培養(yǎng)基凝固菌塊樣品移植在玻璃環(huán)中培養(yǎng)觀察顯微鏡
細(xì)菌的排除方法
在分離培養(yǎng)的過(guò)程中,常會(huì)有細(xì)菌混入造成污染,怎樣排除這
些細(xì)菌,是研究工作中經(jīng)常遇到的問(wèn)題。
1.使用酸性培養(yǎng)基 為使培養(yǎng)基達(dá)到酸性,常使用鹽酸、磷酸
和乳酸。事先應(yīng)按所需pH值的酸濃度和用量計(jì)算好應(yīng)加入酸的數(shù)
量,在向培養(yǎng)皿中分注培養(yǎng)基之前就將酸混合?!阋笈囵B(yǎng)基pH
值為4—5。例如酸性馬鈴薯瓊脂就是在臨用時(shí)在每個(gè)培養(yǎng)皿中加入
25%的乳酸兩滴,再倒入培養(yǎng)基混合而成。
2.使用含抑菌物質(zhì)的選擇性培養(yǎng)基 為了抑制細(xì)菌,在培養(yǎng)基
中常加入青霉素+鏈霉素、氯霉素、慶大霉素、牛膽粉(oxgall)、孟
加拉紅或龍膽紫等;為抑制其他非目標(biāo)真菌,則常加入~定數(shù)量的
放線菌酮(環(huán)己酰亞胺)、五氯硝基苯(PCNB)、多果定(Dodine)、
堿式硫酸銅、摩洛殺(Morocide)等。一般抗菌物質(zhì)(如上述染料)
和殺菌劑等可以與其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)同時(shí)加入培養(yǎng)基,然后滅菌,但各
種抗菌素則是用細(xì)菌過(guò)濾器除菌,然后再加入已滅菌的熔化培養(yǎng)基
中備用。
3.使用玻璃環(huán) 在滅菌的培養(yǎng)皿中先加入部分培養(yǎng)基使之凝
固,在中部放上玻璃環(huán)后再加足培養(yǎng)基使玻璃環(huán)的下部埋在培養(yǎng)基
中,培養(yǎng)基凝固后將污染的菌塊移植在玻璃環(huán)中間進(jìn)行培養(yǎng)。真菌
菌絲就能從玻璃環(huán)之下穿過(guò)培養(yǎng)基生長(zhǎng)出來(lái),獲得不帶細(xì)菌的菌絲
。
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