一種是滋養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)方式，首先獲得具有不分裂不增殖但仍保持代謝活性的滋養(yǎng)層細(xì)胞。該細(xì)胞通過基因工程技術(shù)進(jìn)行改造，再經(jīng)過鈷60輻照，細(xì)胞膜表面穩(wěn)定表達(dá)多種細(xì)胞因子，在多種細(xì)胞因子協(xié)同作用下，外周血單個(gè)核細(xì)胞中的自然殺傷細(xì)胞得到定向激活和擴(kuò)增，該種培養(yǎng)方式的價(jià)格相對便宜，僅有3000元左右。從培養(yǎng)結(jié)果來看，細(xì)胞收獲量可達(dá)到20億/L的水平，NK表型陽性率達(dá)到80%-90%左右。
 

另一種是NK細(xì)胞培養(yǎng)方式是純因子細(xì)胞培養(yǎng)。顧名思義就是使用相應(yīng)的細(xì)胞因子來刺激單個(gè)核細(xì)胞，向NK細(xì)胞方向誘導(dǎo)，并配合相應(yīng)的細(xì)胞培養(yǎng)基，使NK細(xì)胞大量增殖。純因子細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)以其安全性高而著稱，其原因在于所使用的細(xì)胞因子，都是體內(nèi)環(huán)境原本就存在的。培養(yǎng)過程相當(dāng)于模擬體內(nèi)環(huán)境，促進(jìn)NK細(xì)胞的激活及大量增殖。日本在該項(xiàng)技術(shù)上走在國際前列。由于日本老齡化嚴(yán)重，因此抗衰老研究較多。NK細(xì)胞在抗衰老研究中的應(yīng)用符合其嚴(yán)格的風(fēng)險(xiǎn)管理原則。因此國內(nèi)使用的純因子試劑盒多進(jìn)口自日本。但由于技術(shù)壁壘，純因子試劑盒的價(jià)格一直居高不下，多在6000元以上。
 

那為什么越來越多的人不愿再用滋養(yǎng)層細(xì)胞的形式培養(yǎng)NK細(xì)胞呢？
 

雖然滋養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)方式從培養(yǎng)結(jié)果來看，細(xì)胞收獲量可達(dá)到20億/L的水平，NK表型陽性率達(dá)到80%-90%左右，價(jià)格便宜、效果穩(wěn)定，但用戶對此種培養(yǎng)方式實(shí)際是心存排斥的，主要原因是在培養(yǎng)過程中選用的滋養(yǎng)層細(xì)胞為腫瘤細(xì)胞。盡管從理論上講，經(jīng)過相應(yīng)處理的腫瘤細(xì)胞已經(jīng)不再具備增殖的可能性。但其潛在風(fēng)險(xiǎn)難以證明可以完全排除。另外，就是倫理方面的問題，將正常細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞共培養(yǎng)，然后將培養(yǎng)后的NK細(xì)胞回輸體內(nèi)，確實(shí)存在難以克服的倫理障礙。正如上述原因，確實(shí)制約了滋養(yǎng)層培養(yǎng)技術(shù)的推廣。