培養(yǎng)細(xì)菌計(jì)數(shù)-細(xì)菌菌落培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)科研顯微鏡
菌落易于純化
一些細(xì)菌通過(guò)個(gè)體在瓊脂平板上繁殖而形成菌落,使菌株及突變
體得以純化。含有不同的突變體或菌株的細(xì)菌混合物被接種子瓊脂
平板后,單個(gè)的突變細(xì)菌或菌株將通過(guò)繁殖形成各自的菌落。然而
,這些菌落相互之間可能太靠近,以致無(wú)法分離或仍有可能含有不
同菌株。但通過(guò)挑取菌落并稀釋后,再接種于瓊脂平板上,便可出
現(xiàn)單個(gè)細(xì)菌經(jīng)繁殖而形成的不連續(xù)的菌落。在最初接種的平板上,
無(wú)論細(xì)菌有多么擁擠,只需一個(gè)或幾個(gè)菌落純化步驟,便可分離出
純的菌株。
進(jìn)行系列稀釋
在對(duì)培養(yǎng)的細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)或?yàn)榱朔蛛x純的菌落時(shí),常常需要先獲
得不連續(xù)的細(xì)菌菌落。然而,由于細(xì)菌如此之小。一次濃縮培養(yǎng)可
使lml培養(yǎng)液含幾億個(gè)細(xì)菌。如果直接將這樣的培養(yǎng)物接種于petri
氏平板,細(xì)菌將會(huì)在平板上生長(zhǎng)在一起,而不會(huì)形成不連續(xù)的菌落
。為此,就需在接種前進(jìn)行菌液稀釋,而系列稀釋則是最實(shí)用的方
法。
為了獲得非常稀少的突變體或其它類型的菌株,我們可以對(duì)細(xì)菌進(jìn)
行選擇性培養(yǎng)。為了分離出一個(gè)稀少的菌株,幾億個(gè)細(xì)菌被接種于
適合所需菌生長(zhǎng)的平板上,在此平板上只有所需菌株才能生長(zhǎng),而
其余大量細(xì)菌則無(wú)法生存。這種僅適合于所需菌生長(zhǎng)的培養(yǎng)條件被
稱為“選擇性條件”(Selective conditions)。如果一個(gè)營(yíng)養(yǎng)成份
是大多數(shù)細(xì)菌生長(zhǎng)所需的,而所需菌的生長(zhǎng)不需此成份時(shí),缺乏這
營(yíng)養(yǎng)成份的瓊脂平板就為所需菌株提供了“選擇性條件”,因?yàn)橹?br>有所需的被選擇的菌株才能在缺乏這種營(yíng)養(yǎng)成份的條件下進(jìn)行繁殖
并形成菌落。另外,溫度也可作為“選擇性條件”,即在某一溫度
條件下,能殺死大多數(shù)其它不需要的細(xì)菌,而所需菌能在此溫度下
進(jìn)行生長(zhǎng)繁殖。在這種溫度下進(jìn)行孵育,就為所需菌株提供了一個(gè)
“選擇性條件”。在菌株被選擇性性培養(yǎng)后,可挑取菌落,并在同
樣的選擇性條件下經(jīng)菌落純化而將其它污染菌分離掉。
對(duì)細(xì)菌進(jìn)行選擇性培養(yǎng)的結(jié)果是令人驚奇的。在你設(shè)計(jì)出一個(gè)
理想的選擇性培養(yǎng)條件后,可在瓊脂平板上的幾十億個(gè)細(xì)菌中選擇
出一個(gè)你所需的細(xì)菌,這相當(dāng)于在地球所有人群中挑出一個(gè)人。
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