包括50個健康人、34 CIN I病人、56 CIN II-III病人、63 CC病人。 A：let-7d-3p的ROC曲線分析。B：miR-30d-5p的ROC曲線分析。C：let-7d-3p和miR-30d-5p PCR和測序數(shù)據(jù)的ROC分析。D：let-7d-3p和miR-30d-5p的細(xì)胞學(xué)檢測結(jié)果的ROC分析。 文章總結(jié)
本文已鑒定的外泌體miR-30d-5p和let-7d-3p是宮頸癌及無創(chuàng)篩查有價值的診斷生物標(biāo)志物。與TCT或巴氏涂片檢查相比，抽血更方便，而且陰道/子宮頸感染的風(fēng)險更低。它也可以用于常規(guī)血液檢測，這大大減少了患者和臨床醫(yī)生的檢測時間。此外，這些血漿外泌體中的miRNA是穩(wěn)定的，并且對物理降解具有抵抗能力，這使得它們成為篩查宮頸癌的有希望的診斷生物標(biāo)志物。然而，在應(yīng)用于臨床診斷之前，還需要進(jìn)一步使用大樣本進(jìn)行驗證。對這些miRNA的功能研究可以為其在宮頸癌進(jìn)展中的機(jī)制和生理相關(guān)性提供新的見解。 文章鏈接：
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC6446401/ 外泌體相關(guān)科研服務(wù)：
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