熒光顯微鏡光源是激光器較窄波長范圍內(nèi)產(chǎn)生光
相對于傳統(tǒng)顯微鏡來說,檢測光路中的點照明器與針孔可提高
橫向及縱向分辨率。而實際提高幅度取決于針孔大小。熒光成像時
,分辨率還會受到發(fā)射波長及激發(fā)波長的影響。
共聚焦顯微鏡有幾種,每一種都有其獨特之處及優(yōu)勢所在。熒
光標(biāo)本檢測最常用激光掃描共聚焦顯微鏡。正如其命名,這些熒光
顯微鏡的光源是激光器,通過掃描穿過標(biāo)本的激光束而成像。
激光器在較窄的波長范圍內(nèi)產(chǎn)生強光。幾種激光器的發(fā)射波長
及常見熒光團的激發(fā)光譜。由于氪一氬氣體激光器發(fā)射三種彼此分
離的波長(488nm、568nm、647nm),可同時顯示2或3種熒光團(如FI
TC、麗絲胺羅丹明和Cy5),所以它被普遍用于多波長共聚焦顯微鏡
。氪一氬氣體激光器的缺點在于它的壽命很短
激光掃描顯微鏡內(nèi)檢流計反射鏡的移動由計算機控制,使其掃描方
式有一定的靈活性。例如,通過縮小掃描面積及縮短樣本點之間的
距離對感興趣的部分進行放大。此外,許多激光掃描共聚焦顯微鏡
還能對單一條線進行反復(fù)掃描,或者使掃描儀停止移動直至只在監(jiān)
視器上的一個點顯示熒光。
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