單細(xì)胞培養(yǎng)分離實(shí)驗(yàn)倒置生物顯微鏡-配備計(jì)數(shù)軟件

單細(xì)胞系都是從培養(yǎng)的組織中分離得到的。開(kāi)始培養(yǎng)時(shí)，首先把從
植物器官切割下來(lái)的新鮮外植體轉(zhuǎn)移到含有合適生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)的固體培
養(yǎng)基上。在此培養(yǎng)基上，外植體產(chǎn)生愈傷組織，可以把此初始愈傷組織
與外植體分離，重新轉(zhuǎn)移到新鮮培養(yǎng)基上培養(yǎng)，從而得到合適數(shù)量的愈
傷組織。這樣的愈傷組織就可以轉(zhuǎn)移到液體培養(yǎng)基中，振蕩培養(yǎng)得到好
的懸浮細(xì)胞。懸浮培養(yǎng)能否成功主要取決于初始愈傷組織。有多種外植
體和培養(yǎng)基配方被用于成功誘導(dǎo)愈傷組織的產(chǎn)生等。在這些配方基礎(chǔ)上
改變或調(diào)整的培養(yǎng)基也被廣泛使用。

在這些培養(yǎng)基中加入了維生素、肌醇、蔗糖和生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，特別是
加入細(xì)胞分裂素使細(xì)胞發(fā)生分裂，當(dāng)加入lμmol／L的激動(dòng)素時(shí)，細(xì)胞
分裂效果最好。誘導(dǎo)產(chǎn)生的愈傷組織的生長(zhǎng)速率和脆弱性因外植體的不
同而有很大差異。用于懸浮培養(yǎng)的培養(yǎng)介質(zhì)要能夠使愈傷組織生長(zhǎng)良好
。

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