光學(xué)顯微鏡相襯裝置的使用和標(biāo)本的制作方法
(1 )準(zhǔn)備:將普通顯微鏡的物鏡、聚光器取下,換上相差鏡頭
及帶環(huán)狀光欄的聚光器。
(2 )取一片染色標(biāo)本用普通光對(duì)焦,使物鏡處于觀察高度,然
后移開標(biāo)本。取掉目鏡裝上望遠(yuǎn)鏡,轉(zhuǎn)動(dòng)望遠(yuǎn)鏡外圈對(duì)焦,使其能看
清亮圈,再通過聚光器上的兩只斜螺釘,將明暗兩個(gè)圈調(diào)到完全重疊,
并調(diào)節(jié)聚光器高度使兩個(gè)圈的圈壁厚度大體一致,每換一次物鏡均需
重對(duì)一次。
(3 )相板選擇:被檢物與媒介物(本底)相差在時(shí)用低吸收板
(L 或LL),反之用高(H ),一般用中(M ),例如細(xì)胞線粒體用
明高(BH),細(xì)胞核用明低(BL),高倍鏡用暗中(DM ),血片用
B 負(fù)(B -),但在配件中一般只備有DM及BM兩種鏡頭。
(4 )標(biāo)本制備:用較薄的載片(厚1.2 mm為好),蓋片用0.17-0-18,
的,細(xì)胞懸液的液滴不能厚(以不從蓋片邊緣溢出為限),細(xì)胞不能
成團(tuán),不能有氣泡,為防干燥最好在蓋片四周封上蠟,如需觀察細(xì)胞
活動(dòng)情況要保溫,需要時(shí)可作活體染色,可用中性紅、琴納綠等(稀
釋1 ~2萬倍),死細(xì)胞或切片用蘇木素、光綠、美藍(lán)等。
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