自1996年轉(zhuǎn)基因作物商業(yè)化以來，轉(zhuǎn)基因技術(shù)研究范圍不斷擴大，轉(zhuǎn)基因食品也越來越多地走進消費者的生活。2011年，全球轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物種植面積達到1.6億公頃，大量的轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品被直接或間接的制成人類的食品，呈迅猛發(fā)展的趨勢。以轉(zhuǎn)基因生物為直接食品，作為原料加工生產(chǎn)的食品，以及喂養(yǎng)家畜得到的衍生食品，在廣義上都可以稱為轉(zhuǎn)基因食品。我國于2002年3月20日開始實行的《農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物標識管理辦法》規(guī)定，國家對農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物實行檢驗檢疫和標識制度。世界各國均對轉(zhuǎn)基因食品及其加工產(chǎn)品出具是否為轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的認定報告。因此轉(zhuǎn)基因食品的檢測就顯得尤為重要。

轉(zhuǎn)基因技術(shù)是利用分子生物學(xué)技術(shù)，將某些生物的基因轉(zhuǎn)移到農(nóng)作物中去，改造生物的遺傳物質(zhì)，使其在性狀、營養(yǎng)品質(zhì)、消費品質(zhì)方面向人類所需要的目標轉(zhuǎn)變。轉(zhuǎn)基因食品的檢測主要從兩個方面入手，即核酸水平和蛋白質(zhì)水平，核酸水平主要檢測報告基因、啟動子和終止子，是當前轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測的重要手段。核酸水平的檢測可分為定性和定量兩種。本文分別對Life Technologies公司在核酸水平上進行轉(zhuǎn)基因食品檢測的試劑和儀器進行綜述。

1.轉(zhuǎn)基因提取試劑盒

轉(zhuǎn)基因提取試劑盒(貨號：4466336，圖1)用來從復(fù)雜樣品中提取基因組DNA，繼而用于PCR或其它分子生物學(xué)技術(shù)。該試劑盒可處理的樣品類型包括原材料、食品成分、加工產(chǎn)品例如種子，谷物，面粉，大豆粉，肉類，奶制品，果汁等。樣品勻漿后加入合適體積的裂解液1，溫浴裂解后離心去除沉淀，加入蛋白酶K和裂解液2再次裂解，加入乙醇混勻并轉(zhuǎn)移至過濾柱收集樣品，洗滌洗脫DNA. 按照試劑盒操作說明書建議的樣品量和試劑量，可獲得0-10mg 基因組DNA，提取產(chǎn)量與樣品加工程度有關(guān)，經(jīng)多次理化加工過的樣品提取DNA量較低(表1)。

2.QuantStudioTM7 Flex實時熒光定量PCR儀

QuantStudioTM7 Flex實時熒光定量PCR儀(圖2) 一如既往地提供了ViiA? 7系統(tǒng)所具備的可靠性能、靈敏度和準確性，并采用了全新的工業(yè)設(shè)計，適用于中等至高通量實時熒光定量PCR，有助于提升實驗室的多功能性。只需一臺儀器即可在96孔、快速96孔和384孔形式或TaqMan Array微流體芯片之間更換。利用不同的染料、形式和自動化應(yīng)用潛能，使不同應(yīng)用之間的切換變得更為簡單。

較高的應(yīng)用多樣性——優(yōu)化的實驗方案和試劑及直觀的軟件可滿足最廣泛的應(yīng)用要求。 快速上手——QuantStudio? 7 Flex系統(tǒng)直觀的軟件、簡單的觸摸屏設(shè)置、自動化集成以及輕松的加熱模塊更換，可以立刻上手操作。 更快速地獲得更多結(jié)果——采用TaqMan Array微流體芯片和Twister機器人可輕松運行數(shù)百個實時熒光定量PCR反應(yīng)。QuantStudio? 7 Flex系統(tǒng)可在自動化條件下使通量性能最大化。 模塊靈活性——熱循環(huán)模塊可輕松更換，針對不同研究項目可以選擇標準96孔，快速96孔，快速384孔和TaqMan低密度芯片模塊。定制的TaqMan低密度芯片(圖3)是一種預(yù)置引物探針的384孔微流體芯片，無需液體機器人或多通道移液器裝載樣品即可同時完成384個實時熒光定量PCR反應(yīng)。這種高度靈活的芯片可以對1～8個樣品平行檢測12?384個TaqMan目標基因（包括產(chǎn)品對照）。TaqMan低密度芯片快速、通量高，所需核酸量少，一次可以鑒定多種玉米、大豆等轉(zhuǎn)基因品系。
3. 轉(zhuǎn)基因篩查試劑盒

實時熒光定量PCR是檢測食品中轉(zhuǎn)基因成分最常用的方法，是通過對PCR擴增反應(yīng)中產(chǎn)物的熒光信號進行實時檢測，對起始模板進行定量或定性分析。Life Technologies公司的TaqMan 轉(zhuǎn)基因篩查試劑盒(貨號：4466334，圖4)可檢測食品和飼料樣品DNA中主要轉(zhuǎn)基因元件的存在，并通過對轉(zhuǎn)基因元件與內(nèi)源基因進行定量來計算轉(zhuǎn)基因成分含量。該試劑盒可檢測所有經(jīng)歐盟批準的轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品以及國際數(shù)據(jù)庫中所描述的大部分轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品，并于 Applied Biosystems所有熒光定量PCR 儀上進行過優(yōu)化。該試劑盒具有靈活、快速、高準確度和高靈敏度的優(yōu)勢(表2)，可對48個樣品分別進行4個獨立的雙重檢測反應(yīng)，即3組調(diào)控區(qū)域(P35S/CaMV, P34S/FMV, TNOS/A. tumefaciens)和植物內(nèi)源基因/內(nèi)部陽性對照(IPC).

表2 TaqMan 轉(zhuǎn)基因篩查試劑盒靈敏度檢測：試劑盒陽性對照稀釋4個梯度后分別進行6個重復(fù)

表2  TaqMan 轉(zhuǎn)基因篩查試劑盒靈敏度檢測：試劑盒陽性對照稀釋4個梯度后分別進行6個重復(fù)

另外，Life Technologies公司還有TaqMan 轉(zhuǎn)基因玉米35S檢測試劑盒(貨號：4327690)和TaqMan 轉(zhuǎn)基因大豆35S檢測試劑盒(貨號：4327691)，利用兩種不同熒光標記的探針分別檢測35S啟動子元件和植物內(nèi)源基因，從而計算轉(zhuǎn)基因成分含量。

Note: You clicked on an external link, which has been disabled in order to keep your shopping session open.

賽默飛世爾科技（中國）有限公司
地址(中國總部)：上海市浦東新區(qū)新金橋路27號3& 6& 7號樓 電話：400-650-5118 & 800-810-5118
ICP備案號：滬ICP備11003924號 | 經(jīng)營證照