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顯微鏡下計數(shù)酵母菌數(shù)量

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放大字體  縮小字體    發(fā)布日期:2019-03-15  來源:儀器信息網(wǎng)  作者:Mr liao  瀏覽次數(shù):858

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顯微鏡下計數(shù)酵母菌數(shù)量-圖像分析用光學(xué)儀器


酵母菌細胞數(shù)之定量分析

細胞數(shù)的定量攸關(guān)整個酵母菌增生試驗的基礎(chǔ),故一開始考慮采用三種方式進行,

一為顯微鏡下直接計數(shù),一為酵素免疫分析儀(ELISA reader)測量650 nm吸光值,
還有一種方式以分光光度計估算,酵素免疫分析儀與分光光度計原理雷同,
均是因增生的細胞產(chǎn)生吸光值,酵素免疫分析儀較快速,一次可以分析96個樣品,

但能分析的樣品量很少約150 m L。為了此試驗解酵母菌培養(yǎng)液對細胞計數(shù)定量的影響,
以360至800 nm每隔20 nm測其吸光值與含有酵母菌的菌液做一比較,

兩者趨勢一致,波長越短吸光值越向上飄移,360至500 nm培養(yǎng)液影響較大,
而波長500至800 nm之培養(yǎng)液本身吸光值較小,均在0.1以下,應(yīng)可作為估算酵母菌細胞個數(shù)所選擇的波長,
根據(jù)John Wiley 2002是以600 nm為固定波長。
John Wiley 2002建議以波長600 nm作為推估酵母菌細胞個數(shù)的固定波長,以波長600 nm進行以下測試

 

以不濃度的乙基雌二醇0、0.1、0.25、0.5、1、2.5 ppb及陽性控制組進行細胞增生試驗,
在第16、24、40、48小時進行觀察,結(jié)果如圖六所示。在第16小時增生還不明顯,第24小時除空白組與1ppb乙
基雌二醇外,均有增生的現(xiàn)象,隨濃度增加,而增生量增加,但是24小時后隨時間增加而有衰減的現(xiàn)象。
低濃度乙基雌二醇對酵母菌增生試驗

降低乙基雌二醇濃度對酵母菌增生情形進行測試,濃度分別為0、0.1、0.2、0.5、1、2、5、10、20、50、100、500、

500 ppn乙基雌二醇培養(yǎng)24小時,
一直到50 ppn才有反應(yīng),50至500ppn以分光光度計檢測看不出有何差別。

 
關(guān)鍵詞: 酵母菌 增生 波長 乙基 細胞
 
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