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顯微鏡觀察保細胞器結構-純化細胞實驗儀器

破碎細胞實驗監(jiān)控圖像顯微鏡廠商 咨詢：010-64034191

  對于像肝臟或腎臟這樣的組織，勻漿相對簡單;對于其他的組織和細胞培養(yǎng)物，
必須評估各種技術以確定一種策略來破碎細胞而不損傷目的細胞器。不管選擇什么技術，
建議用顯微鏡監(jiān)控整個過程以確保細胞器結構上的完整。器官和組織在研磨或剪切以

后，碎片懸浮在通常含有0.25mo1/L蔗糖的補加了單價或二價陽離子、蛋白酶抑制劑和
鰲和劑等的等滲勻漿緩沖液中。與肝、腎等實體組織相比，多數(shù)組織培養(yǎng)細胞在

使用玻璃或Teflon/玻璃勻漿器時在等滲溶液中很難勻漿。相反，培養(yǎng)細胞在收獲后被懸浮
在低滲介質中，一旦細胞被勻漿，就加上濃縮的蔗糖溶液調節(jié)勻漿物到等滲狀態(tài):

勻漿物在低滲溶液中的時間要越短越好，通常從開始收獲細胞到勻漿結束不要超過5分鐘一勻
漿物在低滲溶液中時間太長產生兩個問題:

細胞器開始破裂，由于溶酶體酶的泄漏.各種物質開始降解。為了避免低滲處理細胞，
可以用甘油處理(Graham and Sandal] 1979)用這種方法，細胞從周圍介質中吸收甘油并變得高滲:
這些細胞接著放人等滲或略微低

滲的介質中，多數(shù)細胞在不勻漿的情況下也會破裂，也有一些需要勻漿。甘油的濃度
高滲或低滲溶液中的蔗搪、處理的時問以及是否需要勻漿都取決于細胞的類型