上海光學(xué)儀器廠,曾經(jīng)為發(fā)展民族工業(yè),填補(bǔ)國內(nèi)空白,奠定了國家光學(xué)工業(yè)的系列化, 并先后與德國蔡司-歐波同(ZEISS-OPTON)、徠卡(LEICA)等國際著名光學(xué)公司合作生產(chǎn)各類精密光學(xué)儀器。
顯微鏡教學(xué)四 復(fù)式光學(xué)顯微鏡的使用方法
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(1) 顯微鏡的取用
一手握鏡臂,一手托住鏡座,將顯微鏡輕輕放置在桌上,距桌緣約一個(gè)姆指距離之處.
調(diào)整坐椅至適當(dāng)高度,使自己可以輕松地使用顯微鏡.
取 95% 酒精及拭鏡紙,將所有鏡頭擦拭干凈(※注意:僅能以單一直線方向擦拭).
將玻片標(biāo)本平穩(wěn)地放在載物臺(tái)上,以玻片夾夾好(※注意:請確認(rèn)是否夾好,以免玻片跳起,造成同學(xué)受傷或損及顯微鏡鏡頭).
(2) 低倍鏡的使用
先將載物臺(tái)降至最低點(diǎn),轉(zhuǎn)動(dòng)旋轉(zhuǎn)盤( Revolving nosepiece ),使低倍鏡位于鏡筒正下方.
打開光源,調(diào)整光源調(diào)整鈕及光圈( Iris diaphragm ),使視野中之亮度適當(dāng).
將所要觀察的玻片放在載物臺(tái)上,以玻片夾夾好,并轉(zhuǎn)動(dòng)調(diào)節(jié)鈕 ( mechanical stage control knobs ) 以調(diào)整玻片位置.轉(zhuǎn)動(dòng)調(diào)節(jié)輪 ( Adjustment knob ),至低倍鏡與載物臺(tái)相距約 0.1 cm(或載物臺(tái)無法再上升)為止.
由接目鏡觀察,同時(shí)以靠向自己的方向緩緩轉(zhuǎn)動(dòng)調(diào)節(jié)輪( Adjustment knob ),使載物臺(tái)下降,直到影像清晰為止.若視野太亮或太暗,皆可調(diào)整光源調(diào)整鈕及光圈( Iris diaphragm ) ,使視野中之亮度適當(dāng).
(3) 高倍鏡的使用
先使用低倍鏡找到欲觀察的目標(biāo),將該部位調(diào)整至視野中央.
重覆 低倍鏡的使用 方法之A.~D..
(4) 油鏡的使用
先使用高倍鏡找到欲觀察的目標(biāo),將該部位調(diào)整至視野中央.
將高倍鏡轉(zhuǎn)開,加一小滴油鏡專用油( immersion oil ) 于所見物像范圍的玻片上(即光線照亮的區(qū)域),換用100倍接物鏡(即 oil immersion objective),小心將油鏡浸于油中,重新調(diào)整光圈,并緩慢轉(zhuǎn)動(dòng)調(diào)節(jié)輪( Adjustment knob ),直到影像清晰為止.
(5) 注意事項(xiàng)
嚴(yán)忌單手提取顯微鏡.
若須移動(dòng)顯微鏡,務(wù)必將顯微鏡提起再放至適當(dāng)位置,嚴(yán)忌推動(dòng)顯微鏡(推動(dòng)時(shí)造成的震動(dòng)可能會(huì)導(dǎo)致顯微鏡內(nèi)部零件的松動(dòng),切記!!),使用顯微鏡請務(wù)必小心輕放.
使用顯微鏡時(shí)坐椅的高度應(yīng)適當(dāng),觀察時(shí)更應(yīng)習(xí)慣兩眼同時(shí)觀察,且光圈及光源亮度皆應(yīng)適當(dāng),否則長時(shí)間觀察時(shí)極易感覺疲勞.
轉(zhuǎn)動(dòng)旋轉(zhuǎn)盤時(shí)務(wù)必將載物臺(tái)降至最低點(diǎn),以免因操作不當(dāng)而刮傷接目鏡之鏡頭.
標(biāo)本染色或其他任何操作皆應(yīng)將玻片取下,操作完成后再放回載物臺(tái)觀察,切勿在載物臺(tái)上操作,以免染劑或其他液體流入顯微鏡內(nèi)部或傷及鏡頭.
