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化妝品中氨基酸含量的測定步驟
日期:2019-05-15 / 人氣:
隨著大家的生活水平提高,平時使用的化妝品種類也是多如牛毛,其實化妝品的好壞跟其氨基酸的含量是有關(guān)系的。下面給大家介紹一下具體的測定步驟。1、原理
蛋白質(zhì)物質(zhì)經(jīng)水解成氨基酸,而氨基酸在一定的PH條件下,與茚三酮反應生成藍紫色化合物,對其進行比色定量測定,從而計算出相應的氨基酸含量。
2、測定步驟 2.1標準曲線的繪制 準確移取氨基酸標準溶液0.0,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0mL(相當于氨基酸0,40,80,120,160,200pg)分別置于25mL刻度試管中,加水補充至4mL,然后各加入2%茚三酮溶液和磷酸鹽緩沖溶液各1mL,搖勻。置水浴鍋中加熱15min, 取出冷卻至室溫, 加水至刻度, 搖勻。靜置15min, 用分光光度計在570nm波長下以水作參比,用1cm比色皿測定試液的吸光度,繪制吸光度對氨基酸含量(pg)的標準曲線。
2.2樣品前處理 準確稱取樣品約5g(準確至0.001g) 于試管, 加人6mol/L鹽酸溶液約10mL~20mL于沸水浴中水解約6h(對乳化體可先將試樣置于水浴鍋中破乳1h~2h) 。加人約1g~2g蠟塊約30min后, 取出試管冷卻。去除蠟塊,將溶液移至100mL燒杯中,在酸度計上用堿液調(diào)節(jié)pH至7.5~8.0,再將溶液移人100mL容量瓶中并加水稀釋至刻度,搖勻待用。 2.3測定 移取試液1mL~4mL置于25mL刻度試管中,以下按2.1測定步驟進行。測得吸光度,通過標準曲線計算氨基酸的含量,同時做一空白樣。
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