熒光顯微鏡操作使用的步驟和技巧-熒光分析
使用上海光學(xué)儀器一廠熒光顯微鏡時(shí),應(yīng)注意以下幾點(diǎn):
一、調(diào)節(jié)光源熒光顯微鏡在使用前需要您先調(diào)節(jié)好光柱,不要使
光柱與目鏡物鏡在同一垂直線上,不然要影響圖象的亮度,當(dāng)光源調(diào)
節(jié)好后,盡最不要再移動(dòng)鏡體。使用普通生物顯微鏡時(shí),為了調(diào)節(jié)光
源,應(yīng)將一張白紙放在反光鏡前,觀察燈泡焦點(diǎn)是否位于反光鏡正中,
如不在正中,則可調(diào)節(jié)燈室或顯微鏡的距離,以及燈泡的位置,務(wù)必
使光柱位于反光鏡的正中
二、檢查標(biāo)本時(shí),需先點(diǎn)燃高壓水銀燈3~5 分鐘,待光源發(fā)出的
強(qiáng)光穩(wěn)定后再觀察。如果要得到最佳的觀察效果可以在暗室中觀察標(biāo)
本。
原理是:這是由于光對(duì)人類視覺(jué)的作用相對(duì)性很強(qiáng),以及環(huán)境對(duì)
其影響也極大,同一顏色同一光強(qiáng),在不同環(huán)境下,人的感覺(jué)就不同。
因此,為了提高敏感性,應(yīng)在較暗的環(huán)境中進(jìn)行,以盡量減少外界光
線的干擾。觀察者進(jìn)入暗室后,應(yīng)在暗室中適應(yīng)5~10分鐘后再觀察標(biāo)
本。
三、由于紫外線是會(huì)損害眼睛的所以我們?cè)谡{(diào)正光源時(shí)應(yīng)戴上防
護(hù)眼鏡。
四、熒光顯微鏡的觀察時(shí)間最好是每次以1 小時(shí)左右比較好,超
過(guò)90分鐘則高壓水銀燈泡的發(fā)光強(qiáng)度逐漸下降,熒光減弱。此外,標(biāo)
本受紫外線照射15分鐘后,熒光明顯減弱,熒光顏色改變,這是熒光
色素與抗體發(fā)生暫時(shí)介離現(xiàn)象的結(jié)果,所以,最多不得超過(guò)2~ 3小時(shí)。
五、熒光顯微鏡的光源壽命是有限的(通常200 小時(shí)),反復(fù)開(kāi)
關(guān)就更能影響光源的使用壽命了,所以建議標(biāo)本應(yīng)集中檢查,節(jié)省時(shí)
間也保護(hù)光源,
在氣溫比較熱的時(shí)候,應(yīng)以電扇散熱降溫。如果嚴(yán)格些的話燈泡
使用時(shí),對(duì)其進(jìn)行登記使用時(shí)間。
使用完畢后需要再次使用的話需要等待燈熄滅后燈泡充分冷卻后
才能再次點(diǎn)燃。再有就是一天中應(yīng)避免多次的開(kāi)關(guān)閉光源。
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