觀察完一種材料,欲更換另一種材料時(shí),務(wù)必將載物臺(tái)下降至最低點(diǎn),換好玻片后再依標(biāo)準(zhǔn)程序重新對焦,切勿直接抽換標(biāo)本,以免刮傷鏡頭或玻片標(biāo)本.
顯微鏡使用前后皆應(yīng)以拭鏡紙 ( Lens paper ) 及 95% Alcohol清潔所有鏡頭,擦拭時(shí)應(yīng)沿單一直線方向輕拭,不可旋轉(zhuǎn)磨擦.
擦拭顯微鏡鏡頭時(shí)只能用拭鏡紙 ( Lens paper ),切勿用其他紙張或手指接觸鏡頭.
用畢顯微鏡應(yīng)將載物臺(tái)下降至最低點(diǎn),并將低倍鏡對準(zhǔn)載物臺(tái)中央圓孔處,將電源線卷好,蓋上防塵罩,并收入存放柜中.
若長期不使用,應(yīng)以 Xylene ( Xylol ) 清潔所有鏡頭.
增加光學(xué)顯微鏡影像的明暗對比的方法很多,例如利用染色法處理樣本,或在顯微鏡上附加特殊裝置(例如位相差顯微鏡 、暗視野顯微鏡 、干涉顯微鏡 、偏光顯微鏡、X光顯微鏡、螢光顯微鏡 、紫外光顯微鏡等)。
本學(xué)年同學(xué)將使用到的顯微鏡有雙目鏡復(fù)式光學(xué)顯微鏡 及雙目鏡解剖顯微鏡兩種,以下將分別介紹其各部位的名稱及功能。
(1) 雙目鏡復(fù)式光學(xué)顯微鏡
接目鏡 :放大倍率為 10,可因應(yīng)各人的雙眼距離來調(diào)整,內(nèi)安裝有目鏡測微尺,有些另裝有指針,裝有目鏡測微尺的接目鏡上有調(diào)節(jié)輪,可因應(yīng)各人焦距來調(diào)整。
鏡筒 :介于接目鏡與接物鏡之間。
旋轉(zhuǎn)盤 :接于鏡筒下方,通常有四個(gè)接孔,可接不同倍數(shù)的接物鏡,本身可以旋轉(zhuǎn)藉以更換不同倍數(shù)的接物鏡。
接物鏡:有scanning power objective ( 3.2)、low power objective ( 10)、high power objective ( 40)、oil immersion objective ( 100) 四種。
載物臺(tái):為放置標(biāo)本玻片的平臺(tái),中央有一圓孔,可供光線通過。我們所使用的載物臺(tái)為機(jī)械式載物臺(tái) ,上面有玻片夾及調(diào)節(jié)鈕 ( mechanical stage control knobs ),可固定玻片及調(diào)整玻片位置。
集光器 ( Condenser ):位于載物臺(tái)下方中央,由許多透鏡組合而成,用以集合光線,使之投射于標(biāo)本上。
光圈(虹膜) ( Iris diaphragm ):連接于集光器下方,上有一支調(diào)整柄 ( aperture diaphragm control ),可用以調(diào)整光圈孔徑大小,以調(diào)整投射于標(biāo)本上之光線強(qiáng)弱。
照明器 ( Illuminator ):位于鏡座上,內(nèi)設(shè)光源為鎢絲燈,直接提供觀察所需之光源。
鏡臂 ( Arm ):連接鏡筒及鏡座,并供握取顯微鏡。
調(diào)節(jié)輪( Adjustment knob ):位于鏡柱兩側(cè),可調(diào)整載物臺(tái)的升降,以供對焦。依順時(shí)鐘方向(遠(yuǎn)離自己身體方向)旋轉(zhuǎn),則載物臺(tái)上升,反之則下降(*注意:此方向有時(shí)依機(jī)型廠牌不同而異,也有調(diào)節(jié)輪是調(diào)節(jié)鏡筒之升降者,首次使用時(shí)可先緩慢旋轉(zhuǎn)試試看即可確定)。
鏡座 ( base ):顯微鏡之最底部。其右側(cè)有光源調(diào)整鈕,可調(diào)整照明器內(nèi)光源亮度;后方接有電源線,有時(shí)尚有光源開關(guān)。
(2) 雙目鏡解剖顯微鏡 (Binocular dissecting microscope) (Stereomicroscope)
