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關(guān)于煙草護膚之中的禁限用化學(xué)物質(zhì)——“抗生素”的檢查進一步框架綜合

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放大字體  縮小字體    發(fā)布日期:2021-07-26  來源:儀器網(wǎng)  作者:Mr liao  瀏覽次數(shù):50
核心提示:近日廣東省食藥監(jiān)抽檢網(wǎng)購面膜發(fā)現(xiàn),超過20%的面膜中非法添加了糖皮質(zhì)激素,這種被稱為“皮膚鴉片”的物質(zhì)是一類甾體激素,依據(jù)《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》中提到這類物質(zhì)是嚴(yán)禁違法濫用添加于化妝品,若將其作為細(xì)嫩美白肌膚的功效成分,其會破壞人體激素平衡,如

近日廣東省食藥監(jiān)抽檢網(wǎng)購面膜發(fā)現(xiàn),超過20%的面膜中非法添加了糖皮質(zhì)激素,這種被稱為“皮膚鴉片”的物質(zhì)是一類甾體激素,依據(jù)《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》中提到這類物質(zhì)是嚴(yán)禁違法濫用添加于化妝品,若將其作為細(xì)嫩美白肌膚的功效成分,其會破壞人體激素平衡,如果長期使用,人體皮膚會產(chǎn)生激素依賴癥狀,停用后反而會加重皮膚過敏,出現(xiàn)紅斑、丘疹、毛細(xì)血管擴張等嚴(yán)重問題,激素依賴性皮炎發(fā)病只需要大約兩周時間,但是治療起來卻是一個漫長而棘手的過程。

?作為實驗室綜合供應(yīng)商的廣州綠百草整理了一些儀器公司針對GBT 24800.2-2009化妝品中四十一種糖皮質(zhì)激素的測定——液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法和薄層層析法的全年解決方案進行了匯總,以便廣大檢測單位以及人員參考。


實驗過程用到的整套標(biāo)準(zhǔn)品如下:

Aglinet — 化妝品中 41 種糖皮質(zhì)激素類藥物的測定


樣品前處理

稱取 0.2 g 樣品,加入3 mL飽和食鹽水和2 mL乙腈(2次)渦旋(IKA Vortex Genius 3)提取目標(biāo)物。合并二次提取的 4 mL 乙腈,加入 40 mL 水、0.2 mL亞鐵氰化鉀、0.2 mL 醋酸鋅,混勻后 5000 rpm 離心 10 min。上清液倒入 Bond Elut Plexa 聚合物小柱 60 mg/3 mL(上接 50 mL磨口漏斗),按固相萃取凈化過程獲得液質(zhì)上機液。



色譜和質(zhì)譜條件

儀器: Agilent 1260Infinity 液相色譜/6410三重四極桿液質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)

色譜柱:Agilent ZORBAXSB-C18,2.1 × 50 mm,1.8 μm,

部件號 827700-902

進樣量:2μ-L

流動相: A) 含 0.1% 乙酸的水溶液

B) 含 0.1% 乙酸的乙腈溶液

梯度洗脫:

時間/min??? ?%B

? ? ?0 ? ? ? ? ? 32

? ? 3.0 ? ? ? ? 32

? ?12.0? ? ? ? 75

? ?14.0? ? ? ? 75

? ?14.1? ? ? ? 32

流速:0.3 mL/min

柱溫:30℃

分離時間:16 min

離子源:ESI

干燥氣流量:5 L/min

干燥氣溫度:350℃

霧化器壓力:38 psi








化妝品劑型多樣、基質(zhì)復(fù)雜,所涉及的 41 種糖皮質(zhì)激素的藥效從弱效、中效、強效到超強效,分子特征為 17 碳原子環(huán)戊烷并多氫菲母核上具有不同基團的修飾,差異較大。從化妝品中完整提取并純化出數(shù)十種待測目標(biāo)物,并進一步建立多組分色譜分離、質(zhì)譜測定仍有很多困難。因此,好的樣品前處理方法非常關(guān)鍵。本文中使用的 Bond Elut Plexa 小柱,具有純化效果好、回收率高、流速快的特點,可以很好的用在大批量樣品檢測中,可作為化妝品中 41 種糖皮質(zhì)激素檢測的參考方法。


賽默飛世爾科技解決方案 - TSQ Quantum Access Max三重四極桿液質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)同時定量化妝品中41種糖皮質(zhì)激素



儀器方法

色譜系統(tǒng):Accela 600快速液相色譜系統(tǒng)

色譜柱:Hypersil Gold C18(50×2.1mm, 1.9μm)

流動相:水(含0.1%甲酸)/乙腈(含0.1%甲酸)

流速:400μL/min;

進樣量:10μL

梯度條件:


質(zhì)譜系統(tǒng):TSQ Quantum Access Max三重四極桿

質(zhì)譜條件:

離子化方式:HESI-Ⅱ

極性模式:正離子

霧化溫度:300℃

鞘氣:40 arb

輔助氣:15 arb

離子傳輸管溫度:300℃

質(zhì)譜掃描參數(shù):

掃描方式:t-SRM

掃描循環(huán)時間:0.3 s

分辨率:Q1分辨率分別設(shè)置為0.4和0.7 FWHM


標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品及基質(zhì)樣品的配制

取含41種糖皮質(zhì)激素的混合對照品溶液,各組分濃度均為0.5 μg/ml,稀釋至0.5ng/mL、1.0ng/ml、2.5ng/ml、5.0ng/ml、10ng/ml、25ng/ml、50ng/ml、100ng/ml,作為標(biāo)準(zhǔn)曲線工作樣品。分別取空白爽膚水及精華液基質(zhì)溶液,過濾膜后,配制成含20%乙腈的基質(zhì)溶液,并以此基質(zhì)溶液稀釋樣品至0.1ng/mL和0.5ng/mL。


