瓊脂營養(yǎng)培養(yǎng)基上生成菌落的細(xì)胞數(shù)計量顯微鏡
活菌計數(shù)在剛剛描述的計數(shù)方法中,活細(xì)胞和死細(xì)胞都計算進(jìn)去了
。在許多情況下,我們只對計算活細(xì)胞感興趣,并且為了此目的,
發(fā)展了活菌計數(shù)的方法?;罴?xì)胞定義為可以分裂和生成后代的細(xì)胞
,并且一般進(jìn)行的活菌計數(shù)就是確定樣品能夠在適宜的瓊脂營養(yǎng)培
養(yǎng)基上生成菌落的細(xì)胞數(shù)。在這種類型計數(shù)過程中是假定一個活細(xì)
胞只產(chǎn)生一個菌落。這里有兩種子板計數(shù)方法:涂布平板法和傾注
平板法。對涂布干板法而言,就是把濃度適當(dāng)?shù)牧坎淮笥?.1ml的
稀釋菌液,用一無菌玻璃刮刀涂布在瓊脂平板的表面。然后培養(yǎng)平
板,直到出現(xiàn)菌落,并計算菌落數(shù)。平板的表面保持千燥是非常重
要的,這樣可便.,?于菌液能滲入培養(yǎng)基中。一般加的菌液不會
大一一于0.1ml,因為多余的菌液不能滲入瓊脂培養(yǎng)基中,導(dǎo)致生
成的菌落相互重疊,難以計數(shù)。在傾注平板法中,用移液管一般吸
取0.1—1.Oml培養(yǎng)液加入到一無菌的空平皿中,然后加入熔化的
瓊脂培養(yǎng)基,并在桌面上輕輕旋轉(zhuǎn)使之混勻。因為這樣可以使培養(yǎng)
液與熔化的瓊脂混勻。在此法中使用的培養(yǎng)液是可以大于涂布平板
法中用的培養(yǎng)液量。但是在傾注平板法中,熔化的培養(yǎng)基溫度應(yīng)在
4512左右,使微生物在短時間內(nèi)能夠忍受,不至于被熱的培養(yǎng)基燙
死,
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