培養(yǎng)基的制備
在幾乎所有的微生物實(shí)驗(yàn)過程中,培養(yǎng)是不可缺少的重要操作
。很多情況下,不培養(yǎng)就檢驗(yàn)不出微生物來,也就無從了解其性狀
。
培養(yǎng)基的選擇是從根本上影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的關(guān)鍵問題。特別是象
土壤里面多種微生物混在一起時(shí),要測定其梭生物數(shù)量,不管用什
么樣的培養(yǎng)基也不會(huì)把生存著的一切微生物幫培養(yǎng)出來。所以需要
充分了解所甩的培養(yǎng)基究竟主要能檢驗(yàn)出什么性質(zhì)的微生物。有關(guān)
培養(yǎng)基盼選擇將在第二章以后介紹,這里僅就一般的制備方法加以
說明。
在微生物的實(shí)驗(yàn)中,這些操作多是以連續(xù)或平行的方式進(jìn)行的
,但不能在同一實(shí)驗(yàn)室里進(jìn)行所有的過程。最為理想的是根據(jù)不同
的目的,設(shè)計(jì)符合各項(xiàng)操作要求的單獨(dú)的房間,但實(shí)際上有困難。
因此,從操作內(nèi)容的性質(zhì)上考慮,至少無菌室與其他房間要分開。
如果還有可能,則應(yīng)分別設(shè)置儀器洗滌、干燥和高壓滅菌室。進(jìn)而
設(shè)置恒溫室,把有關(guān)培養(yǎng)的裝置集中在一起。
高壓滅菌所用的高壓滅菌器是密閉耐壓的鍋,用煤氣或電力加熱。
鍋上安裝有壓力計(jì)和溫度計(jì),用于觀察鍋內(nèi)溫度和壓力。使用時(shí),
先在鍋內(nèi)加足水之后再加熱。用耐水紙和錫箔蓋在滅菌物質(zhì)上面,
防止冷凝水沾濕滅菌物質(zhì)和棉塞,同時(shí),應(yīng)待高壓鍋充分加熱之后
再放人滅菌的物件。蓋上鍋蓋,蒸汽大量增加,徹底排除內(nèi)部空氣
,這時(shí)關(guān)上排氣口。待上升到所要求的溫度后,繼續(xù)加熱維持到規(guī)
定的時(shí)間。滅菌結(jié)束后切斷熱源,觀察內(nèi)部溫度變化,當(dāng)下降至80
℃左右即可打開鍋蓋。還有,象清蛋白瓊脂培養(yǎng)基那類加熱易發(fā)泡
的物質(zhì),用普通方法滅菌易污染棉塞,甚至有時(shí)內(nèi)容物會(huì)冒出來。
這類物質(zhì)滅菌時(shí),先不蓋蓋,加熱一會(huì)兒,待滅菌物質(zhì)溫度達(dá)1 00
℃,排除空氣之后再蓋蓋,可在一定程度上防止發(fā)泡。
高壓滅菌器的密閉部分常常發(fā)生故障,蓋的襯墊、溫度計(jì)等部
分容易損壞。蓋蓋時(shí)要均勻地?cái)Q緊螺旋,要緊的是切莫不必要地?cái)Q
得過緊。另外,空燒也能損傷高壓鍋,這樣,會(huì)使耐熱性減弱,容
易發(fā)生事故。安全閥要經(jīng)常檢查。
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