結(jié)果與討論

色譜條件的優(yōu)化

色譜柱的選擇:分別考察了Hypersi l Gold C18 (50×2.1mm, 1.9μm)和Hypersil ODS C18(10×2.1mm, 3μm) 2根規(guī)格不同的C18色譜柱對41種激素成分的分離效果。結(jié)果表明,前者對41中組分中色譜保留行為非常相似的物質(zhì)能實現(xiàn)更好的分離,且由于前者粒徑小,能獲得更高的柱效。同時,由于Accela 600液相泵系統(tǒng)耐壓能力強,可使用高流速而大大減少色譜分離所需時間。




流動相及洗脫條件的選擇:分別考察了甲醇/水(0.1%甲酸)、乙腈/水(0.1%甲酸)等流動相系統(tǒng)對于41種激素成分的分離效果。結(jié)果表明,采用乙腈(0.1%甲酸)/水(0.1%甲酸)系統(tǒng)進行梯度洗脫更有利于41種激素的色譜分離。考慮到化妝品基質(zhì)的影響,延后目標(biāo)組分的保留時間可減小基質(zhì)的干擾,因此降低初始流動相中乙腈的比例至20%,得到的譜圖。




質(zhì)譜條件的優(yōu)化

根據(jù)待測糖皮質(zhì)激素分子結(jié)構(gòu)及參考國標(biāo)[12] ,選擇ESI(+) 作為離子化模式 ,將0.5μg/ml的標(biāo)準(zhǔn)液通過蠕動泵連續(xù)進樣,由TSQ Tune質(zhì)譜參數(shù)優(yōu)化軟件自動獲得最佳的子離子、碰撞能量及透鏡電壓。最終所選擇的母離子、特征離子和碰撞能量詳見表 1。圖3為部分糖皮質(zhì)激素的提取離子流圖(0.5ng/mL)。附表1:離子對信息:母離子、特征離子、碰撞能量和掃描時間。

?

方法學(xué)考察

靈敏度及線性:將標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(0.5ng/ml、1.0ng/ml、2.5ng/ml、5.0ng/ml、10ng/ml 、25ng/ml、50ng/ml 、100ng/ml)依次進樣,以峰面積對濃度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,各激素成分在0.5-100ng/ml范圍內(nèi)的線性相關(guān)系數(shù)大于0.99(見表2);基質(zhì)中各種激素的最低檢出限為0.1ng/ml,最低定量限為0.5ng/mL。精密度:取0.5ng/ml基質(zhì)加標(biāo)溶液重復(fù)進樣5次,各色譜峰保留時間穩(wěn)定,精華液基質(zhì)中各組分峰面積的RSD≤9.74%(見表2);爽膚水基質(zhì)中各組分峰面積的RSD≤9.77%(見表2)。結(jié)果表明該方法穩(wěn)定、可靠。





不同分辨率設(shè)置對方法靈敏度的影響以精華液基質(zhì)樣品為例,考察儀器分辨率設(shè)置對靈敏度的影響:下圖中同行左側(cè)色譜圖為0.7FWHM條件下獲得,右側(cè)為0.4FWHM條件下獲得。




實驗結(jié)論

本實驗應(yīng)用Thermo ScientificTSQ Quantum Access Max三重四極桿液質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng),建立了41種糖皮質(zhì)激素同時測定的方法,以基質(zhì)樣品為主考察了方法的靈敏度及重現(xiàn)性,同時考察了儀器不同分辨率設(shè)置對化合物檢測的影響。本方法對化妝品基質(zhì)中41種糖皮質(zhì)激素的定量下限為0.5ng/mL,最低檢測限可達0.1ng/mL。通過提高Q1的分辨率能有效降低基質(zhì)干擾,提高部分化合物的靈敏度。分別以爽膚水空白基質(zhì)、精華液空白基質(zhì)與對照液進樣比較,由色譜圖可看出所建立的方法特異性高,能用于化妝品中41種糖皮質(zhì)激素的檢測。分別在爽膚水基質(zhì)、精華液基質(zhì)中添加41種糖皮質(zhì)激素,濃度均為0.5ng/mL,各連續(xù)重復(fù)進樣5針方法重現(xiàn)性良好。TSQ QuantumAccess Max三重四極桿液質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)配有可加熱的電噴霧電離源、聚焦離子束的透鏡組件、90度彎曲碰撞池等,可有效提高信號響應(yīng),并降低中性噪音,是化妝品中痕量非法添加成分檢測的最佳選擇。



本方法采用Thermo scientificTSQ Quantum Access Max三重四極桿質(zhì)譜系統(tǒng),建立了同時定量爽膚水和精華油中41種糖皮質(zhì)激素的液質(zhì)聯(lián)用法,最低定量限為0.5ng/ml,檢測限為0.1ng/ml。該方法簡便、快速、特異性強且靈敏度高,可應(yīng)用于化妝品的實際檢測。


最后附上原GBT 24800.2-2009國標(biāo)中推薦用到的儀器耗材清單:



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關(guān)鍵詞: 激素 ml 基質(zhì) ng 色譜
 
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