顯微鏡調(diào)焦需先用低倍鏡物鏡調(diào)焦上下調(diào)節(jié)聚光鏡
暗場顯微鏡的調(diào)節(jié)步驟大致如下:
(1)照明光源最好選用弧光燈或點光源。使用其他光
源時,光強要盡可能大一些,因為光線越強,則粒子的散射
光也強,容易看得很清楚。有人認為,暗場顯微術(shù)最好在暗
室中進行,這樣則對光源的要求可以低一些。
(2)選好光源后,用明視野聚光鏡按臨界照明法調(diào)節(jié)
好燈光。
(3)根據(jù)需要與可能選用合適的暗場聚光鏡。
(4)要仔細地作好顯微鏡的合軸調(diào)整工作。大多數(shù)暗
場聚光鏡在其上鏡片上有某種表示中心位置的“記號”。先用
物鏡對此“記號”調(diào)焦,然后通過聚光鏡上的定中心螺釘來
調(diào)節(jié)聚光鏡的中心。當“記號”的像位于視場正中央時,合
軸調(diào)節(jié)完畢。
(5)根據(jù)聚光鏡的要求,選定合適厚度的完好載玻
片,仔細清潔后制作切片。某些聚光鏡上配備有“載玻片厚
度補償裝置”,這時,只要檢驗這一調(diào)節(jié)裝皿,看其是否與所
用載玻片的厚度相適合。
(6)將聚光鏡的上鏡片滴上油液或水(切勿在其中形
成氣泡)。先用低倍鏡物鏡調(diào)焦。上下調(diào)節(jié)聚光鏡,當載玻片
上被照最明亮的面積是一個直徑最小的光點時,最為適宜。
聚光鏡的調(diào)焦比合軸更為重要。因為當稍微偏離準焦位
置時,許多衍射花紋迅速增大,以致產(chǎn)生假像,導致對結(jié)構(gòu)
的錯誤解釋。
(7)換上所需要的物鏡。如果需要,則再作一些細微
的調(diào)整。
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