芯片微陣列圖像CCD檢測精密光學(xué)熒光顯微鏡技術(shù)
基因芯片制備完成后,為進(jìn)一步提取鑲嵌在芯片中的生物遺傳
信息.需要采用光電檢測技術(shù)對芯片上的探針雜交信號進(jìn)行檢測、
定位和成像,以便獲得基因芯片微陣列雜交圖譜。首先利用激光或
熒光激發(fā)光源、精密光學(xué)顯微鏡(如熒光顯微鏡或共焦顯微鏡)及專
用光電探測器(光電倍增管或CCD相機(jī))對基因芯片表面經(jīng)過熒光標(biāo)
記的呈矩形陣列排列的探針雜交信號(熒光信號)進(jìn)行檢測,由于探
針點(diǎn)樣密度高、樣點(diǎn)小、雜交信號微弱.故采用的光電傳感器應(yīng)具
有高空間分辨率、高靈敏度、低噪聲和很好的線性響應(yīng)。然后采用
X一、7二維掃描平臺對芯片表面進(jìn)行連續(xù)掃描和雜交信號檢測.得
到呈陣列排布的探針雜交信號分布圖。為獲取基因芯片微陣列圖像
.需要采用雜交信號前置放大、模/數(shù)轉(zhuǎn)換、視頻一 Y 二維掃描
平臺對芯片表面進(jìn)行連續(xù)掃描和雜交信號檢測.得到呈陣列排布的
探針雜交信號分布圖。為獲取基因芯片微陣列圖像.需要采用雜交
信號前置放大、模/數(shù)轉(zhuǎn)換、視頻編碼、數(shù)/模轉(zhuǎn)換、視頻放大輸
出等電路進(jìn)行處理。對于基因芯片微陣列圖像CCD檢測、掃描、采
集系統(tǒng),由于采用熒光顯微鏡進(jìn)行芯片成像且成像視場小,因此一
次成像不能獲取芯片圖像全貌。為通過多次成像來獲得芯片清晰的
高分辨率全圖.還有必要對熒光顯微鏡進(jìn)行自動調(diào)焦控制,以及對
獲取的芯片局部掃描圖像再次進(jìn)行圖像拼接。至此.完成了基因芯
片雜交信號檢測和圖像掃描采集過程。
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