接目鏡( Eyepiece ):放大倍率為 8( M1A 機(jī)型)或10( M3 機(jī)型 ),有些的接目鏡上有調(diào)節(jié)輪( M3 機(jī)型 ),可因應(yīng)各人焦距來調(diào)整。
鏡筒 ( Body tube ):介于接目鏡與接物鏡之間。
接物鏡( Objective ):M1A 機(jī)型只有1一種;M3 機(jī)型則有6.4、10、40三種,鏡筒兩側(cè)有切換鈕,可切換三種不同倍數(shù)的物鏡。
調(diào)節(jié)輪( focusing knob ):位于鏡柱兩側(cè),可調(diào)整接物鏡的升降,以供對焦。依順時(shí)鐘方向(遠(yuǎn)離自己身體方向)旋轉(zhuǎn),則接物鏡上升,反之則下降。
鏡柱( Pillar ):連接鏡筒及鏡座,并供握取顯微鏡。
照明器 ( Illuminator ):位于鏡座上,內(nèi)設(shè)光源為鎢絲燈,直接提供觀察所需之光源(※注意:由于此光源為熱光源,使用時(shí)會(huì)發(fā)熱,應(yīng)避免直接接觸照明器,以免燙傷),開關(guān)在電源線上。
鏡座 ( base ):顯微鏡之最底部。其上有載物臺(tái),為一圓盤,有黑白兩色,可依需要自行變換。
顯微鏡教學(xué)一
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顯微鏡觀察
微生物顧名思義,就是十分微小的生命體。以人類肉眼是很難看見微生物的外觀,更何況是研究其外部型態(tài)以及內(nèi)部構(gòu)造。因此在微生物學(xué)中,使用顯微鏡的觀察十分重要。除了觀看微生物的外觀之外,許多的測試以及化學(xué)作用的呈色結(jié)果,都需要依靠顯微鏡的觀察。
學(xué)習(xí)目標(biāo):于本次實(shí)驗(yàn)結(jié)束后你應(yīng)該知道
各公制單位之名稱、代表數(shù)值及各單位間的轉(zhuǎn)換
復(fù)式光學(xué)顯微鏡 各部位的名稱及功能
解剖顯微鏡各部位的名稱及功能
比較復(fù)式光學(xué)顯微鏡及電子顯微鏡 之間的差異
字母e經(jīng)過復(fù)式光學(xué)顯微鏡轉(zhuǎn)換后之影像
如何計(jì)算視野直徑及各鏡頭下之放大倍率
如何計(jì)算鏡頭下各細(xì)胞及標(biāo)本之實(shí)際大小
依序?qū)懗鍪褂脧?fù)式光學(xué)顯微鏡觀察之步驟
光學(xué)顯微鏡鏡頭的保養(yǎng)方法
油鏡的使用方法及使用之后如何去除鏡頭及玻片上的油
顯微鏡課程大綱筆記
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普動(dòng)實(shí)驗(yàn)第一堂課的內(nèi)容是「復(fù)合顯微鏡的使用和維護(hù)」。雖然學(xué)生在國高中階段幾乎都用過顯微鏡,但是顯微鏡的使用方式還是得從頭好好教一次。
課堂流程重點(diǎn):
上課前先開顯微鏡箱的鎖(之后上組織課程時(shí)亦然,請值日生先把所有柜子打開,節(jié)省上課中的移動(dòng)、開鎖時(shí)間)
顯微鏡課程開始前,讓學(xué)生先拿出顯微鏡。
注意:
(1)桌面凈空;
(2)用雙手拿顯微鏡:一手拿鏡臂,一手托底座;
(3)小心輕放,嚴(yán)禁於桌面拖行;
(4)防塵套與眼罩放回顯微鏡箱中;
(5)只能碰觸有烤漆和有刻紋的地方;
(6)先不要插上電源
講解順序、內(nèi)容。對照部位講解功能原理,先講課再逐步操作。
講光圈時(shí)談景深
NA(照孔數(shù)值):直接看顯微鏡鏡頭上的數(shù)值,Lens 長度(改變?nèi)肷浣牵?/p>
tube length
操作:step by step。
補(bǔ)充教材:
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