不同類型顯微鏡顯微樣品制備方法各不相同
顯微觀察的樣品制備顯微術(shù)的樣品制備可以是很簡(jiǎn)單的如放置載
玻片,或復(fù)雜的如超薄切片或是在使用透射電子顯微鏡時(shí)安裝銅格柵。
一般來(lái)說(shuō),樣品制備的變化取決于觀察的目的和所用顯微鏡的類
型。
可存活微生物通常是借助濕法安裝(wet mount )來(lái)觀察。在這
里,細(xì)胞懸浮在水、鹽水或其他液體媒質(zhì)中,液體維持生存力并允許
細(xì)胞移動(dòng)。濕法安裝可以在一個(gè)有蓋玻片的簡(jiǎn)單載玻片或是有特殊構(gòu)
造的載玻片上完成。
例如,在后一種情況中,含有樣品的液滴可以放置在玻璃蓋玻片
上,然后將凹面朝下的載玻片放在蓋玻片上。倒置蓋玻片和載玻片,
液滴會(huì)懸掛在蓋玻片上。因?yàn)榘济娉?,液滴不?huì)受載玻片的影響,
這樣會(huì)產(chǎn)生懸滴(hanging drop) 懸滴載玻片在監(jiān)測(cè)細(xì)菌游動(dòng)性方
面很有用。相差或DIC 顯微鏡經(jīng)常使用濕法安裝來(lái)使樣品的對(duì)比度最
大化
盡管在濕法安裝中可以確定形態(tài),但這一般是比較困難的,這是
因?yàn)槿鄙贅悠泛椭車浇橹g的對(duì)比和細(xì)節(jié),同時(shí)也因?yàn)槲⑸锸沁\(yùn)
動(dòng)的。
另外一種觀察形態(tài)和其它內(nèi)部結(jié)構(gòu)的方法是在載玻片中將樣品固
定、染色。這樣觀察到的僅是非存活生物,這是因?yàn)楣潭ê腿旧倪^(guò)
程會(huì)殺死生物。細(xì)胞的固定是在載玻片上將細(xì)胞的液態(tài)懸浮物涂抹成
薄膜,在空氣中晾干,制成涂片(smear )。
然后將涂片在火上輕微加熱幾秒鐘使其固定在載玻片上。用能看
見(jiàn)細(xì)胞細(xì)節(jié)的染料將涂片染色。有許多不同的染料供選擇,但通常將
它們分為帶正電荷的堿性染料(basic dye )和帶負(fù)電荷的酸性染料
(acidic dye)。帶負(fù)電荷的細(xì)胞成分如核酸吸弓I 堿性染料,那些
帶正電荷的如一些細(xì)胞膜成分,吸引酸性染料。
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