光學(xué)顯微技術(shù)
光學(xué)顯微鏡的觀察依賴于細(xì)胞或組織的大小、厚度和樣品的對(duì)比度。
反差強(qiáng)的或染色的細(xì)胞可用亮視野或相差顯微鏡觀察,反光物可用
暗視野顯微鏡或反射光來觀察,雙折射細(xì)胞可用偏光顯微鏡觀察。
透明細(xì)胞既可用相差顯微鏡,也可用差異干涉相差顯微技術(shù)(DIC)來觀察,
使細(xì)微結(jié)構(gòu)的分辨率和對(duì)比度超過其他各種光學(xué)顯微方法包括相差顯微法。
圖像有三維顯像,視野淺,這意味著不會(huì)受到焦點(diǎn)以外信息的干擾,
具有很高的應(yīng)用價(jià)值。例如,研究雙重感染實(shí)驗(yàn)后吞噬小體內(nèi)粒子的共定位,
只要這些粒子足夠大。但是,分辨率仍較低,因?yàn)檩^小的細(xì)菌如柯克斯體或
分支桿菌會(huì)以小塊的形式出現(xiàn),另外還會(huì)有一些小的細(xì)胞器的干擾。
研究宿主一病原體交互作用的形態(tài)學(xué)方法。
重點(diǎn)在于各種方法的重要方面及其優(yōu)缺點(diǎn)、必要的補(bǔ)充。并不存在標(biāo)準(zhǔn)方案,
不同的方法都要進(jìn)行各種嘗試,經(jīng)歷各種錯(cuò)誤,
在用熒光或電子顯微鏡進(jìn)行細(xì)菌或細(xì)胞組分的免疫定位時(shí)尤為如此。
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